红禾麻入血成分治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的 基于网络药理学和分子对接的方法探究红禾麻入血成分治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制。方法 在数据库中预测入血成分和疾病相关靶点,获取两者的共有靶点并运用String数据库分析蛋白-蛋白相互作用关系。利用Metascape数据库对共有靶点进行基因功能注释(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析;建立红禾麻入血成分-靶点网络和入血成分-靶点-信号通路网络图,综合筛选关键靶点;运用AutoDock vina软件对入血成分与关键靶点进行分子对接验证。结果 红禾麻入22个血移行成分和代谢产物作用于292个疾病靶点;INS、IL-6、MAPK3及TNF等可能是红禾麻治疗RA的关键靶点,涉及对细胞氮化合物反应、激素刺激反应和有机氮化合物反应等生物过程,主要涉及的传导途径是TNF信号通路与Th17细胞分化等。分子对接结果显示,黄酮类和酚酸类可能是红禾麻治疗RA的主要活性成分,与关键靶点产生较强的亲和力。结论 红禾麻治疗RA具有“多成分、多靶点、多途径”的特点,可能的机制是红禾麻的黄酮类和酚酸类成分作用于MAPK3、PTGS2、TNF及IL-6等蛋白,并通过调节Th17和TNF等相关信号通路起治疗RA的作用。本研究可为红禾麻的深入开发和利用提供一定的参考数据。

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS联合网络药理学及分子对接探究白及治疗黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的“异病同治”物质基础和作用机制

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS联合网络药理学及分子对接技术探究白及“异病同治”黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的物质基础和分子机制。利用HPLC建立17批不同产地白及指纹图谱,进行相似度评价;进一步通过UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS分析,获得17批白及的共有化学成分;针对共有化学成分,根据生物利用度和类药性筛选活性成分,利用TCMSP和SwissTargetPrediction数据库获取白及活性成分的作用靶点。在DrugBank、TTD、GeneCards数据库中检索疾病相关靶点,绘制韦恩图,获得白及与疾病的共有靶点作为“异病同治”靶点;借助STRING数据库建立蛋白质相互关系,并在Bioconductor数据库中对“异病同治”靶点进行KEGG和GO分析;使用Cytoscape 3.7.2软件构建“白及化学成分-异病同治靶点”网络和蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,拓扑分析筛选出关键活性成分和核心靶点;最后,运用AutoDock Vina 1.1.2软件对活性成分与核心靶点进行分子对接验证。指纹图谱有13个共有峰,不同批次间指纹图谱的相似度在0.941~0.998。鉴定出白及的化学成分53个,17批白及的共有化学成分18个;网络药理学筛选到白及治疗4种疾病的药效物质基础是多糖类、联菲类、二氢菲类和联苄类等11个化合物,异病同治靶点42个,这些靶点参与细胞对化学应激的反应、活性氧的反应和蛋白激酶B信号转导的正调控等生物过程,涉及PI3K-Akt、ErbB、Rap1、FoxO、MAPK和雌激素等121条信号通路;分子对接显示关键活性成分与核心靶点亲和力好。该研究初步阐释了白及通过多成分、多靶点和多通路联合作用发挥治疗黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的“异病同治”的作用,为其深入开发和应用提供了一定的理论基础。

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS和HPLC-UV的石吊兰化学成分定性与定量研究

应用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)联用技术对石吊兰化学成分进行系统分析,并针对其主要化学成分进行HPLC-UV含量测定。采用Synergi^(TM) Hydro-RP 100?色谱柱(2 mm×100 mm,2.5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(-1),柱温40℃,质谱分析采用电喷雾电离源(ESI),正、负离子模式下分别采集数据;结合对照品保留时间、质谱离子信息以及数据库和文献中相关质谱数据信息进行比对,识别石吊兰中的化学成分;进一步采用HPLC-UV同时测定不同批次石吊兰中5个成分(新绿原酸、绿原酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、石吊兰素)的含量,检测波长为330 nm。在石吊兰中共鉴定出了84个化合物,包括27个黄酮类、20个苯乙醇苷类、5个氨基酸类、18个有机酸类、1个生物碱类、6个核苷类和7个其他类化合物。新绿原酸、绿原酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、石吊兰素5个成分在一定浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r>0.999),各成分的线性范围分别为3.22~102.90、12.84~410.82、31.63~1 012.01、25.00~800.11、4.08~130.51μg·mL^(-1),仪器精密度、方法重复性和溶液稳定性均良好,平均加样回收率为97.31%~100.2%,RSD为0.95%~2.4%。贵州不同产地、不同批次石吊兰药材中5个成分的含量存在一定的差异,其中连翘酯苷B的平均含量最高。该研究建立的定性分析方法能快速、高效地鉴定石吊兰的化学成分,所建立的定量分析方法简便、快捷、准确,能同时测定石吊兰中5个成分含量,为石吊兰药材质量评价提供了科学依据。

基于血浆药物化学和网络药理学分析良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制

探究良附滴丸治疗胃肠道疾病的活性成分和潜在分子机制。采用UHPLC-Q-TOF-MS分析良附滴丸的血浆药物化学成分;基于血浆药物化学结果,在TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库中检索血浆中移行成分的作用靶点,利用OMIM、CTD、GeneCards和DrugBank数据库获取胃肠道疾病的相关靶点,筛选化学成分作用于疾病的主要蛋白,利用STRING数据库对这些主要靶点进行蛋白相互作用(PPI)分析,并通过Metascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析;利用Cytoscape软件构建成分-靶点、PPI网络图和拓扑分析,综合分析预测出关键作用靶点、生物学过程和作用通路;最后,运用AutoDock Vina 4.2.6软件对化学成分与关键靶点进行分子对接验证。共鉴定出良附滴丸中的化学成分12个,血浆中的移行成分4个,分别为高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮,涉及189个疾病靶点,并作用于细胞对氮化合物、对有机环状化合物和对激素刺激的反应等生物过程,主要富集在PI3K-Akt、Foxo和IL-17等信号通路上;分子对接结果显示,4个血浆移行成分与核心靶点亲和性好。良附滴丸中高良姜素、鼠李柠檬素、高良姜素-3-O-甲醚、α-香附酮可能是其治疗胃肠道疾病的活性成分,该研究初步阐释了良附滴丸治疗胃肠道疾病的药效物质基础和作用机制,为其深入开发和应用提供了一定的理论基础。