四神丸对结肠炎小鼠结肠糖代谢的调节作用

目的 探讨四神丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的慢性复发性结肠炎小鼠结肠糖代谢的调节作用。方法 将40只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为正常组(Control),四神丸对照组(Ctrl+SSP),模型组(DSS)和四神丸组(SSP),每组10只。除Control组和Ctrl+SSP组外,其余各组采用“3%DSS(第1~7天)-自由饮水(第8~14天)-2.5%DSS(第15~21天)”方法复制慢性复发性结肠炎动物模型。造模第8天,Ctrl+SSP组和SSP组予以四神丸混悬液灌胃,Control组和DSS组予以等容积蒸馏水灌胃,连续14天。每日观察各组小鼠一般情况,并计算体重变化率及疾病活动指数(DAI)评分,造模第22天观察小鼠结肠形态学、病理学和HE染色变化;采用酶联免疫吸附法测定小鼠结肠组织中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)、腺苷(Ado)、己糖激酶2(HK2)、葡萄糖6-磷酸酶(G6pase)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)、丙酮酸激酶(PK)、醛缩酶A(ALDA)、乳酸脱氢酶A(LDHA)的活性水平;采用蛋白免疫印迹法检测小鼠结肠组织中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、糖原合酶激酶3β(GSK3β)蛋白表达水平。结果 与Control组比较,DSS组小鼠结肠重量、肠重指数、结肠病理损伤评分、DAI显著升高(P<0.01),结肠长度、体重变化率显著下降(P<0.01);结肠组织中ATP、ADP、AMP水平和HK2、G6pase、PEPCK、PK、ALDA、LDHA活性均明显升高(P<0.05,P<0.01),Ado水平显著降低(P<0.01);结肠组织中GLUT1、GLUT4、GSK3β蛋白表达水平均明显提升(P<0.05,P<0.01)。与DSS组相比,SSP组小鼠体重变化率、DAI、结肠长度、结肠重量、肠重指数、结肠病理损伤评分等指标均出现明显逆转(P<0.05或P<0.01),同时结肠组织中ATP、ADP、AMP、Ado水平和HK2、G6pase、PEPCK、PK、ALDA、LDHA活性均明显降低(P<0.05或P<0.01),Ado水平显著升高(P<0.01);结肠组织中GLUT1、GLUT4、GSK3β蛋白表达水平均明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论 四神丸可通过重塑ATP/Ado的平衡而有效治疗缓解DSS诱导慢性复发性结肠炎,其作用机制与糖酵解途径受到抑制有关。