杠柳毒苷通过诱导细胞自噬抑制前列腺癌细胞增殖

检测杠柳毒苷(periplocin,PP)对前列腺癌细胞(prostate cancer,PCa)增殖的抑制作用并探讨其分子机制。体外培养前列腺癌DU145和PC3细胞,CCK8实验、克隆形成、3D基质胶侵袭实验检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭等作用;流式细胞术、Hoechst 33258染色、Western blot实验确定杠柳毒苷诱导前列腺癌细胞凋亡、诱导凋亡小体形成及细胞凋亡相关蛋白表达水平;RNA-Seq转录组测序检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞基因表达谱影响;DCFH-DA荧光探针检测杠柳毒苷对细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平影响;Western blot、EGFP-LC3B融合蛋白表达细胞检测杠柳毒苷对细胞自噬相关蛋白表达及对细胞自噬体形成的影响;构建裸鼠荷瘤模型检测杠柳毒苷对前列腺癌细胞体内生长抑制作用。研究结果表明,杠柳毒苷可浓度依赖性抑制前列腺癌细胞增殖、克隆形成能力及迁移侵袭能力;诱导细胞凋亡小体产生及凋亡相关蛋白表达;改变前列腺癌细胞基因表达谱;浓度依赖性提高前列腺癌细胞内ROS水平,上调自噬标志蛋白LC3B和Beclin-1表达,下调自噬降解标志蛋白p62表达;抑制前列腺癌细胞在裸鼠体内生长。本研究发现PP可抑制PCa细胞增殖并诱导细胞凋亡,其分子机制可能为PP诱导前列腺癌细胞自噬最终导致细胞死亡。

UBE2C基因在肾透明细胞癌中的临床预后价值及分子机制探究

目的 探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)在肾透明细胞癌(KIRC)中的表达模式、临床预后价值以及调节KIRC的分子机制。方法 通过肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)和人类蛋白质表达图谱数据库(HPA)分析UBE2C基因在KIRC组织和正常组织中的表达差异。结合KIRC患者的临床信息,利用单因素及多因素Cox回归模型分析UBE2C基因在KIRC患者中的预后价值。通过基因富集分析(GSEA)了解UBE2C基因调控KIRC的分子机制。计算KIRC患者中的浸润免疫细胞含量,并评估UBE2C基因表达水平与免疫细胞浸润含量的相关性。结果 KIRC组织中的UBE2C基因和蛋白表达水平均高于正常肾组织(P<0.05)。KIRC组织中UBE2C表达与肿瘤位置、组织学分级、病理分期及TNM分期有关(P<0.05)。单因素及多因素Cox回归分析结果显示,UBE2C可作为预测KIRC患者总生存期(OS)的独立预后因素(P<0.05)。GSEA结果表明,UBE2C可能参与调节细胞因子-细胞因子受体相互作用、细胞周期检查点、ECM糖蛋白等多条信号通路。UBE2C基因表达水平与KIRC肿瘤微环境中Treg细胞、T细胞、Th17细胞、B细胞、CD8+T细胞和巨噬细胞浸润等显著相关。UBE2C同免疫检查点分子PDCD1(PD1)、CTLA4、CD27、LAG3等表达水平也显著相关。结论 UBE2C可作为KIRC患者的一个风险预后因子,同时UBE2C可能作为KIRC治疗的潜在靶点。

基于TCGA数据库分析甲状腺癌微环境中免疫细胞组分及免疫调节因子变化

目的 探索分析甲状腺癌微环境中免疫细胞浸润,并评估其同甲状腺癌临床预后等的关系。方法 在TCGA数据库下载甲状腺癌患者临床数据,计算样本中22种免疫细胞含量,采用t检验评估癌旁组织和肿瘤组织中22种免疫细胞组分和多种免疫调节因子表达差异。结果 肿瘤组织中静息态树突状细胞、M0型巨噬细胞、M2型巨噬细胞和静息态肥大细胞含量较高;而M1型巨噬细胞、B细胞、浆细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、Tfh细胞和γδT细胞含量较低。免疫检查点分子和趋化因子表达水平在甲状腺癌组织和癌旁组织中显著差异表达。结论 本研究确定了甲状腺癌中的多种免疫细胞和免疫调节因子的表达差异,有可能作为甲状腺癌治疗和预后的潜在靶点。

胃癌肿瘤微环境中预后相关基因研究

目的探讨胃癌肿瘤微环境中差异表达基因与胃癌预后的关系。方法基于TCGA数据库中胃癌基因数据,筛选与基质细胞和免疫细胞相关的差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体论富集分析和蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,分析差异表达基因与胃癌预后的关系。结果不同病理分级胃癌患者基质评分、免疫评分及综合评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。G3级患者免疫评分最高,G1级患者略高,G2级患者最低,其中G1级患者与G2级患者免疫评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。基质评分随着肿瘤级别的增高而增高。分化良好的G1级患者综合评分最低,分化较低的G2级患者次之,恶性程度最高的G3级患者最高,其中G1级患者与G2级患者综合评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。上调表达基因分别与基质评分、免疫评分具有显著相关性(P<0.05)。CXCR4(P=0.002)、NPY1R(P=0.002)、BPI(P=0.019)、MCEMP1(P=0.009)、OLR1(P=0.041)、RETN(P=0.045)表达水平越高,胃癌患者生存时间越短。结论差异表达基因在胃癌肿瘤免疫中发挥着不可或缺的重要作用,其中BPI、CXCR4、MCEMP1、NPY1R、OLR1、RETN基因高表达是胃癌预后的不良因素。

双水平正压通气和经鼻持续气道正压通气治疗早产儿呼吸窘迫综合征的疗效和并发症Meta分析

目的采用Meta分析的方法评价双水平正压通气(BiPAP)和经鼻持续气道正压通气(NCPAP)治疗早产儿呼吸窘迫综合征(RDS)的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、Sciverse、Cochrane图书馆、中国知网、中国生物医学文献数据库、维普数据库及万方数据库,收集BiPAP和NCPAP治疗早产儿RDS的RCT文献。2名研究者根据纳入和排除标准独立筛选文献,应用RevMan 5.2软件进行Meta分析,比较BiPAP和NCPAP的治疗失败率、氧合情况和并发症发生率。结果 9篇RCT文献进入Meta分析,共纳入571例患儿,BiPAP组289例,NCPAP组282例。Meta分析结果提示,BiPAP组治疗失败率低于NCPAP组,OR=0.42(95%CI:0.20~0.89),按出生体重行亚组分析,极低出生体重儿(出生体重<1 500 g)的1篇文献两组治疗失败率差异无统计学意义,OR=1.49(95%CI:0.51~4.33);BiPAP组较NCPAP组显著提高呼吸支持后12 h和24 h PaO2,MD分别为6.88 mmHg(95%CI:4.38~9.38)和6.36 mmHg(95%CI:4.80~7.92);显著降低呼吸支持后12 h和24 h PaCO2,MD分别为-5.00 mmHg(95%CI:-5.75^-4.25)和-5.39 mmHg(95%CI:-6.18^-4.61);两组病死率差异无统计学意义,OR=0.76(95%CI:0.34~1.69)。支气管肺发育不良、新生儿坏死性小肠结肠炎、脑室内出血、气胸、早产儿视网膜病变等并发症发生率BiPAP和NCPAP组差异均无统计学意义。结论 BiPAP治疗早产儿RDS疗效优于NCPAP,且并发症发生率与NCPAP相当,但BiPAP治疗极低出生体重儿的疗效仍需积累更多证据。

手助腹腔镜与开放手术活体供肾取肾术的系统评估

目的系统评价手助腹腔镜下活体供肾切取术(HLDN)与开放活体供肾切取术(ODN)的安全性及效果。方法采用计算机互联网检索Pubmed数据库、Sciverse数据库、考克兰图书馆数据库、中国知网、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库及万方数据库收录期刊已发表的包含HLDN和ODN两种术式的随机对照试验(RCT)研究。两位研究者根据纳入、排除标准独立筛选文献,应用RevMan 5.2软件进行Meta分析。结果通过筛选共纳入10个RCT,共1 230例患者。Meta分析结果提示,活体供肾取肾时,与ODN术式比较,HLDN术式的手术时间和热缺血时间较长[合并比值比(OR)值为35.81,95%可信区间(CI)13.98～57.65,P=0.001;合并OR43.99,95%CI 32.31～55.66,P<0.00001],但HLDN术式的术中出血量较少(合并OR-78.90,95%CI-123.59～-34.22,P=0.0005)、并发症发生率较低(合并OR 0.58,95%CI 0.39～0.86,P=0.006)、住院时间较短[权重均差(WMD)为-1.15,95%CI-1.40～-0.90,P<0.00001];两组患者的术后进普食时间差异无统计学意义(WMD为-0.11,95%CI-0.67～-0.45,P=0.70)。结论与ODN术式比较,HLDN术式提高了手术的安全性,降低了手术难度,值得临床推广应用。

IL-6基因多态性与类风湿性关节炎易感性关系的系统评估

目的系统评估国人白细胞素-6(IL-6)基因多态性与类风湿性关节炎(RA)易感性的关系。方法计算机检索Pubmed、Cochrane library、Sciverse、CNKI、VIP、CBM及万方数据库,检索时间均从建库至2013年9月。获取IL-6基因多态性与RA易感性关系的病例对照研究。由2名研究者独立筛选文献。Meta分析采用Revman 5.0软件处理,采用Stata 11.0软件评估发表偏倚。结果共纳入3个病例对照研究。Meta分析显示:IL-6-174基因多态性G等位基因和隐性模型(GGvs.GC+CC)与RA易感性存在一定的关系(均P<0.01),然而显性模型(GG+GC vs.CC)和纯合型(GGvs.CC)却不表现出此联系作用(P=0.18,P=0.13)。在IL-6-572多态性位点中,纯合型、隐性模型、显性模型及等位基因均与RA易感性不相关(P=0.64,0.92,0.05)。结论国人IL-6-174G/C基因多态性G等位基因和隐性模型与RA的易感性可能相关。

膀胱癌患者尿脱落细胞中survivin基因的检测

目的通过对膀胱癌患者尿液脱落细胞中人体细胞凋亡相关基因survivin的检测,探讨可早期发现、常规筛检膀胱癌,且不给患者带来痛苦的方法。方法留取31例膀胱癌患者、20例泌尿系其他良性疾病患者和10例健康志愿者的新鲜中段尿液200ml,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测survivin的表达;同时行尿脱落细胞学检查。结果用RT-PCR检测尿液中survivin的敏感性为100%,与尿脱落细胞学检相比较,具有很高的敏感性。结论检测尿液中survivin可用于膀胱癌的术前诊断。

罗布麻宁治疗少弱精子症模型小鼠的作用机制

目的：探讨罗布麻宁在少弱精子症模型小鼠中的治疗作用及其治疗机制。方法：40只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、罗布麻宁低剂量治疗组（200μg/ml）和高剂量治疗组（1 000μg/ml）,每组10只。除空白组外的各组小鼠腹腔注射环磷酰胺60 mg/（kg·d）,连续5 d,构建少弱精子症小鼠模型;罗布麻宁低、高剂量治疗组小鼠给予不同浓度罗布麻宁饮用水,空白组和模型组给予等量洁净水,每只小鼠饮水量（5.1±0.4）ml/d,给予30 d的治疗后,检测小鼠精子质量、睾丸组织病理改变以及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量变化。结果：罗布麻宁治疗后,少弱精子症小鼠的精子浓度由模型组的（2.94±0.57）×10^6/ml升高到低剂量治疗组的（3.88±0.43）×10^6/ml和高剂量治疗组的（4.12±0.53）×10^6/ml,前向运动精子百分率由模型组的（6.25±3.40）%升高到低剂量治疗组的（8.03±6.71）%和高剂量治疗组的（17.50±2.74）%;病理分析发现治疗组小鼠的睾丸组织损伤有所恢复,小鼠睾丸组织中的MDA水平由模型组的（1.34±0.22）nmol/mg prot分别降低到罗布麻宁低剂量治疗组的（1.13±0.19）nmol/mg prot和高剂量组的（0.98±0.19）nmol/mg prot,SOD水平由模型组的（26.46±4.36）U/mg prot提高到罗布麻宁低剂量治疗组的（32.46±3.28）U/mg prot和高剂量组的（37.39±5.77）U/mg prot,且差异显著（P均〈0.05）。结论：罗布麻宁可以显著提高少弱精子症小鼠的精子质量,可能是通过清除活性氧自由基,提高机体抗氧化能力实现的。罗布麻宁可用于男性不育的治疗和预防。

过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞IL-6、IL-12的分泌及CD80、CD86的表达

目的探讨树突状细胞(dendritic cell,DC)在小儿过敏性紫癜(Henoch-Schnlein purpura,HSP)发病中的可能作用及机制。方法采集33例过敏性紫癜患儿和20例正常对照组儿童的外周血,以Thomas法,采用粒-巨噬细胞集落刺激因子、白介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)联合培养诱导DC细胞,检测DC协同刺激分子B7-1(CD80)、B7-2(CD86)的表达,及其分泌的IL-6、IL-12水平的变化。结果过敏性紫癜患儿外周血DC分泌IL-6水平[(274.4±51.2)ng/L]明显高于对照组[(154.3±46.4)ng/L],差异有高度统计学意义(t=8.05,P<0.01);外周血DC分泌IL-12水平[(89.6±17.7)ng/L]明显低于对照组[(129.4±18.2)ng/L],差异有高度统计学意义(t=6.03,P<0.01);同时过敏性紫癜患儿外周血协同刺激分子B7-2(CD86)的表达水平(51.2±7.4)明显高于对照组(37.3±6.5),差异有高度统计学意义(t=7.92,P<0.01)。结论DC可能通过诱导Th1/Th2细胞分化在小儿过敏性紫癜发病中起重要作用,其可能的机制系通过DC细胞分泌的细胞因子而起作用。

大黄消痔栓治疗湿热瘀阻型慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征临床研究

目的观察大黄消痔栓治疗湿热瘀阻型慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CABP/CPPS)的临床疗效。方法选取CABP/CPPS湿热瘀阻型患者200例,随机分为观察组和对照组各100例。2组均停用抗感染药物和其他制剂,予饮食及生活干预。对照组予前列安栓,观察组予大黄消痔栓,每次1粒,每日1次,纳肛,置入肛门3~4 cm。10 d为1个疗程,疗程间隔2 d,治疗3个疗程。观察2组临床疗效及治疗前后NIH慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)评分、前列腺液白细胞计数、卵磷脂小体、尿流率变化。结果观察组总有效率为100%(100/100),对照组为78%(78/100),观察组明显高于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,2组前列腺液白细胞计数、NIH-CPSI评分均降低(P<0.01),观察组明显低于对照组(P<0.01);治疗后2组卵磷脂小体++++者均增多(P<0.01),观察组明显多于对照组(P<0.01);2组尿流率均升高(P<0.05),观察组高于对照组(P<0.01)。结论大黄消痔栓治疗湿热瘀阻型CABP/CPPS疗效显著,效果优于前列安栓。

HK2基因表达与泌尿系肿瘤的发生、免疫细胞浸润及预后的相关性分析

目的:利用数据库和生物信息学的方法分析己糖激酶2(HK2)在泌尿系肿瘤中表达水平、预后及与肿瘤免疫细胞浸润的相关性.方法:研究HK2在癌组织和癌旁组织mRNA表达水平,其表达水平与肿瘤预后的相关性,分析HK2表达水平与肿瘤免疫细胞浸润、免疫细胞标志物表达水平、肿瘤微环境免疫细胞和基质细胞浸润的相关性.结果:HK2表达在泌尿系肿瘤组织中均显著性升高,在膀胱癌(BLCA)中随肿瘤分级增加而降低,在高级别肾乳头状细胞癌(KIRP)和前列腺癌(PRAD)中HK2表达水平显著高于低级别表达水平;BLCA和肾透明细胞癌(KIRC)中HK2低表达的患者总体生存率显著低于高表达患者,而KIRP中则相反.HK2表达水平与BLCA和KIRP中多数免疫细胞浸润水平无明显相关性,与KIRC和PRAD中多数免疫细胞浸润水平呈显著正相关.与免疫细胞标志物表达相关性分析发现,HK2在BLCA中表达与免疫细胞标志物表达呈显著负相关,而在KIRC、KIRP和PRAD中大多呈显著正相关.HK2在BLCA和KIRC中表达水平与肿瘤微环境呈显著正相关,在PRAD和KIRP中则无显著相关性.结论:HK2表达水平与BLCA、KIRC和KIRP患者的预后相关;HK2表达水平与免疫细胞浸润性、免疫细胞标志物表达、肿瘤微环境免疫细胞和基质细胞浸润等相关.

靶向 survivin 基因的 shRNA 慢病毒载体的构建及其对膀胱癌 EJ 细胞凋亡的影响

目的:构建survivin基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,转染膀胱癌EJ细胞,研究survivin基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制情况,观察survivin shRNA慢病毒载体对EJ细胞凋亡的影响.方法:以survivin基因为靶标设计shRNA干扰序列,克隆至p SIH1-H1-cop GFP慢病毒载体.干扰载体鉴定正确后转染膀胱癌细胞株EJ细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况,实时荧光定量PCR检测survivin基因mRNA含量变化,Western blotting法检测survivin蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测EJ细胞凋亡情况.结果:PCR扩增鉴定、DNA测序证实survivin慢病毒干扰载体构建成功;EJ细胞经干扰载体处理后,EJ细胞survivin基因mRNA水平下调了73.33%,蛋白表达受到显著抑制,EJ细胞凋亡率达到24.39%.结论:成功构建了靶向survivin基因的shRNA重组慢病毒干扰载体,可以显著降低转染细胞survivin基因的表达水平,并有效提高膀胱癌细胞凋亡率.

低强度脉冲超声的生物物理学效应及相关机制的研究进展

低强度脉冲超声(LIPUS)的能量强度较低(<3 W/cm2)并以脉冲波形式输出,作为一种非侵入性的治疗方法现已逐渐用于临床。LIPUS由于其低强度脉冲输出模式而具有的热效应非常小,主要依靠其非热效应发挥治疗作用。此外,LIPUS相应的分子生物学机制主要包括其相关的信号传导通路、基因表达、血管生成和干细胞分化等。目前,LIPUS的具体机制较复杂,本研究就LIPUS的生物物理学效应及其相关机制作一综述,旨在为LIPUS在更多疾病中的广泛应用提供相应的理论基础和最新的研究进展。

低强度脉冲超声治疗的应用进展

低强度脉冲超声(LIPUS)作为一种非侵入性的治疗方法逐渐用于临床,其能量强度低且以脉冲的形式输出,主要依靠其空化效应和机械效应发挥作用。LIPUS相应的分子生物学机制主要包含与其相关的信号传导通路、基因表达、血管生成和干细胞分化等。随着对其机制研究的不断深入,LIPUS将更广泛地应用于疾病治疗之中。本文主要综述LIPUS在骨骼、泌尿、软组织、神经等系统中治疗的应用进展。

部分膀胱出口梗阻后P2X_1嘌呤受体在膀胱的表达

目的: 观察慢性膀胱出口梗阻后P2X1受体的表达水平.方法: 雌性Wistar大鼠70只,体质量250～300 g,40只为实验组,30只同龄雌性Wistar大鼠为对照组.在部分膀胱出口梗阻的动物模型成功建立后8 wk开始试验,采用免疫组织化学方法结合IMAGE-PRO图像处理软件对大鼠膀胱P2X1的表达(即阳性颗粒在某个视野下所占的百分比)进行定量研究.结果: 部分膀胱出口梗阻后大鼠较对照组大鼠膀胱的体积增大,黏膜层增厚,P2X1受体的表达水平平均为在膀胱平滑肌层[(9.60±4.78) vs (2.31±1.19)] (P<0.01),在膀胱黏膜层[(0.12±0.03) vs (0.06±0.02)] (P<0.01),浆膜层[(0.04±0.02) vs (0.03±0.01)] (P>0.05),尿道[(6.05±2.25) vs (1.48±0.14)] (P<0.01),慢性膀胱出口梗阻后P2X1受体的表达水平均明显高于对照组.结论: 膀胱出口部分梗阻后,P2X1受体在膀胱各个部位表达均升高.推测P2X1可能参与了慢性膀胱出口梗阻后膀胱的生理或病理功能的调节.

流体剪切力在移植肾机械灌注中的机制及研究进展

近年来,机械灌注临床应用日益成熟,相关设备开发越加完善,其临床获益效果也逐步得到认可。然而,机械灌注对于肾脏的保护机制仍然不明确,可能与机械灌注可以不断提供营养、带走代谢废物以及模拟生理条件下血管内皮经受流体剪切力(FSS)的内环境密切相关。本文就FSS缺失诱发氧化应激反应、FSS突现加重氧化应激损伤以及FSS在机械灌注保存移植肾中的作用进行综述。

2010～2014年兰州市泌尿门诊支原体药物敏感趋势分析

目的了解兰州市区近年来解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)药物敏感情况以及耐药性的趋势变化。方法采用支原体培养药试剂检测该院泌尿门诊和生殖门诊送检的分泌物标本,统计分析2010～2014年支原体培养药敏水平。结果支原体对交沙霉素、强力霉素和克拉霉素较敏感。12种抗菌药物中,氧氟沙星和壮观霉素药敏率呈下降趋势,美满霉素和交沙霉素药敏率呈上升趋势。结论支原体年度总敏感率呈下降趋势,说明耐药性控制不良,需加强抗菌药物用药监控和安全管理。

低能量冲击波在泌尿系统疾病治疗中的研究进展

冲击波是一种频率在16~20 MHz的连续传播声波。近年来的研究发现在较低能量水平下,冲击波对组织具有生物学作用,包括细胞增殖、血管生成、神经再生、抑制炎症反应等。本文主要就低能量冲击波在勃起功能障碍、阴茎硬结症、慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征、膀胱疼痛综合征/间质性膀胱炎、糖尿病膀胱功能障碍等泌尿系统疾病治疗中的研究进展做一综述。

亲属活体供肾和DCD供肾肾移植的临床疗效比较

目的:比较亲属活体供肾与心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肾肾移植的临床效果。方法:回顾性分析2011-04～2018-01兰州大学第二医院肾移植科同期完成的45例亲属活体供肾(亲属活体供肾组)和21例DCD供肾肾移植受者(DCD供肾组)的临床资料,比较两组患者移植肾一般情况、肾功能、人肾累积存活率及并发症情况。结果:两组患者性别、BMI、手术时间、住院时长比较,差异无统计学意义(P>0.05),供、受者年龄和透析时间比较,差异有显著统计学意义(P<0.01)。亲属活体供肾组和DCD供肾组受者急性排斥反应分别发生2例(4.4%)和6例(28.6%),两组间差异有统计学意义(P<0.05);移植肾功能延迟恢复分别发生1例(2.2%)和2例(9.5%),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后1周两组患者血肌酐比较,差异均有统计学意义,且术后患者血肌酐恢复至正常的时间比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);术后2周、1个月、2个月两组患者血肌酐差异均无统计学意义。两组整个随访期的人、肾累积存活率比较,差异无统计学意义。结论:亲属活体供肾与DCD供肾肾移植早期效果类似,活体肾移植在移植肾术后急性排斥反应及肾功能短期恢复方面具有一定优势,但随访期间的人、肾累积存活率相同。