小鼠EPCs和RAW264.7细胞株体外联合培养体系的建立

目的体外建立小鼠血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)和破骨细胞前体细胞RAW264.7细胞株共培养体系。方法 EPCs和RAW264.7细胞株共培养为实验组,加了等量细胞培养液但没有加入EPCs的细胞作为对照组。利用分离式培养小室进行细胞联合培养,Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞的增殖,通过检测光密度值绘制共培养过程中RAW264.7细胞生长曲线;逆转录PCR检测共培养1、3、5、7 d后RAW264.7细胞VEGFR-2和CXCR4 mRNA的表达;TRAP染色检测破骨细胞活性。结果和EPCs细胞联合培养能加快RAW264.7细胞的增殖速率,和RAW264.7单独生长比较,共培养3、5、7 d后,2组的光密度值差异有显著性(P<0.01);共培养促进RAW264.7细胞分化为破骨细胞。结论在体外联合培养体系中,EPCs具有促进宿主破骨细胞前体细胞增殖与分化的作用。

骨科机器人辅助经皮撬拨治疗跟骨骨折

目的探讨骨科机器人辅助经皮撬拨复位螺钉内固定治疗跟骨骨折的疗效。方法选取2019年5月~2021年5月32例(35足)跟骨关节内骨折,SandersⅡ型22足,Ⅲ型13足。骨科机器人辅助设计规划螺钉方向和进针点,经皮撬拨复位后行螺钉内固定。结果随访13~25(18.4±2.9)月。均达到骨性愈合,美国足踝矫形外科协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society,AOFAS)踝-后足评分优良率94.3%(33/35)。无切口感染、皮肤坏死、皮下积液、深静脉血栓等并发症。结论骨科机器人辅助行经皮撬拨复位螺钉内固定治疗跟骨骨折,精准,安全,高效。

骨抑素对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化和促进血管生成能力的影响

目的 探讨骨抑素(osteostatin,OST)对缺氧环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、成骨分化和促进血管生成能力的影响及其在骨缺损修复中的应用前景。方法 从大鼠骨髓中分离培养BMSCs。BMSCs经OST处理后,在常氧(21%氧气)或缺氧(1%氧气)条件下培养。采用cellcountingkit-8(CCK-8)法检测细胞增殖,台盼蓝染色法检测细胞死亡率。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色评价成骨分化。western blot检测ALP、成骨转录因子(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的蛋白水平。ELISA检测培养基中血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度。小管形成试验评估促进血管生成能力。结果 OST剂量依赖性增强大鼠BMSCs的增殖(F=4.89,P=0.006)。缺氧诱导下,BMSCs的增殖、小管形成量增加(F=28.98、76.68,P均<0.001),Ang-1和VEGF的浓度提高(F=183.7、585.6,P均<0.001);ALP、RUNX2和OCN的蛋白水平降低(F=646.8、432.7、257.5,P均<0.001)。OST处理后,BMSCs增殖(常氧+OSTvs常氧,P均<0.001;缺氧+OSTvs缺氧,P=0.005)、小管形成量(常氧+OSTvs常氧,P=0.002;缺氧+OSTvs缺氧,P=0.005)进一步增加,Ang-1浓度(常氧+OST vs常氧,P<0.001;缺氧+OST vs缺氧,P<0.001)和VEGF的浓度(常氧+OST vs常氧,P<0.001;缺氧+OSTvs缺氧,P<0.001)进一步提高;ALP、RUNX2和OCN的蛋白水平升高(常氧+OSTvs常氧,P均<0.001;缺氧+OST vs缺氧,P均<0.001)。结论 OST可增强缺氧环境中BMSCs的增殖和成骨分化能力,促进血管生成。