一种真菌复合多糖提取及体外抗氧化活性的研究

研究了一种从保健口服液中提取并纯化后的真菌复合多糖的体外抗氧化活性(还原力、对羟自由基和DPPH自由基的清除能力),并与复合多糖单一成分进行比较。结果表明:在实验浓度范围内,各真菌多糖抗氧化活性均随着多糖质量浓度增加显示出稳定增长。相同质量浓度下,真菌复合多糖的抗氧化活性高于竹荪多糖及虫草多糖,但较香菇多糖的活性低或相当。表明在考虑药效和经济成本平衡的前提下,真菌复合多糖具有更高的体外抗氧化活性。

金耳发酵液多糖的制备、分析及生物活性研究

探讨了金耳发酵液多糖的化学成分和生物活性。通过液体发酵法获得了金耳发酵液多糖,分别采用苯酚硫酸法、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)、凝胶渗透色谱(GPC)、红外光谱对其总糖含量、单糖组成、相对分子质量、糖苷键类型进行测定。此外,对金耳发酵液多糖的体外抗氧化和体内降血糖活性进行了研究。结果表明,金耳发酵液多糖总糖质量分数为85.85%,主要的单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,相对分子质量为14 000,主链以β糖苷键相连。具有一定的还原能力以及较强的清除DPPH和羟基自由基活性,可显著降低四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖含量。

长裙竹荪子实体乙醚和乙酸乙酯提取物的化学组成分析及抑菌活性研究

依次用乙醚和乙酸乙酯为溶剂,对正己烷提取后的长竹荪子实体粉末进行索氏提取。乙醚和乙酸乙酯的提取率分别为1.57%和1.85%,然后采用GC-MS对乙醚和乙酸乙酯提取物的化学成分进行分析,图谱解析结果显示乙醚提取物中含有43种成分,占总含量的99.98%;乙酸乙酯提取物中含有73种成分,占总含量的99.56%。两种提取物对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌、伤寒杆菌等均有明显的抑制作用,而乙酸乙酯提取物的抑菌效果优于乙醚。

基于巨噬细胞模型的竹荪多糖的免疫功能

为探索竹荪多糖（DI）对巨噬细胞RAW264.7免疫功能的影响,分别采用四唑氮蓝（MTT）法、中性红法、Griess法、ELISA法,检测DI对巨噬细胞增殖、吞噬活性、一氧化氮（NO）和白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、α肿瘤坏死因子（TNF-α）分泌量的影响;运用反转录PCR（RT-PCR）检测i NOS和IL-1、IL-6、TNF-α的m RNA表达量的变化。结果表明,在25-200μg/m L质量浓度范围内,DI能够明显促进巨噬细胞增殖,增强其吞噬活性。同时,DI能够增强巨噬细胞分泌NO、IL-1、IL-6、TNF-α的能力,且明显提高i NOS、IL-1、IL-6、TNF-αm RNA的表达水平。因此,竹荪多糖对巨噬细胞RAW264.7具有免疫刺激作用。

虫草发酵多糖的提取,结构分析及生物活性研究

采用热水浸提法从虫草发酵菌粉中获得水溶性虫草发酵多糖(CY),该多糖以中性糖为主要成分,分子量为9.3×103g/mol,主链由β糖苷键连接,单糖组成为木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。利用还原力、羟基自由基和DPPH体系对提取得到的多糖进行体外抗氧化活性测定,并以小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7模型对其进行免疫增强作用的测定。结果表明,该多糖具有较好的抗氧化性,并且呈现出一定的量效关系;能促进小鼠单核巨噬细胞增殖,并增强巨噬细胞分泌NO和TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12等细胞因子的能力,提示该多糖具有一定的免疫增强功能。

cspA冷休克启动子-重组人bFGF表达载体的构建及在大肠杆菌中可溶性表达研究

碱性成纤维生长因子b FGF具有刺激血管生成,促进血管内皮细胞和成纤维细胞增殖等生物活性,在组织修复中也起到重要作用。本研究运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增出b FGF的编码序列,克隆至表达载体p ColdⅡ,构建csp A冷休克启动子调控的重组表达载体p Coldb FGF,转化E.coli BL21(DE3),在20℃低温诱导下b FGF几乎完全是可溶性表达,表达量占细胞总蛋白50%以上。纯化的b FGF能够促进NIH 3T3增殖,半数有效剂量ED50为1.33μg/L,具有较高的生物活性。

水不溶性竹荪多糖硫酸酯的制备及抗氧化研究

采用碱提法从长裙竹荪中提取出水不溶性多糖(DIP),再经氯磺酸-吡啶法修饰后,得到硫酸酯竹荪多糖(S-DIP),对其进行了抗氧化活性研究。结果表明,制备出的硫酸酯多糖硫酸基质量分数为12.04%,取代度(DS)为0.989。硫酸酯竹荪多糖和未经修饰的竹荪水不溶性多糖在对羟基自由基(.OH)和DPPH.的清除能力方面存在极显著差异(P<0.01)。硫酸酯竹荪多糖的抗氧化活性高于未经修饰的竹荪水不溶性多糖。

胶质芽孢杆菌SM-01胞外多糖提取纯化工艺

针对胶质芽孢杆菌SM-01发酵液粘度高,菌液分离困难而导致胞外多糖提取效率低的问题,采用硅藻土吸附-抽滤法,对提取工艺及超滤条件进行了研究,确定了工艺参数。结果表明,发酵液中NaCl添加量为3 g/dL,发酵液稀释倍数为3倍,硅藻土添加量为10 g/L时,在室温下抽滤可除去菌体和蛋白质。滤液在0.1 MPa下经截留相对分子质量为200000的超滤膜超滤纯化,多糖回收率可达73.2%。

竹荪多糖纳米硒复合物的制备及抗肿瘤活性研究

[目的]制备竹荪多糖纳米硒复合物(DIP-SeNPs)并研究其抗肿瘤活性.[方法]以竹荪多糖(DIP)为表面修饰剂,用抗坏血酸还原亚硒酸钠制备DIP-SeNPs,利用红外吸收光谱和粒径分布对产物进行验证.采用MTT法和显微镜直接观察法检测DIP-SeNPs对人肝癌细胞HepG2和人胃癌细胞MGC-803的增殖抑制作用;采用Hoechst 33258染色法和全基因组DNA电泳法观察DIP-SeNPs诱导肿瘤细胞凋亡情况.[结果]制备所得的DIP-SeNPs具有理想的纳米材料特性,对人肝癌细胞HepG2和人胃癌细胞MGC-803具有明显的增殖抑制作用,但不能够诱导肿瘤细胞凋亡.[结论]DIP-SeNPs可能是通过直接杀伤肿瘤细胞的方式发挥抗肿瘤效应.

^(18)F-AlF-NOTATATE的自动化标记方法优化及PET/CT显像研究

目的研究自动化合成^(18)F-AlF-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸-D-苯丙胺酸1-酪氨酸3-苏氨酸8-奥曲肽(^(18)F-AlF-NOTATATE)的标记方法并进行神经内分泌肿瘤(NET)显像。方法基于GE-FASTLab2合成模块,通过氟化铝一步螯合标记的方法自动化制备^(18)F-AlF-NOTATATE,优化其标记条件,并对产品进行质量分析。对1例直肠下段NET患者(男,47岁)和1例胰腺NET患者(女,52岁)行^(18)F-AlF-NOTATATE PET/CT显像。结果成功制备了^(18)F-AlF-NOTATATE,总合成时间为35 min,优化后的放射化学产率为(23.8±3.1)%(未衰变校正,n=3),放射性活度为(4.63±0.68)GBq,放化纯>95%,稳定性好,产品质量均符合规定。^(18)F-AlF-NOTATATE在患者体内显像清晰,直肠下段NET患者显像可见直肠下段肠壁病灶SUVmax为13.3,肿瘤/肝脏比值为3.3,肝脏、淋巴结、肋骨转移灶均显示较高的SUVmax和肿瘤/肝脏比值;胰腺NET患者显像可见胰头钩突处局灶性显像剂摄取异常增高,SUVmax为5.6,2 h后显像的SUVmax为6.3,肿瘤/肝脏比值为2.3。结论利用GE-FASTLab2合成模块能高活度地制备^(18)F-AlF-NOTATATE,制备方法简单、稳定,产品放化纯高。^(18)F-AlF-NOTATATE PET/CT显像在NET患者体内显示出较好的显像效果,能够为诊治和预后评估提供有价值的信息。

载肝素钠的鱼精蛋白-去氧胆酸纳米复合物的制备及其抗肿瘤活性

将鱼精蛋白与琥珀酰化去氧胆酸在交联剂作用下偶联,制备3种不同偶联度的鱼精蛋白-去氧胆酸偶联物（DP1~DP3）。选择偶联度为32%的DP3,通过静电作用与肝素钠形成稳定的纳米复合物。考察了DP3与肝素钠不同质量比下所得纳米复合物的粒径、ζ电位和载药能力。结果表明,DP3与肝素钠质量比为1.5∶1时,DP3包载肝素钠的能力趋于饱和。此时得到的纳米复合物粒径为（136.0±2.5）nm,多分散系数为0.164±0.005,ζ电位为（＋32.6±0.1）m V。与游离肝素钠相比,该纳米复合物能有效提高肝素钠向人肺腺癌A549细胞内的传递效率,并对A549肿瘤细胞呈现较高的生长抑制作用,而DP3未见明显的细胞毒性。

^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像在前列腺癌初诊患者中的临床应用

目的评价靶向前列腺特异膜抗原(PSMA)的新型分子探针^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像在前列腺癌初诊患者中的临床应用价值。方法前瞻性纳入2022年3月至2023年1月在江南大学附属医院接受^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像的疑诊前列腺癌患者63例[年龄(68.7±8.7)岁],以患者为中心评价^(68)Ga-PSMA-NYM032的诊断效能,并采用视觉分析、勾画ROI行半定量分析得到SUV_(max),利用ROC曲线获得SUV_(max)诊断阈值。采用Spearman秩相关分析原发灶SUV_(max)与总前列腺特异抗原(tPSA)之间、原发灶SUV_(max)与Gleason评分(GS)之间的相关性。根据D′Amico前列腺癌危险度评估标准对患者进行分层[前列腺特异膜抗原(PSA)>20μg/L与≤20μg/L;GS>7分与≤7分],用Fisher确切概率法分析^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像对不同分层的前列腺癌患者转移灶的检出率,并用Mann-WhitneyU检验分析不同分层患者转移灶SUV_(max)的差异。结果^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像检查准确性为92.06%(58/63),灵敏度为96.55%(28/29),特异性为88.24%(30/34),阳性预测值为87.50%(28/32),阴性预测值为96.77%(30/31),SUV_(max)的最佳诊断阈值为6.9。^(68)Ga-PSMA-NYM032在前列腺癌原发灶中呈不同程度的高摄取,SUV_(max)与tPSA水平、GS均呈正相关(rs值:0.657、0.592,P值:<0.001、0.001)。分层分析结果显示,仅GS>7分与≤7分组的^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT对骨转移的检出率差异有统计学意义(9/17与1/12;P=0.019),而对PSA水平分层中的骨转移灶、GS或PSA分层中的淋巴结转移灶的检出率差异均无统计学意义(均P>0.05)。另外,GS或PSA分层的前列腺癌患者转移灶的SUV_(max)差异均不具有统计学意义(z值:-1.57~-0.50,均P>0.05)。结论^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT显像对前列腺癌具有良好的诊断效能,可为前列腺癌精准化诊疗提供新的策略;GS分层会影响^(68)Ga-PSMA-NYM032 PET/CT对于骨转移的检出率。