O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化在正常肝脏及肝脏疾病中的作用的研究进展

O连接N-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)糖基化是将O-GlcNAc连接到靶蛋白的丝氨酸或苏氨酸位点上的一种蛋白质翻译后修饰,参与酶活性、蛋白稳定性、转录因子活性、蛋白质的亚细胞定位、分子之间相互作用等的调控。O-GlcNAc糖基化的异常与多种疾病相关,可能是一种全新的疾病治疗靶点。肝脏的生理稳态及各类疾病的发生、发展均与O-GlcNAc糖基化的失调密切相关。基于此,本文对O-GlcNAc糖基化在正常肝脏功能及非酒精性脂肪性肝病、肝细胞癌、肝损伤与再生中的作用的研究进展进行综述,旨在为肝脏疾病的治疗提供新思路。

泛素连接酶APC/C参与的泛素化与细胞周期调节

后期促进复合物/细胞周期体(anaphase-promoting complex/cyclosome,APC/C)是一个多功能的泛素连接酶,参与细胞周期、代谢、DNA损伤修复、细胞自噬、凋亡、衰老及肿瘤发生等多种生物学过程。泛素化作为一种重要的翻译后修饰,可通过泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)调控蛋白质的降解。APC/C的分子量巨大,由多个亚基组成,在细胞周期调控中具有重要地位,可以通过介导细胞周期相关蛋白质的泛素化降解从而精确调控细胞周期的转换,并受共激活分子CDC20或CDH1的调控。了解APC/C的结构和功能,对于研究细胞周期及蛋白质翻译后修饰等生物学事件至关重要。近年,对APC/C分子结构和组成的解析工作取得了极大的进展,其在肿瘤中的作用及潜在的治疗应用也受到了关注。本文将着重对APC/C的组成和结构、参与泛素化的具体过程、在细胞周期中的调控和被调控机制以及参与肿瘤生成的最新研究进展进行综述。

Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及其机制

目的探讨Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及与securin的相互作用机制。方法使用40只雌性SD大鼠建立肝大部分切除术后肝再生模型,于术后0、6、12、24、48、72、96、168 h分别取再生肝组织,RT-qPCR和Western blot检测Tmub1和securin在肝再生过程中的mRNA与蛋白表达变化趋势。在大鼠正常肝细胞系BRL-3A中分别建立慢病毒稳定过表达Tmub1、干扰Tmub1和阴性对照组细胞株,用诺考达唑处理获取同步于有丝分裂期的细胞,免疫荧光观察Tmub1过表达组和阴性对照组细胞有丝分裂情况,并用免疫沉淀和Western blot检测Tmub1过表达、Tmub1干扰和阴性对照组BRL-3A细胞中securin的泛素化水平。结果 Tmub1的mRNA和蛋白水平在肝切除术后24、48 h最高,securin的mRNA水平也在48 h最高,而蛋白水平在48 h最低。Tmub1过表达可影响大鼠肝细胞有丝分裂,且securin泛素化水平显著低于阴性对照组(P<0.01);Tmub1干扰组securin泛素化水平显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论 Tmub1可通过抑制securin的泛素化影响大鼠再生肝细胞的有丝分裂。

Tmub1沉默提高Akt蛋白活性促进肝细胞增殖

目的探讨Tmub1沉默对Akt磷酸化和肝细胞增殖及生长能力的影响。方法应用RNAi技术对BRL-3A细胞株Tmub1基因进行沉默,采用qRT-PCR和Western blot分别检测Tmub1、Akt、p-Akt、Cyclin D1、c-myc等基因的mRNA和蛋白表达水平;采用平板集落形成实验和CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期。结果与对照组相比,Tmub1基因沉默后,Cyclin D1和c-myc基因mRNA表达增强(P<0.05),p-Akt磷酸化水平以及Cyclin D1和c-myc蛋白的表达增高(P<0.05);BRL-3A细胞的增殖及生长能力增强(P<0.05);且处于细胞周期S+G2/M期的细胞比例明显增加(P<0.05)。通过MK2206抑制Akt磷酸化后,可显著抑制上述基因的mRNA及蛋白的表达水平,细胞的增殖及生长能力明显降低(P<0.05),且处于S+G2/M期的细胞比例下降(P<0.05)。结论 Tmub1沉默通过增加Akt蛋白的磷酸化及Cyclin D1、c-myc的表达水平从而促进BRL-3A细胞的增殖和生长。

Hsa_circ_PVT1在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨人肝细胞癌(HCC)中circ-PV T1的表达及其对肝癌细胞增殖的影响,并探讨其临床意义。方法利用RT-qPCR技术检测46例人肝癌组织/癌旁组织中circ-PVT1的表达水平,并且分析病理指标与其表达水平的关系;体外培养人正常肝细胞系(L02)、人肝癌细胞系(HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3),利用RT-qPCR技术检测circ-PVT1的表达水平。利用脂质体转染技术体外转染si-circ PVT1,敲低circ-PVT1在HepG2、SMMC-7721细胞系中的表达量,同时设置阴性对照组,通过CCK-8实验、EdU实验检测干扰circ-PVT1表达对肝癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术观察干扰circ-PVT1表达对肝癌细胞周期的影响。结果 circ-PVT1在人肝癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.001),且其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及分化程度相关;同样,肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L、HCC-LM3中circ-PV T1表达水平也明显高于正常肝细胞系L02(P<0.05);与阴性对照组比较,circ-PVT1干扰组HepG2及SMMC7721的增殖能力明显降低。结论在人HCC的诊断中,circ-PVT1可能作为一种潜在的生物标志物予以应用,并且可能成为一种新型的增殖因子。

Hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的功能研究

目的研究环状RNA hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的表达以及对肝癌细胞生物学功能的影响。方法利用RT-qPCR检测环状RNA hsa_circ_0000711在肝癌细胞系的表达;通过小干扰RNA特异性敲低hsa_circ_0000711的表达;通过CCK-8实验检测肝癌细胞系的增殖情况;利用流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测下调hsa_circ_0000711后Cyclin D1、CDK4、cleavaed Caspase 3及Bcl-2蛋白的表达水平。结果 Hsa_circ_0000711在肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中明显高表达(P<0.05)。与对照组相比,hsa_circ_0000711干扰组的肝癌细胞增殖能力显著降低(P<0.05),处于G_1期细胞增多(P<0.05),且凋亡细胞显著增加(P<0.05)。干扰hsa_circ_0000711的表达后,肝癌细胞中Cyclin D1、CDK4和Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P<0.05),cleavaed Caspase 3蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 Hsa_circ_0000711可能通过调控细胞周期及凋亡影响肝癌细胞的增殖。

长链非编码RNA LOC100288637在原发性肝癌中差异性表达的生物学意义及相关机制研究

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)LOC100288637在肝癌中的表达差异,对肝癌细胞增殖的影响及相关机制。方法分析GEO数据集GSE58043和GSE10694,得出LOC100288637及hsa-miR-101-3p在肝癌组织中差异表达,RNA-hybrid分析LOC100288637与hsa-miR-101-3p的结合具有可能性。逆转录-聚合酶链式反应在组织和细胞水平检测LOC100288637表达量。荧光原位杂交观察LOC100288637在细胞中的定位。敲低LOC100288637后CCK-8检测细胞增殖情况。过表达hsamiR-101-3p后,检测LOC100288637的变化。结果LOC100288637在肝癌组织中的表达量高于癌旁组织(P<0.05);LOC100288637在肝癌细胞系中的表达量高于肝细胞系(P<0.05)。LOC100288637在HepG2细胞核质均有表达,以细胞质居多。敲低LOC100288637后HepG2细胞增殖活性降低(P<0.01)。过表达hsa-miR-101-3p后,LOC100288637表达量下降(P<0.05)。结论 LncRNA LOC100288637可能在肝癌发生,发展过程中起重要作用并接受hsa-miR-101-3p靶向调控影响肝癌细胞的增殖。

基于机器学习的古代玻璃制品的成分分析与鉴别

为解决古代玻璃制品成分分析与鉴定准确性较低的问题,通过引入机器学习依据相关数据进行数学建模。首先,通过建立卡方检验模型根据玻璃种类、纹饰、颜色等属性进行分类求解,进而得出不同类型玻璃风化部分化学成分的含量;其次,通过建立决策树模型找出两种玻璃易受风化影响的化学成分并进行分类,并通过比对原来的数据分析其合理性;最后,建立随机森林模型生成混淆矩阵热力图和特征重要性图对未知玻璃文物进行预测。结果表明,设计的方法对古代玻璃制品分析与鉴定的结果较为精准。

常见肝脏外科基础病变与肝再生

正常的肝脏具有较强的再生能力。在急性损伤或肝切除手术后,正常肝脏可以立即进入再生过程,迅速恢复损伤前的肝脏大小、体积和功能。但在遭受严重的慢性肝损伤和纤维化之后,肝脏的再生能力往往受到不同程度的损害。虽然肝再生的研究已经进行了数十年,尤其是针对正常肝脏在肝切除术和药物诱导肝损伤后的再生机制,也有了较多的了解,但对于基础病变条件下的肝再生仍然报道较少。

环状RNA在肝脏疾病中的研究进展

环状RNA（circRNA）由RNA前体可变剪接产生，比线性RNA稳定性更强，是近几年RNA研究领域的热点。circRNA与多种疾病的发生发展密切相关，可通过调控miRNA、蛋白及其亲本基因和编码蛋白，从而发挥特定的生物学功能。近年来circRNA与肝脏疾病的研究逐渐增加，circRNA可能成为新的生物学标志物发挥诊断和预后的作用。本文主要介绍了circRNA在肝细胞性肝癌等肝脏疾病中的研究进展。

急性阑尾炎单病种住院总费用的变异性分析

目的探讨不同类型急性阑尾炎单病种在三甲医院住院费用的变动情况,为确定分层社保报销额度提供依据。方法收集四川大学华西医院胃肠外科中心2011年1～4月(单病种收费前)和2012年1～4月(单病种收费后)期间住院手术治疗的所有急性阑尾炎病例,将纳入病例分成低风险组(单纯性、化脓性、坏疽性)和高风险组(穿孔性、脓肿形成、合并妊娠)共6种类型,分析其总住院费用与不同类型的关系以及实行阑尾炎单病种收费后住院总费用的变化情况。结果共纳入90例急性阑尾炎病例,其类型与住院天数和住院总费用均呈显著正相关。低风险组3种类型可控制平均住院总费用在10 000元以内。敏感性分析结果显示,实施单病种收费前,当额定住院总费用上限达6 000元时,按上述风险分组方式即可呈现正相关(r=0.442,P=0.003)。实施单病种收费后同期病例比较,两组住院天数的构成比差异无统计学意义(P=0.108),但住院天数<5天的比例从45%上升至64%,住院天数≥10天的比例从17%下降至4%,住院时间有缩短趋势;两组住院总费用构成比的差异亦无统计学意义(P=0.114),但住院总费用≥9 000元的比例从32%下降到13%,住院总费用有降低的趋势。结论对于在三甲医院住院治疗的急性阑尾炎低风险组病例,以6 000元为额定社保报销限度为宜。而高风险组其住院总费用变异较大,其是否按单病种额定收费以及额定住院总费用如何设定均需进一步研究。实行单病种收费有助于缩短住院时间和降低住院总费用。

浅谈对元宇宙理念促进中国智慧医疗创新发展的思考

元宇宙指数字化虚拟世界和现实世界能够在一定程度上共存共生的数字样态。数字样态与医学科学相嵌相融后形成的智慧医疗理念,在医学实践、医学教育、医学研究领域,特别是外科学领域有巨大发展。分析能促进这一发展的主要因素,其一,智慧医疗领域元宇宙理念的技术源头为实实在在的人体解剖数字化数据集的生成技术;其二,智慧医疗领域成功的元宇宙技术产业实践,符合真实可信的“以人为本,为人服务”的根本宗旨。

纳米材料在肿瘤影像学诊断中的应用

恶性肿瘤已成为严重危害人类生命的重大疾病之一,早诊断和早治疗可以显著提高患者的生存率。基于荧光成像、CT、光声成像、MRI和PET等的影像学检查已被广泛应用于肿瘤诊断及其研究。然而,早期癌变组织与正常组织具有相似的影像学信号,而现有的影像学成像手段尚难以对其进行精准区分。随着物理学、材料学、生物学和医学的发展以及交叉联合,纳米材料独特的物理化学性质使其在疾病的诊断和治疗中显示出良好的应用前景。纳米材料在实体瘤中的增强渗透性、滞留效应以及易修饰,使其能够精准“识别”肿瘤,并且加速其在肿瘤部位的富集;纳米材料在影像学图像上的特性,使其能够作为造影剂以增强肿瘤部位的信号强度;响应性机制还可使纳米材料基于肿瘤细胞内的微环境,区分正常细胞与癌变细胞。除此之外,基于纳米材料的多模式生物成像可弥补单一模式成像的不足,实现肿瘤的实时和全方位成像。鉴于纳米材料显示出多功能的综合作用,纳米材料有望用于增强早期癌变部位的影像学信号,提高信噪比,从而实现肿瘤的早期诊断。