来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合征模型的肠道菌群分析

目的探讨来曲唑(雌激素合成抑制剂)是否会对多囊卵巢综合征患者的肠道微生物群的组成、多样性和丰度有影响。方法利用来曲唑诱导并构建了PCOS大鼠模型,通过16S rRNA的测序方法分析了正常和PCOS大鼠模型的肠道菌群结构。结果在门水平,PCOS组的厚壁菌门(73.29%±5.34%vs.77.17%±4.01%)的丰度较正常组降低,拟杆菌门(23.85%±6.22%vs.17.21%±6.90%)的丰度增加。在属水平,PCOS的罗氏菌属(5.61%±3.20%vs.16.13%±6.20%)和苏黎世杆菌属(1.75%±2.23%vs.9.98%±7.34%)的丰度较正常组降低,而乳杆菌属(18.83%±11.50%vs.15.88%±7.06%)、普雷沃氏菌属(4.58%±1.09%vs.0.46%±0.15%)和瘤胃球菌属(2.97%±1.56%vs.1.16%±0.60%)的丰度增加,进一步分析了两组差异菌群的KEGG信号通路,结果显示PCOS大鼠模型的肠道内胆汁酸生物合成相关的信号通路发生了变化。结论来曲唑灌胃构建的PCOS大鼠模型的肠道菌群结构明显发生紊乱,并且可能与胆汁酸生物合成相关的信号通路有关。

异噻唑啉酮类杀菌剂对黑斑蛙胚胎和蝌蚪的急性毒性

异噻唑啉酮类杀菌剂1,2-苯并异噻唑-3-酮(BIT)和甲基异噻唑啉酮(MIT)虽已在多种行业中广泛使用,但目前有关其毒性尤其对水体中生物毒性的数据还较少。鉴于BIT和MIT在水体中普遍存在,本文研究了这两种污染物对两栖动物黑斑蛙胚胎和蝌蚪的急性毒性。黑斑蛙胚胎和蝌蚪分别暴露系列浓度的BIT和MIT,观察化学品对其生长、发育和运动的影响,计算96小时半数致死浓度(96 h-LC50)和96小时半数致畸浓度(96 h-TC50),确定最小生长抑制浓度(MCIG)。结果发现,BIT对黑斑蛙胚胎的96 h-LC50和96 h-TC50分别为2.99 mg·L-1和0.60 mg·L-1,MCIG小于0.40 mg·L-1,对蝌蚪的96 h-LC50为6.44 mg·L-1。MIT对黑斑蛙胚胎的96 h-LC50和96 h-TC50分别为5.30 mg·L-1和2.36 mg·L-1,MCIG为2.59 mg·L-1,对蝌蚪的96 h-LC50为7.58 mg·L-1。根据《化学农药环境安全评价准则报批稿》中两栖动物蝌蚪急性毒性的分级标准,判定BIT和MIT的毒性等级为中等。该毒性数据可为异噻唑啉酮类杀菌剂的环境管理提供参考。

动物模型在间充质干细胞治疗慢性肝病临床前研究的应用

慢性肝病进一步发展为肝纤维化并导致肝硬化,此时除了器官移植外没有更为有效的治疗方法。然而器官缺乏的问题迫使人们寻找更为有效的治疗策略。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)有着免疫调节、分化成肝细胞、促进原位肝细胞再生和抑制肝星状细胞的激活等能力,所以利用MSCs开展细胞移植治疗具有非常广阔的前景。本文通过综述各类人的肝病动物模型和运用这些动物模型开展MSCs细胞移植治疗肝病的临床前研究的进展和意义,将为今后在MSCs开展临床治疗的广泛应用中提供安全性和有效性评价的科学依据。

非洲爪蟾胚胎用于发育神经毒性测试的方法

在美国材料与测试协会(ASTM)的非洲爪蟾胚胎致畸试验(FETAX)的基础上,以已知具有发育神经毒性的氯化甲基汞为模式化合物,探索一种以体征、运动神经元形态和运动行为参数为终点指标的研究发育神经毒性的方法.非洲爪蟾胚胎暴露氯化甲基汞3 d时,观察到暴露组胚胎的运动能力随暴露浓度(100—400 nmol·L-1)的增加而减弱.暴露4 d发现300 nmol·L-1和400 nmol·L-1暴露组胚胎体长和运动神经元明显短于对照组.暴露持续7 d,通过行为分析软件对蝌蚪运动行为定量,发现暴露处理的蝌蚪的游泳速率明显小于对照组.以上结果显示,非洲爪蟾胚胎可用来研究化学品的发育神经毒性,胚胎的体征、运动神经元形态和运动行为可以作为相对敏感的评价指标.

双酚A与其替代品对黑斑蛙急性毒性的比较

双酚F(BPF)和双酚S(BPS)作为双酚A(BPA)替代品广泛使用,然而有关BPF和BPS的毒性数据非常有限。采用系列浓度的BPA、BPF、BPS溶液,暴露黑斑蛙胚胎和蝌蚪96 h,通过半致死浓度(LC50)、最小生长抑制浓度(MCIG)和致畸率等指标比较3种化合物的急性毒性。结果显示:100 mg·L-1BPS未导致黑斑蛙胚胎及蝌蚪畸形和死亡。BPA和BPF对黑斑蛙胚胎的96h-LC50分别为7.68 mg·L-1和7.99 mg·L-1,MCIG分别为4.47 mg·L-1和4.77 mg·L-1,最大致畸率为33.33%;对蝌蚪的96 h-LC50分别为9.00 mg·L-1和9.52 mg·L-1。依据《化学农药环境安全评价准则》的毒性分级标准,判定BPA和BPF的毒性等级为中毒,BPS的毒性等级为低毒。表明BPF急性毒性与BPA相当,BPS急性毒性低于BPA。本研究数据可为BPF、BPS作为BPA替代品的生产和使用以及相应的环境管理提供毒理学参考。

应用黑斑蛙胚胎测试化学品发育毒性的方法

选择合适的尤其是本土生物种进行化学品生态毒性评估,对于各国化学品的环境管理十分重要。本文选择我国本土两栖种黑斑蛙的胚胎为试验生物,以半数致死浓度LC50、半数致畸浓度TC50、致畸指数TI及最小抑制生长浓度MCIG为终点指标,建立了黑斑蛙胚胎发育毒性试验方法。以五氯酚、视磺酸、氯化镉、重铬酸钾为测试物研究了方法的敏感性,并以五氯酚为测试物研究了方法的可重复性。结果显示:五氯酚、视磺酸、氯化镉和重铬酸钾对黑斑蛙胚胎的LC50分别为572.3μg·L-1、54.8μg·L-1、6.8 mg·L-1和97.5 mg·L-1。五氯酚、视磺酸和氯化镉对黑斑蛙胚胎的TC50分别为246.5μg·L-1、18.7μg·L-1和3.4 mg·L-1,TI分别为2.3、2.9和2.0,MCIG分别为160.0μg·L-1、10.1μg·L-1和2.4 mg·L-1。重复性试验发现,五氯酚的LC50、TC50、TI及MCIG的变异系数分别为12.6%、18.0%、23.0%和18.6%。与文献中非洲爪蟾胚胎试验的数据比较,这些数据显示黑斑蛙胚胎与非洲爪蟾胚胎对测试物的敏感性存在一定的差异,各个终点指标的变异系数相当。因此,本文建立的黑斑蛙胚胎发育毒性试验可以用于化学品的发育毒性评价,为我国化学品环境管理提供技术支持。

红曲菌TS2031色素提取条件的研究

针对分离得到的一株红曲色素高产菌TS2031,利用不同的乙醇浓度、浸提时间、浸提温度和pH对红曲色素的提取条件进行研究。结果表明:所得色素在406nm和503nm处有最大吸收值,色价最高的红曲色素提取条件是:乙醇浓度90%,浸提时间10h,浸提温度50℃,自然pH,平均色价660.47U/g;色调最好的红曲色素提取条件是:乙醇浓度90%,浸提温度30℃,浸提时间10h,自然pH,平均色调0.8036。

路面养护工程雾封层工艺实践

公路养护阶段,为减少路面泛油、车辙、断裂等问题,恢复功路面基础功能。以雾封层养护技术为例,提出路面基层施工措施与雾封层工艺操作方法,雾封层技术防水效果高、抗老化性能强、持久性能强,能有效解决路面病害问题,提升路面使用年限。

人脐带间充质干细胞对卵巢早衰大鼠模型的潜在治疗机制

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对卵巢早衰(POF)的治疗作用及其机制。方法将22只清洁级雌性SD大鼠接受环磷酰胺腹腔注射,连续注射14 d,构建POF模型,POF大鼠模型建立成功后,对其中11只POF大鼠注射生理盐水作为对照组(POF组),其余11只通过尾静脉移植培养状态良好的hUC-MSCs(POF+MSCs组),分别在第2天、第10天和第18天安乐处死两组大鼠并进行心脏采血,最后收集血清进行蛋白芯片检测和生物信息学分析。结果与POF组相比,hUC-MSCs治疗后第2天,促炎因子白细胞介素(IL)-2、IL-6和IL-2Rα表达均上调(P均<0.05);治疗后第10天,促炎因子IL-2Rα表达下调(P<0.05);治疗后第18天,促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β表达均下调(P均<0.05)。与hUC-MSCs治疗后第2天相比,hUC-MSCs治疗后第18天,促炎因子γ干扰素(IFNG)、TNF-α和IL-1β表达均下调(P均<0.05),并且在GO富集分析的生物学过程中涉及调控炎症相关通路的变化;在KEGG富集分析的结果中,与炎症相关的主要信号通路JAK-STAT也有显著富集,提示hUC-MSCs在体内可能通过JAK-STAT信号通路来抑制促炎因子,从而改善炎性反应。结论hUC-MSCs进入体内后可能通过JAK-STAT信号通路改善炎性反应,进而改善POF的卵巢功能。

构建逆转录病毒PBabepuro-Bcl-2表达质粒及稳定转染细胞株

目的:构建pBabepuro-Bcl-2逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中建立过表达Bcl-2稳定转染细胞。方法:以人上皮细胞的cDNA为模板,利用X-tremeGENE HP(Roche)转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法在蛋白水平检测表达,利用逆转录病毒感染NIH3T3细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pBabepuro-BCl-2,蛋白水平检测证实其在293T细胞可以有效地表达,成功建立了过表达Bcl-2的NIH3T3稳定转染细胞。结论:通过构建pBabepuro表达质粒及在NIH3T3建立过表达Bcl-2稳定转染细胞,为进一步研究Bcl-2的功能调控奠定了基础。

网络教学在分子生物学教学中的实践研究——以“钉钉直播+在线学习平台”模式为例

2020春节后的疫情特殊时期,很多高校的本科生并未返校,而是通过网络完成学业。钉钉平台具有强大的后台服务系统成为这段时期的主力军并被广大中小学生及大学生所认可,但钉钉直播缺乏课后及学习自主性活动,因此我们利用“钉钉直播+在线学习平台”的双重模式完成了分子生物学教学任务,包括课前预习、上课讲授、课后作业、期中考试、实验课程和期末考试等所有内容,大大提高了学生在家上课的学习效率。文章基于“钉钉直播+在线学习平台”实施的一学年度分子生物学的在线教学过程实践,为其他高校的分子生物学教学及同类型课程的在线教学提供参考。

路面施工中环氧沥青混凝土的应用

依托某位于山岭重丘区的新建高等级公路工程,从材料性能、矿料级配、油石比及固化时间等方面进行了环氧沥青混凝土配合比设计,并对各阶段施工关键技术进行分析探讨。根据分析结果,环氧沥青混凝土与传统SBS改性沥青相比,混凝土材料物理力学性能、水稳性、高温稳定性等大幅提升,且环氧沥青混凝土施工工艺简便,造价虽比传统改性沥青略高,但可使沥青路面路用性能大幅提升,应用效果良好,市场前景广阔。

梁桥施工中超高性能混凝土薄层加固技术的应用

槽型梁桥板梁薄壁体系受力情况复杂,且发生病害的可能性较大,基于此,以某高速公路两座槽型梁桥工程为例,根据其病害形式提出了超高性能混凝土薄层加固方案,并对加固效果进行了ANSYS有限元分析。分析结果表明,在槽型梁甲式预制钢混桥面板底部浇筑一层超高性能混凝土层,并使之与原混凝土结构形成整体受力体系,在裂缝等病害得到有效修复的同时,甲式预制钢混桥面板刚度提升且挠度减小,受力状况显著改善。

卵巢衰老的机制与治疗策略

卵巢作为女性的重要生殖器官在维持生殖健康和生活质量中具有重要作用。卵巢衰老是指卵巢功能下降直至最终衰竭的过程,不仅会导致女性生育能力的下降,而且还会加速女性衰老并引起一系列相关疾病,严重威胁女性生殖健康和生活质量。因此,阐明卵巢衰老的机制并进一步探究卵巢的抗衰老策略,对减缓卵巢衰老和保持女性生育力具有重要意义。本综述回顾分析了国内外卵巢衰老相关研究,总结了当前卵巢衰老的相关机制并提出了相应的预防和治疗策略。

间充质干细胞冻存方法的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞,它能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞,因此已成为细胞治疗的重要候选种子细胞,特别在各种退行性疾病和自身免疫性疾病的组织修复和免疫调节方面有良好的应用前景.有效的应用须建立在有生物学特性保持良好的充足MSCs的前提下.由于临床上细胞移植的供体和受体往往存在不同时性,很难保证即离即用,且充足的数量需求保证也会是一个问题.因此,能保证良好生物学特性稳定保持的MSCs冻存方法就显得尤为重要.本文即对MSCs冻存技术的研究进展进行综述.

人脐带间充质干细胞神经向分化与去分化基因表达谱分析

目的用生物信息学方法从公共基因芯片数据库(GEO)中初步筛选出与人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)神经向分化和去分化相关的生物学功能和对应的信号通路,分析蛋白互作关系,为进一步开展h UC-MSCs神经向分化和去分化的实验研究提供指导信息。方法在公共基因芯片数据库GEO中搜寻h UC-MSCs神经向分化与去分化的基因芯片数据,用R和Bioconductor软件包进行统计学分析,筛选差异基因;用Gene Analytics在线分析工具进行GO分析和通路分析;用STRING数据库进行差异表达基因对应的蛋白互作关系分析。结果共筛选得到影响神经向分化和去分化过程的670个上调基因和1 458个下调基因;进一步对这些差异基因进行功能富集分析,发现上调过程的功能集中表现为促血管生成和细胞黏附,下调的生物学过程则主要和代谢相关;上调通路主要有与细胞增殖、分化、凋亡有关的ERK、血管生成和Akt等通路,下调通路主要有与细胞代谢和生物合成相关的萜类化合物骨架生物合成、Cholesterot Biosynthesis II和磷酸肌醇代谢等通路,其中特别的是,维持胚胎干细胞多能性的Nanog通路出现在下调通路中;蛋白互作网络分析发现,与血管生成、细胞黏附相关的蛋白VEGFA、IL-6、FGF2、MMP和IL-8有较高的degree值。结论影响h UC-MSCs神经向分化和去分化的因素很多,其中,促进血管生成、细胞黏附及细胞繁殖相关的基因、生物反应过程、信号通路及相关蛋白起着重要作用。上述基于生物信息学的筛查分析结果为进一步开展h UC-MSCs神经向分化与去分化实验研究提供了一定的参考信息。