补中益气汤干预肺腺癌A549细胞移植瘤Wnt/β-catenin信号通路对顺铂敏感性的影响

目的 探讨补中益气汤干预肺腺癌A549细胞移植瘤Wnt/β-catenin信号通路对顺铂敏感性的影响。方法 体外培养A549细胞,接种于BALB/cnu裸鼠腋窝皮下,8 d成瘤,隔天开始分别给予低剂量(1.46 g/kg)、中剂量(2.91 g/kg)、高剂量(5.82 g/kg)补中益气汤治疗25 d。30只裸鼠随机分为5组:对照组、顺铂组、顺铂+低剂量补中益气汤组、顺铂+中剂量补中益气汤组、顺铂+高剂量补中益气汤组。测量移植瘤质量并计算药物抑瘤率;Western印迹检测细胞质中p-糖原合成激酶(GSK)-3βser9、p-GSK-3βtyr216、GSK-3β蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法检测移植瘤组织β-catenin、Survivin蛋白的表达。结果 给药25 d后,顺铂联合不同剂量补中益气汤使移植瘤质量均显著缩小(P<0.05),抑瘤率均显著增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。与对照组相比,顺铂联合不同剂量补中益气汤组可显著下调移植瘤细胞质p-GSK-3βser9蛋白的表达(P<0.05),并显著下调β-catenin、Survivin mRNA和蛋白表达(P<0.05),尤以顺铂联合高剂量补中益气汤组效果最明显。结论 补中益气汤可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路增强顺铂对肺腺癌的敏感性。

补中益气汤含药血清调控GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路增强A549细胞对顺铂敏感性的研究

目的:探讨补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的机制是否与GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。方法:制备补中益气汤含药血清作用于A549细胞株,随机分为a组(对照血清组)、b组(顺铂组)、c组(补中益气汤组)、d组(补中益气汤含药血清联合顺铂组)。流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测GSK-3β、p-GSK-3β^(ser9)、p-GSK-3β^(tyr216)、β-catenin、survivin蛋白表达。结果:补中益气汤含药血清联合顺铂可降低p-GSK-3β^(ser9)、β-catenin、survivin蛋白表达,提高晚期细胞凋亡率。结论:抑制GSK-3β介导的Wnt/β-catenin信号通路激活可能是补中益气汤含药血清增强A549细胞对顺铂敏感性的作用机制之一。

铁路风沙路基防护施工方法应用探讨

随着铁路建设要求逐步提升,针对铁路风沙路基防护施工的方法也越来越多样化,在施工过程中铁路风沙路基修建力度加大也取得阶段性进展,但是在施工过程中仍不可避免会遇到风沙问题给施工建设带来一定影响。基于此,本文结合风沙成因以及其问题产生给铁路路基防护施工带来的影响作以下探讨,重点探究当前所涉及的路基防护施工方法,也提出相应风险防范措施,以期最大程度改善风沙地区铁路施工环境并在保护生态环境基础上提高铁路风沙路基防护施工效率。

补中益气汤含药血清干预A549/DDP细胞Wnt/β-catenin信号通路改善顺铂耐药的机制研究

目的研究补中益气汤含药血清干预A549/DDP细胞Wnt/β-catenin信号通路改善顺铂耐药的机制。方法制备补中益气汤含药血清及培养A549/DDP细胞,并进行随机分组:对照血清组、顺铂组、补中益气汤含药血清联合顺铂组、补中益气汤组,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并将细胞核、浆蛋白进行分离,蛋白印迹法检测胞核、浆中GSK-3β、p-GSK-3β^(ser9)、p-GSK-3β^(tyr216)及细胞总β-catenin、survivin蛋白的表达。结果与对照血清组比较,顺铂组、补中益气汤组、补中益气汤含药血清联合顺铂组均能显著提高A549/DDP细胞的凋亡率(P<0.05),其中补中益气汤含药血清联合顺铂组效果更为显著;顺铂组、补中益气汤组均显著上调A549/DDP细胞胞浆p-GSK-3β^(ser9)的表达(P<0.05),而补中益气汤含药血清联合顺铂组则显著下调其表达(P<0.05),三组均对胞浆中GSK-3β、p-GSK-3β^(tyr216)的表达均无显著影响(P>0.05);与对照组比较,顺铂组、补中益气汤组均使A549/DDP细胞中β-catenin、survivin蛋白的表达显著上调(P<0.05),而补中益气汤含药血清联合顺铂组使A549/DDP细胞中β-catenin、survivin蛋白的表达显著下调(P<0.05)。结论补中益气汤含药血清可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活改善A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。

补中益气汤调节肺腺癌裸鼠移植瘤GSK-3β活性表达干预顺铂耐药

目的探讨补中益气汤调节A549/DDP荷瘤裸鼠移植瘤GSK-3β活性表达干预顺铂耐药的机制研究。方法体外培养A549/DDP细胞,接种于BALB/c nu/nu裸鼠腋窝皮下,8 d后成瘤,隔天开始分别给予低剂量(1.46 g·kg^(-1))、中剂量(2.91 g·kg^(-1))、高剂量(5.82 g·kg^(-1))补中益气汤治疗25d。30只裸鼠随机分为A549/DDP荷瘤对照组(A组)、A549/DDP荷瘤+顺铂组(B组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组(C组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组(D组)、A549/DDP荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组(E组),测量移植瘤质量并计算药物抑瘤率;蛋白质印迹法检测移植瘤组织中胞浆、胞核的GSK-3β、p-GSK-3β^(ser9)、p-GSK-3β^(tyr216)蛋白表达。结果顺铂联合补中益气汤可使移植瘤质量逐渐缩小,抑瘤率逐渐增加,呈现剂量依赖性。顺铂联合补中益气汤可显著下调移植瘤细胞胞浆p-GSK-3β^(ser9)的表达,而对GSK-3β、p-GSK-3β^(tyr216)的表达均无显著影响。结论补中益气汤下调p-GSK-3β^(ser9)表达,增加胞浆中GSK-3β的活性表达进而改善肺腺癌的顺铂耐药性。