利用ARTP诱变育种技术选育白色金针菇突变菌株

本研究首先从市售工厂化栽培的五株白色金针菇菌株中筛选出一株品质优良的菌株AR0作为本次诱变育种的出发菌株。然后利用常压室温等离子体(ARTP)诱变育种技术选育出6株白色金针菇突变株。通过对突变株与出发菌株的抗病性、纤维含量测定及亲缘关系鉴定,结果表明突变株AR12和AR17为抗病性强、纤维含量低的目标新菌株。其优良品质表现如下:突变菌株AR12与出发菌株AR0相比,菌丝体抗P.tolaasii能力提高15.49%,菌丝体纤维含量降低15.82%;突变株AR17与出发菌株AR0相比,菌丝体抗P.tolaasii能力提高1.90%,菌丝体纤维含量降低36.31%。

对普外科手术患者实施综合护理的效果研究

目的 :探讨对普外科手术患者实施综合护理的临床效果。方法 :选取2015年8月至2016年8月期间四川省富顺县代寺镇中心卫生院普外科收治的44例患者作为研究对象。采用抽签分组法将这44例患者分成研究组(22例)和参照组(22例)。在这两组患者的围手术期内,对参照组患者进行常规护理,对研究组患者进行综合护理。对比两组患者对护理的满意度和术后肺部感染的发生率。结果 :与参照组患者相比,研究组患者对护理的满意率更高,其术后肺部感染的发生率更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :对普外科手术患者实施综合护理的临床效果理想,能够降低其术后肺部感染的发生率,提高其对护理的满意度。

牡丹PsELF1基因的克隆及表达分析

本研究以已获得的早花基因的EST序列为模板设计引物,通过RACE技术扩增全长,使用生物学软件和q RT-PCR技术分别进行生物信息学分析和表达模式分析,获得牡丹早花基因Ps ELF1的全长及其表达模式,为后续研究其功能提供条件。结果显示,扩增得到7 107 bp的Ps ELF1全长cDNA,其中,包括3'UTR485 bp,5'UTR 464 bp和6 258 bp的编码区,共编码2 085个氨基酸,分子量为238.43 kD。Ps ELF1包括4个可能的磷酸化位点,且均位于N端。二级结构预测显示,Ps ELF1含α-螺旋和无规卷曲较多。同源性分析结果表明,Ps ELF1与杨树ELF1同源性最高。表达特性分析表明,Ps ELF1在花芽休眠解除过程中Ps ELF1的表达水平在0~14 d下调,在14~21 d上调,然后在21~28 d下调。而在低温21 d移入温室后的开花过程中呈下调模式。本研究结果对培育牡丹早花或晚花品种、延长牡丹的观赏期、提高牡丹观赏质量和经济价值具有重要意义。

牡丹早花基因PsELF3的克隆和表达特性分析

本研究利用BioEdit筛选了牡丹(Paeonia suffruticosa)花芽的第三代转录组数据库,得到一条早花基因3(ELF3)片段。利用3′cDNA末端快速扩增技术(RACE)扩增测序后与原序列进行序列拼接,得到了2 457 bp的全长cDNA,其中5′非翻译区(5′UTR)为122 bp, 3′UTR为274 bp;全长编码区为2 061 bp,编码687个氨基酸。同源性比对发现其编码蛋白(PsELF3)与葡萄(Vitis vinifera) VvELF3蛋白同源性最高,为58.48%。进化树分析结果显示PsELF3与葡萄VvELF3蛋白聚为一支,与同源性比对结果基本一致。实时定量PCR分析表明PsELF3基因在初花期不同组织中均有表达,但表达水平差异较大,其在心皮中表达水平最高,在根中最低。另外, PsELF3在花芽休眠解除过程中呈上调模式,在低温处理14 d后其表达水平显著升高, 28 d达到最高值。牡丹花芽在低温处理21 d后移入温室,实时定量PCR分析显示PsELF3从花芽膨大期到翘蕾期呈上调模式,其表达水平至翘蕾期达到最高值。研究结果拟对进一步研究PsELF3在牡丹发育、花芽内休眠解除进程及开花过程中的功能提供理论依据,为反季节催花提供候选基因。

牡丹休眠相关基因PsGRASs筛选、克隆和表达特性分析

通过筛选、克隆牡丹PsGRASs基因并进行表达模式分析,初步解析其是否参与牡丹休眠解除,以期为牡丹反季节催花提供候选基因。利用HMM(Hidden Markov Model)模型,基于GRAS基因家族的种子(Pfam号为PF03514)序列,利用BioEdit软件对牡丹花芽休眠的454测序转录组数据进行本地检索,筛选到2个具有GRAS结构域的序列。通过RACE扩增得到了其全长cDNA,其中PsGRAS1序列为2 308 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)为1 848 bp,编码615个氨基酸;PsGRAS2为2 034bp,ORF为1560bp,编码518个氨基酸,两个编码PsGRASs蛋白的同源性为19.87%。进化树结果表明,PsGRAS1蛋白与拟南芥GRAS家族中的DELLA亚家族的GAI和RGLs聚到一个大的分支,PsGRAS2蛋白与拟南芥HAMs(AtSCL6/15/22/26/27)并为一支,说明PsGRAS1和PsGRAS2来自GRAS家族的两个不同分支。组织表达结果显示PsGRAS1和PsGRAS2在牡丹初花期不同组织中表达水平不同,PsGRAS1在叶中表达水平最高,在雄蕊中最低;而PsGRAS2在苞片中表达水平最高,在花瓣中最低。在牡丹花芽休眠解除过程中,PsGRAS1呈下调趋势,低温28 d表达水平最低,而PsGRAS2呈先上调后下调趋势,低温14 d表达水平最高。在外源GA3处理7 d的牡丹花芽中,PsGRAS1的表达显著下降,而PsGRAS2显著提高。这表明PsGRAS1和PsGRAS2都参与了休眠过程,但功能不同。