甲型和乙型流感病毒感染A549细胞后固有免疫分子的比较研究

目的:探讨固有免疫应答在人肺腺癌细胞A549感染流感病毒进程中的作用。方法:采用100TCID50 A/Brisbane/02/2018(A/BR18,H1N1)和B/Phuket/3073/2013(B/PH13,B Yamagata)流感病毒感染A549细胞,Hoechst染色和流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测感染后24 h、48 h、72 h细胞因子IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-10及TLR7、Mx1 mRNA水平。结果:与PBS组比较,H1N1组和BY组A549细胞出现不同比例细胞凋亡(P<0.01);H1N1组和BY组IFN-αmRNA水平在感染24 h、48 h、72 h时均升高(P<0.01),IFN-βmRNA水平在48 h和72 h时显著升高(P<0.01);H1N1组和BY组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-15 mRNA水平在感染48 h、72 h时明显升高(P<0.01),IL-10 mRNA水平随感染时间延长呈降低趋势,IL-13 mRNA水平在感染72 h时H1N1组高于BY组(P<0.05);H1N1组和BY组TLR7和Mx1 mRNA水平在感染各时间点均有不同程度升高(P<0.05)。结论:固有免疫分子TLR7、促炎细胞因子及炎症抑制因子参与A549细胞抗病毒感染进程,甲型H1N1毒力、致病性和病毒活跃度均高于乙型B Yamagata。