不同离子对漆酶酶活的影响

设置一系列不同种类、不同浓度的离子溶液,探究其对漆酶酶活的影响。结果表明,阳离子中Fe2+、Fe3+对漆酶的抑制作用显著,并分析了离子浓度对漆酶的影响以及不同离子对漆酶的抑制机理。分析表明Fe2+可能是通过与2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基结合影响漆酶酶活,Fe3+可能是通过影响或置换漆酶中的部分铜离子影响漆酶活性,其中因为漆酶的活性中心是由四个铜离子组成,特别分析了Cu2+对漆酶活性的影响,Cu2+可能是通过与漆酶中的酸性氨基酸残基作用或通过影响漆酶的电荷平衡影响漆酶活性。在常见的阴离子溶液中,CO32-抑制漆酶酶活,NO3-和SO42-对漆酶有一定程度的激活,Cl-轻微抑制漆酶酶活。分析表明阴离子的抑制作用可能是通过与底物分子竞争Ⅱ铜中的某一个位点来实现,激活作用可能是通过修饰漆酶氨基酸残基来实现。还研究了不同类型离子的复配,结果显示不同类型的复配对漆酶的影响方式也不同,但主要是通过作用于漆酶活性位点来影响酶活。

不同底物体系下漆酶的失活动力学研究

本文对三种体系的漆酶热失活动力学进行了研究,并对动力学参数进行了相应的分析。结果显示,漆酶在纯水溶液中的失活符合一级动力学模型,其失活方程为lnA=-0. 1353t-2. 2522。在有毒有机物体系(2,4-二氯酚和吲哚溶液)中漆酶的失活仍符合一级失活动力学模型,失活速率常数减小,但半衰期增大。在极性溶液(乙醇)中,漆酶的反应速率常数最小,可能是因为漆酶分子内部作用力的变化导致了漆酶反应变缓;在非极性体系(异辛烷溶液)中,水-疏水体系减少了对酶的伤害,利于酶的稳定,延长了漆酶半衰期;极性或非极性体系中的漆酶失活均符合一级动力学失活模型。