胃肠微环境下吻合钉仿生表面对细菌黏附的微流场仿真

目的模拟在吻合钉植入人体以后,吻合钉表面与肠壁组织之间的微流场环境,研究其仿生疏水化表面对细胞外液流速和壁面处流体剪切力的影响,进而通过流场的变化调控细菌的黏附。方法观察鲨鱼皮肤微结构,建立细菌在微流场环境中的简化二维运动模型。通过计算流体动力学数值仿真,模拟静态流场和动态流场中,细菌分别在光滑表面和微织构表面的运动,比较两种表面环境下细菌周围的流场特征和流体剪切力,分析流体剪切力影响细菌黏附的内在机制。结果仿生微织构的加入增强了微流场内细胞外液的流速,在静态流场中流体对细菌的黏滞作用较小;动态流场中流体对细菌的推动作用更强;一定范围内的微坑宽度使微织构壁面所受流体剪切力更大。结论吻合钉的仿生微织构表面,加快了细胞外液的流速,提高了微织构壁面和细菌所受流体剪切力,对细菌的附着有一定影响。研究结果为吻合钉抑菌表面的研究提供了理论依据。

胃肠吻合钉织构表面对细胞外液流速与剪切力的影响

目的研究胃肠微环境中的吻合钉表面微织构的几何参数变化对细胞外液流速与壁面处剪切力的影响规律,为吻合钉织构化表面对细胞黏附的促进作用提供理论依据。方法将吻合钉表面微织构结构引入到平板流动腔底面,应用ANSYS Fluent建立平板流动腔的二维模型并进行网格划分,研究不同高度、边长、间距参数的织构化底面的平板流动腔中细胞外液流速与壁面处剪切力数值,并对数据进行处理分析。结果吻合钉表面微织构的引入增强了平板流动腔内细胞外液的流速,且合适的微织构几何参数的引入可以增大微织构微脊处的壁面处剪切力。微凹坑内的细胞外液流速较低且会形成漩涡,微织构高度、间距的增加以及边长的减小可以增强微凹坑内漩涡的强度。结论通过控制微织构的参数可以改变细胞外液流速与壁面处剪切力,进而促进细胞的黏附。

人工髋关节织构化表面摩擦学性能研究

为研究微织构形状对人工髋关节表面摩擦特性的影响,在人工髋关节表面分别设计仿生菱形织构、圆柱形织构和圆环形织构,以雷诺方程为理论研究基础建立流体动压润滑模型,用ANSYS Fluent进行数值模拟,得到微织构表面润滑油膜的平均承载力和摩擦因数,并比较不同织构形状的摩擦学性能。结果表明:在所选织构参数、工况参数范围内,平均承载力随着面积率增大以及滑动速度的提高均呈现上升趋势,在面积率为25%、滑动速度为0.3 m/s时达到最大;摩擦因数随着织构面积率的增大而呈下降趋势,在面积率25%达到最小值,摩擦因数与滑动速度的关系则因织构形状的不同存在一定的差异;研究的3种形状微织构中,仿生菱形织构的摩擦学性能最佳。因此合理选择织构形状可以减少人工髋关节摩擦副表面间的磨损。

核仁组织区嗜银染色在甲状腺癌中的应用研究

目的:探讨核仁组织区嗜银染色(AgNOR)技术在甲状腺癌病理诊断及预后中的应用。方法:采用银染技术对50例石蜡包埋甲状腺组织块,其中甲状腺癌40例,结节性甲状腺肿10例,结甲周围正常组织作为对照,观察Ag-NOR颗粒的数量、形态及分布。结果:在甲状腺癌中,在甲状腺正常组织中AgNOR均数为(1.14±0.41),结节性甲状腺肿(2.27±0.32),乳头状癌(3.15±1.03),滤泡状癌(4.09±1.17),髓样癌(4.51±1.31),未分化癌(4.83±1.29),甲状腺癌与结节性甲状腺肿,不同病理类型的甲状腺癌之间AgNOR计数均有统计学差异。结论:AgNOR定量分析可作为判定甲状腺肿瘤良、恶性及分化程度的指标,估计预后,指导临床治疗。

FasL转染小鼠树突状细胞诱导异系T淋巴细胞凋亡的研究

目的:制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(DC)并探讨其体外诱导异系T淋巴细胞凋亡的机制。方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,流式细胞仪检测转染前后FasL蛋白的表达。混合淋巴细胞培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC对异系T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪检测诱导异系T淋巴细胞凋亡的能力。结果:体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DCFasL蛋白表达明显升高,混合淋巴细胞培养结果显示,FasL转染后DC对异系T淋巴细胞刺激指数明显下降(P<0.01),且诱导T淋巴细胞凋亡的能力明显增加(P<0.01)。结论:培养基选择法可收获大量骨髓源DC,具有典型形态,高表达MHCⅡ和共刺激分子,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答。脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白。转染FasL的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降,且能明显诱导T淋巴细胞凋亡。

普通外科监护病房医院获得性感染细菌培养与药敏分析

目的:了解普通外科监护病房(ICU)医院获得性感染常见细菌及药敏结果,以指导临床合理用药。方法:采用VITEK全自动微生物鉴定仪对73例普通外科ICU患者采集97株细菌进行鉴定及药敏分析。结果:感染部位以呼吸道感染发生率最高,占40.2%,其中以肺炎克雷白杆菌致病占首位。泌尿系感染、胃肠道和腹腔感染多为大肠埃希氏菌。切口感染最常见细菌为假单胞菌属。药敏结果显示革兰氏阴性菌株对亚胺培南敏感,革兰氏阳性菌株对万古霉素、替考拉宁均敏感,对3代头孢及左氧氟沙星部分敏感,对1代头孢及氨苄青霉素均耐药。结论:对普通外科ICU细菌菌株及耐药性的动态监测,合理应用抗生素,根据细菌培养与药敏结果选择针对性强、抗菌谱窄的抗生素对防治感染是非常重要的。

输注分子嵌合前体T细胞减低小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠T细胞的刺激反应

目的构建分子嵌合主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ基因小鼠前体T细胞,并探讨其诱导脾脏T细胞减低对异基因小鼠T细胞反应的可行性。方法体外分离培养BALB/c小鼠前体T细胞,构建携带C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ基因(H-2Db和H-2Kb)真核表达载体pIRES-H-2Db和pIRES-H-2Kb,分别转染BALB/c小鼠前体T细胞,构建分子嵌合前体T细胞。将分子嵌合前体T细胞回输BALB/c小鼠后7天,获取脾脏T淋巴细胞,与C57BL/6小鼠T细胞进行混合淋巴细胞培养,观测刺激指数(SI)。结果成功体外培养BALB/c小鼠前体T细胞,体外转染C57BL/6小鼠H-2Db和H-2Kb基因至BALB/c小鼠前体T细胞,H-2Db和H-2Kb蛋白表达率分别可达(14.90±0.56)%和(14.20±0.63)%。单向混合淋巴细胞培养显示,输注分子嵌合前体T细胞的BALB/c小鼠脾脏T细胞对C57BL/6小鼠T细胞SI,在pIRES-H-2Db和pIRES-H-2Kb转染的小鼠前体T细胞共注射组为(0.764±0.074),比空质粒组(0.983±0.081)和未转染组(0.994±0.142)明显下降(均P<0.05)。共注射组SI值分别与转染质粒pIRES-H-2Db组SI值(0.859±0.085)和转染质粒pIRES-H-2Kb组SI值(0.860±0.097)相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论输注分子嵌合MHC-Ⅰ基因前体T细胞的小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠T细胞刺激反应明显减低。

嵌合与移植免疫耐受研究进展

特异性移植免疫耐受是指在不使用免疫抑制剂的情况下，受者对供者抗原产生特异性免疫无反应，而同时又保持对除移植物以外的非己抗原的正常免疫应答能力。毫无疑问，诱导受者产生针对移植物的免疫耐受是彻底解决器官移植排斥反应问题的理想措施。在诸多耐受诱导研究中，诱导受者建立嵌合体似乎是最接近临床可能的方法。嵌合体是指来源于供者的异基因背景的细胞在受者体内长期存在的状态。尽管在天然嵌合体是移植耐受的“因”还是“果”的问题上还存在争议，但已有越来越多的动物实验和临床研究证实诱导受者建立嵌合体可以明显延长移植器官的存活时问。因此，人们试图从嵌合体的研究中获得免疫耐受诱导的突破，本文就这方面的有关进展综述如下。

合并高脂血症的胃癌患者PGE2 VEGF表达水平和临床病理特征的相关研究

目的:比较合并高脂血症的胃癌患者与未合并高脂血症患者的血清前列腺素E2(ptodyshlsnfin E2,PGE2)、血清血管内皮生长因子(voscular endothelial growth factor,VEGF)水平、胃癌组织VEGF表达水平和肿瘤临床病理特征的差异,探讨高脂血症对胃癌进展的影响。方法:将全部天津医科大学总医院2014年3月至2014年12月102例胃癌患者分为两组,合并高脂血症患者组49例,不合并高脂血症患者组53例。应用酶联免疫吸附测定法及免疫组织化学法测定102例胃癌患者血清PGE2、VEGF的浓度及肿瘤组织中VEGF的表达水平。结果:与不合并高脂血症的患者相比,合并高脂血症的胃癌患者,其血清PGE2、VEGF浓度以及胃癌组织中VEGF的表达水平均有明显升高(P<0.05);且胃癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移枚数、TNM分期差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:合并高脂血症的胃癌患者可能通过上调PGE2和VEGF的表达促进胃癌的进展。

胃癌患者术后生活质量的转变调查

目的调查胃癌患者术后1年内生活质量(QOL)的转变。方法选择行根治性胃大部切除术术后1年内未复发或转移的胃癌患者90例,采用生活质量核心量表(QLQ-C30)和胃癌特异性问卷量表(QLQ-STO22)评估患者术前及术后3、6、12个月的QOL。结果 1QLQ-C30评分:总体健康状况术后3个月评分最低,术后3、6、12个月评分与术前比较差异均有统计学意义(P均<0.05);大部分功能量表和症状量表评分在术后3个月波动明显,一般术后6、12个月与术前比较差异无统计学意义(P>0.05);单项测量项目中,腹泻、经济困难术后3个月评分最高,直到术后12个月评分才与术前相当(P>0.05)。2QLQ-STO22评分:4个分量表均为术前评分最高(P均<0.05),术后3、6、12个月评分变化不明显。结论胃癌患者术后1年QOL基本恢复正常;对术后不同时间患者的QOL问题,医护人员应采取针对性的治疗和护理干预。

Ⅳ期结直肠癌手术治疗及预后影响因素分析

目的:探讨Ⅳ期结直肠癌临床病理特征、手术方式与预后的关系,进一步指导临床治疗。方法:对有明确病理诊断的77例Ⅳ期结直肠癌患者临床病理资料及手术方式进行回顾性分析,并予以随访。结果:单因素分析显示:不同术式、肿瘤分化程度、转移范围、术后是否化疗、有无淋巴结转移与患者预后相关(P<0.05)。Cox多因素分析显示:肿瘤转移范围、有无淋巴结转移、术后化疗、不同术式(P<0.05)是影响Ⅳ期结直肠癌患者预后的独立危险因素。联合脏器切除组患者较姑息切除和未切除组患者有较好的术后生存率和生活质量。结论:单器官转移、无淋巴结转移及予积极手术切除联合术后化疗是提示Ⅳ期结直肠癌患者预后较好的独立影响因素。

分子嵌合MHC-Ⅰ基因对小鼠DC反应的研究

目的:构建分子嵌合主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ基因小鼠骨髓造血干细胞,并探讨其诱导脾脏T细胞对异基因小鼠树突状细胞(DC)反应的机制。方法:密度梯度法分离培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞。构建携带C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ基因慢病毒载体(病毒感染组),携带无意义基因慢病毒载体(阴性对照组)。分别感染BALB/c小鼠骨髓造血干细胞,构建分子嵌合细胞。分别取病毒感染组、阴性对照组及未加入病毒的空白对照组造血干细胞输注BALB/c小鼠后7d,获取脾脏T淋巴细胞,分别与C57BL/6小鼠DC进行混合淋巴细胞培养,测定刺激指数。结果:成功体外分选及培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞。病毒感染组C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ蛋白表达率可达98.17%。单向混合淋巴细胞培养结果显示,C57BL/6小鼠DC对输注病毒感染组细胞后BALB/c小鼠脾脏T细胞刺激指数明显降低(P<0.01)。结论:输注分子嵌合MHC-Ⅰ基因造血干细胞后,小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠DC反应明显减低。

闭合性十二指肠损伤外科治疗的探讨

目的:探讨闭合性十二指肠损伤诊断和手术方式的选择。方法:回顾性分析我院1998～2006年收治的32例十二指肠损伤诊治经过。结果:32例病人术前确诊8例,术中确诊24例,治愈28例,治愈率87.5%。手术后并发症出现14例,占43.8%,其中十二指肠瘘8例,占25%。结论:合理的手术方式是治疗十二指肠损伤的重要措施,早期手术和有效的十二指肠减压是影响预后的主要因素。

原发性十二指肠非乳头区肿瘤的诊断及手术治疗(附54例报告)

目的总结原发性十二指肠非乳头区肿瘤的诊断和手术治疗经验。方法回顾性分析2001～2011年收治的54例原发性十二指肠非乳头区肿瘤患者的临床资料。结果肿瘤位于乳头上区26例,乳头下区28例;恶性39例,良性15例。临床表现主要为上腹痛、恶心呕吐、黑便、腹胀。术前经胃十二指肠镜检查52例,阳性43例(82.7%);全部行腹部CT检查,确诊率74.1%;上消化道造影24例,阳性16例(66.7%);小肠镜检查12例,确诊率100%;超声内镜检查13例,阳性8例(61.5%)。良性肿瘤患者均行手术切除,术后5年生存率100%。恶性肿瘤患者中,行根治性切除术28例(胰十二指肠切除术17例,十二指肠节段切除8例,远端胃切除3例),手术切除率66.7%,术后1、3、5年生存率分别为77.1%、48.6%、28.2%。其余患者7例行短路手术,4例非手术治疗,均于1年内死亡。结论十二指肠非乳头区肿瘤临床表现无特异性,早期诊断困难。胃十二指肠镜、腹部CT及消化道造影是十二指肠肿瘤的主要检查方法,小肠镜对十二指肠乳头下区肿瘤诊断有指导性意义。胰十二指肠切除术及十二指肠节段切除术是十二指肠非乳头区恶性肿瘤的主要手术方式。

方柱织构参数对吻合器钛钉表面疏水性能的影响

对于吻合器钛钉等体内植入物,感染的第一步是细菌在材料表面的黏附,提高表面疏水性是减少细菌黏附的有效方法。基于仿生学和有限元仿真技术,通过在吻合器钛钉表面加工方柱织构,建立织构表面的液滴铺展模型,利用商用CFD软件ANSYS Fluent研究织构宽度、间距和高度对接触角的影响规律,分析织构参数对钛钉表面疏水性能的影响。仿真结果表明,在给定的织构参数范围内,钛钉表面方柱织构有效提升了表面疏水性,织构宽度和间距对接触角影响显著,且接触角随宽度和间距的增加都呈先增大后减小的趋势,最佳疏水结构为宽度略小于间距,而高度对接触角的影响几乎可以忽略,随着高度增加疏水性略微增大。

胃癌第7版TNM分期的临床应用

目的:分析胃癌第7版与第6版TNM分期之间的差别。方法:回顾性分析316例胃癌患者的临床病理资料,按第6版及第7版TNM分期标准分别进行分期,并分析各期5年生存率。结果:两版TNM分期在同一期之间生存差异无统计学意义(P>0.05);第7版Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期5年生存率分别为64.2%、49.9%、17.8%、0.0%,4个分期5年生存率差异有统计学意义(P<0.05);ⅢA期、ⅢB期、ⅢC期5年生存率分别为32.2%、28.2%、5.0%,3个亚期5年生存率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:第7版TNM分期更加细化,并对患者预后做出科学的评估。对不同分期的患者进行个体化综合治疗,具有临床应用价值。

激动性CD40抗体通过调节Th1/Th2平衡增强抗肿瘤作用的机制研究

目的:探讨激动性CD40抗体中单链抗体(CD40Sc Fv)和单克隆抗体(CD40m Ab)抑制小鼠乳腺癌细胞生长情况及对癌组织中Th1和Th2平衡的改变,分析通过调节Th1/Th2平衡达到抗肿瘤作用的机制。方法:将含CD40Sc Fv基因片段的重组质粒转化至Rosetta大肠杆菌中,诱导表达并经纯化后获得有功能的CD40Sc Fv蛋白,行SDS-PAGE和Western blot检测。体外培养小鼠乳腺癌4T1细胞,在Balb/C小鼠皮下成瘤建立模型,分为CD40Sc Fv组、CD40m Ab组和生理盐水组(NS组),分别给予CD40Sc Fv、CD40m Ab和生理盐水,观察各组小鼠肿瘤体积的变化。取出瘤体组织,ELISA法检测肿瘤组织上清中IL-12的浓度。提取肿瘤组织浸润淋巴细胞(TILs),应用流式细胞技术检测TILs中Th1与Th2的比例。结果:诱导表达的CD40Sc Fv鉴定表达成功,分子大小约为27KDa,蛋白纯化后经BCA测定浓度为1.12 mg/mL。CD40Sc Fv组与CD40m Ab组肿瘤大小分别为(3.044±0.239)cm^3与(2.749±0.261)cm^3,均小于NS组的(3.933±0.326)cm^3,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD40Sc Fv组、CD40m Ab组肿瘤组织中IL-12浓度分别为(396.27±48.13)pg/mL、(457.63±58.37)pg/mL,均显著高于NS组的(79.51±14.97)pg/mL,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD40Sc Fv组与CD40m Ab组的Th1/Th2细胞比值分别为6.32±0.87与5.54±0.71,均显著高于NS组的1.79±0.38,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:激动性CD40抗体在体内通过调节Th1与Th2的比例,发挥抑制肿瘤生长的作用,其中通过促进DC活化后分泌IL-12是影响肿瘤微环境中Th1/Th2平衡的重要机制之一。