葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)对骨骼肌的发育至关重要,但其对牛肌肉卫星细胞(muscle derived satellite cells,MDSCs)分化的影响及作用机制尚未见报道。本试验检测GRP94在牛MDSCs分化过程中的表达情况;采用CRI...葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)对骨骼肌的发育至关重要,但其对牛肌肉卫星细胞(muscle derived satellite cells,MDSCs)分化的影响及作用机制尚未见报道。本试验检测GRP94在牛MDSCs分化过程中的表达情况;采用CRISPR基因编辑技术调控GRP94表达,检测GRP94对肌肉分化标志基因myogenin(MyoG)、myosin heavy chain(MHC)的表达及肌管融合率的影响;分别添加PI3K和mTOR的抑制剂明确PI3K信号通路对牛MDSCs分化的影响;检测GRP94对PI3K/AKT/mTOR信号通路活性的影响。GRP94随着牛MDSCs分化表达逐渐上调,GRP94正向调控牛MDSCs分化。PI3K信号通路抑制牛MDSCs分化,GRP94负调控PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。综上,本试验阐明了GRP94通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路促进牛MDSCs分化的分子机制,为肉牛育种以及肉质改善提供了重要的理论支持。展开更多
文摘葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)对骨骼肌的发育至关重要,但其对牛肌肉卫星细胞(muscle derived satellite cells,MDSCs)分化的影响及作用机制尚未见报道。本试验检测GRP94在牛MDSCs分化过程中的表达情况;采用CRISPR基因编辑技术调控GRP94表达,检测GRP94对肌肉分化标志基因myogenin(MyoG)、myosin heavy chain(MHC)的表达及肌管融合率的影响;分别添加PI3K和mTOR的抑制剂明确PI3K信号通路对牛MDSCs分化的影响;检测GRP94对PI3K/AKT/mTOR信号通路活性的影响。GRP94随着牛MDSCs分化表达逐渐上调,GRP94正向调控牛MDSCs分化。PI3K信号通路抑制牛MDSCs分化,GRP94负调控PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。综上,本试验阐明了GRP94通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路促进牛MDSCs分化的分子机制,为肉牛育种以及肉质改善提供了重要的理论支持。