壳聚糖固定化羊血超氧化物歧化酶工艺条件优化及酶学性质比较研究

以羊血为材料获得超氧化物歧化酶(SOD)酶液,采用壳聚糖进行SOD固定化,对壳聚糖用量、戊二醛体积分数、反应时间及pH值对SOD固定化的影响进行研究,通过正交试验优化工艺参数,并比较固定化酶与天然酶的酶学性质。结果表明:10mL比活力为5219.3U/mg的SOD样液与0.25g用体积分数0.7%戊二醛活化的壳聚糖在pH5.6的条件下充分反应2h,所得的固定化酶的活力最强;固定化SOD比天然SOD热稳定性提高了65.2%,耐酸碱性提高了48.4%,Km值为0.18mmol/L。因此,壳聚糖可用于制备性能较优的固定化羊血超氧化物歧化酶。

超声波辅助酶法分离提取葡萄酒泥酵母SOD工艺条件的优化

以葡萄酒泥酵母为试材,超氧化物歧化酶(SOD)比活力为指标,在超声功率、超声时间、蜗牛酶质量浓度、酶解pH值和酶解温度等单因素试验基础上,采用正交试验优化超声波辅助蜗牛酶法提取SOD的工艺条件。结果表明:提取工艺因素对SOD比活力影响大小顺序为超声时间>蜗牛酶质量浓度>超声功率>酶解pH值>酶解温度,1 g湿酵母悬浮于5 mL 0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液,其提取SOD最佳工艺条件为超声功率400 W、超声时间12 min、2.0 mg/100 mL蜗牛酶液1 mL、pH 6.6、温度37℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力达192.27 U/mg。结果表明超声波辅助酶法在葡萄酒泥酵母SOD的提取中具有较高的应用价值。

葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶分离提取工艺条件优化

以葡萄酒泥酵母试材,采用甲苯破壁法分离纯化超氧化物歧化酶(SOD),选择甲苯用量、作用时间、作用温度以及缓冲液pH进行单因素实验,通过L9(34)正交实验优化工艺参数。结果表明:在甲苯用量0.8mL/g,作用时间25min,作用温度50℃,磷酸缓冲液pH8.0的最优条件下,分离纯化的SOD平均比活力为178.73U/mg。此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。

超声波辅助提取葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶工艺优化

以葡萄酒泥酵母为试验材料,采用超声波辅助法分离提取超氧化物歧化酶(SOD).通过单因素试验,研究了料液比、超声波功率、超声波时间和热变性温度对SOD比活力的影响,并采用正交试验确定了超声波法分离提取SOD的最佳工艺参数.结果表明:葡萄酒泥酵母SOD提取的最佳工艺参数为料液比1∶2.5、超声功率400W、超声作用时间16min、热变性温度45℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力最高为169.32U/mg.此方法操作简单,成本低,所得SOD比活力较高.

碱性蛋白酶酶解提取羊血血红素工艺条件优化

以羊血为试材,血红素得率为指标,在加酶量、酶解pH、酶解温度和酶解时间等单因素实验基础上,采用正交实验优化工艺参数。结果表明最佳反应参数为碱性蛋白酶加酶量8000U/g血红蛋白、酶解pH8.5、酶解温度55℃、酶解时间4h,在此条件血红素得率达到85.3%,即1L羊血可提取3.93g血红素。该法所得产品的安全性高,适合工业化生产。

铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶工艺条件优化

目的:优化铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶(SOD)工艺。方法:采用单因素和正交试验,对影响SOD比活力的主要因素进行研究。结果:铜盐-热变性法分离提取SOD的最优工艺条件为热变性温度65℃、热变性时间15min、添加体积分数2.5%的10mmol/L CuSO4溶液,丙酮用量为溶血液的1.25倍,在此条件下得到的SOD比活力为2338.9U/mg。结论:此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。

糖类对羊血超氧化物歧化酶活性的影响

目的:研究糖类对羊血超氧化物歧化酶(SOD)活性影响关系。方法:以离子交换层析法制备的羊血SOD为原料,加入不同浓度的麦芽糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-木糖和D-甘露糖,25℃分别保温4、24、48、72h和96h后,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力,并计算相对酶活力。结果:海藻糖对羊血SOD有明显的激活和保护作用,高浓度的麦芽糖和低浓度的乳糖有一定稳定作用,其余糖类对SOD活性影响不大。结论:不同糖类在不同浓度下对羊血SOD活性影响不同。

羊血凝血酶制备条件优化

以羊血为试材,凝血酶比活力为指标,在凝血酶原沉淀pH、激活时间、激活温度、Ca2+浓度等单因素实验基础上,采用正交实验优化羊血凝血酶制备条件。结果表明,参试因子对凝血酶比活力影响大小顺序为pH、激活温度、Ca2+浓度和激活时间,最佳工艺条件为:pH5.2、激活时间2.5h、激活温度30℃、Ca2+浓度0.1mol/L。在此条件下,分离纯化的凝血酶比活力达268.3U/mg。

不同制备工艺对双黄连口服液有效成分含量及药效的影响

当前家禽养殖实践中，感冒作为高发性疾病常常给实际生产造成巨大损失，严重危害养禽业健康，已经成为影响当前家禽生产效益的主要疾病之一。感冒类疾病通常分为两类：一类为因季节交替、冷热交替、免疫应激等非传染性因素引起鸡群发病导致的普通感冒，以甩鼻、呼噜症状为主，若表证不除，郁而化热感染外邪则会发展成流行性感冒（风热感冒），并进一步导致复合感染，造成其他脏器损伤；另一类为因新城疫及传支病毒等传染性因素引起的发热、咳嗽、呼吸困难等流行性感冒类，患禽主要表现为低死亡率和轻度的呼吸道感染或产蛋率下降等临床症候群，全身器官病变迅速且严重，尤其是心、肺、肾等脏器，免疫系统也遭到破坏，继发细菌感染后易致病程延长，甚至出现高死淘现象。

中兽医药在家禽感染性疾病防治中的应用

近半个世纪以来,因为细菌耐药情况日益凸显,公众对食品安全、环境安全以及生态安全的关注度日益提高,我国紧随欧美国家逐步开始规范、限制抗生素在畜禽养殖过程中的应用。据农业农村部最新消息,药物饲料添加剂将在2020年全部退出,目前全国正在开展兽用抗菌药使用减量化行动试点工作。随之而来的是养殖行业急需一些有效、安全的药物来代替抗生素用于养殖过程中的疾病防控。中兽药以其绿色安全、无药残、无耐药性等特点受到广泛关注,该文从中兽医药的抗感染机理和应用方面阐述其在家禽感染性疾病防控中的优势和机会。

清瘟解毒口服液黄芩苷的HPLC法测定

为了对清瘟解毒口服液中的黄芩苷进行定量分析,探索中兽药质量管控的新方法,试验采用高效液相色谱(HPLC)法对黄芩苷进行定量检测。黄芩苷高效液相色谱条件为供试品制备:取药液1 m L,置于50 m L容量瓶中,加入适量50%甲醇溶液,超声处理20 min(100 W,40 k Hz),放置至室温,用50%甲醇溶液定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,所得供试品检测结果最稳定,适用于本制剂的检测。色谱条件:以Kromasil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈∶0.2%磷酸溶液(22∶78),检测波长为274 nm,流速为1.0 m L/min,柱温为40℃,进样量为10μL。结果表明:该方法对黄芩苷适用性和线性关系良好,精密度、重复性、加样回收率高。说明该方法可以作为清瘟解毒口服液的质量控制手段。

清瘟解毒口服液酶解提取工艺的研究

为了优化清瘟解毒口服液组方药材中活性成分的提取工艺,试验以黄芩苷含量为定量检测指标,选择纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶组成复合酶,采用正交试验设计筛选清瘟解毒口服液酶解提取的最佳工艺。结果表明:在复合酶作用剂量为0.1%的前提下,优选的最佳生物酶解提取工艺的技术参数为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的比例1∶1∶2.5∶2,p H值4.5,反应时间50 min,反应温度45℃。