可诱导共刺激分子参与自发性高血压大鼠肠系膜血管内皮-间质转化及硬化

目的 探究可诱导共刺激分子(ICOS)与自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜血管内皮-间质转化(EndMT)及硬化的相关性。方法4周龄SHR大鼠(观察组)及同品系WKY大鼠(对照组)各20只,各组再随机分为4组,5只/组。无创血压测量仪动态监测各组大鼠血压情况,并于4、6、10、30周龄进行实验。采用流式细胞术检测大鼠脾脏CD4+T细胞的ICOS表达频数;RT-PCR法检测大鼠肠系膜中ICOS、VE-cad、α-SMA、Col3 m RNA表达;免疫组化技术检测大鼠肠系膜血管VE-cad、α-SMA、Col3及淋巴组织中ICOS、IL-17A、TGF-β的分布情况;ELISA法检测大鼠血浆中IL-17A、TGF-β含量水平;Masson染色观察大鼠肠系膜血管形态变化;Spearman和Pearson相关分析评价ICOS与VE-cad、α-SMA、Col3及胶原容积分数的相关性。结果 SHR大鼠自6周龄开始,与对照组相比收缩压增高(P<0.05);CD4+T细胞ICOS的表达频数高于同期对照组(P<0.05);肠系膜组织中ICOS、α-SMA、Col3、IL-17A和TGF-β的mRNA及蛋白表达相较于对照组均升高(P<0.05),VE-cad mRNA及蛋白则在10周龄时表达下降(P<0.05);自6周龄始SHR大鼠血浆中IL-17A、TGF-β含量水平提升(P<0.05);肠系膜血管硬化程度不断加剧(P<0.05);肠系膜组织中ICOS mRNA及蛋白表达水平与α-SMA、Col3表达水平和血管硬化程度自6周龄始均呈正相关(P<0.05),与VE-cad表达水平自10周龄始呈负相关(P<0.05)。结论 ICOS可能通过介导相关免疫反应在高血压肠系膜血管EndMT及硬化过程中发挥重要作用。

卡介苗治疗支气管哮喘的免疫机制及研究进展

随着儿童计划免疫的普及,结核病的发病率呈下降趋势,而支气管哮喘(简称哮喘)的发病率却呈现上升趋势。卡介苗是由活的牛型结核杆菌在体外减毒培养后制成的活疫苗。卡介苗对哮喘的免疫调节作用早已引起重视,但对卡介苗在防治哮喘中的免疫机制还不是太清楚。现主要针对哮喘发病的免疫学基础及卡介苗在防治哮喘中可能的免疫机制予以综述,并提出卡介苗作为免疫调节剂在哮喘防治中存在的问题。

自然戒断期成瘾药物依赖者CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞的变化特征及意义

目的研究自然戒断期成瘾药物依赖者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)及外周血单个核细胞(PBMC)中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达水平的变化,探讨成瘾药物对成瘾药物依赖者体内Treg的影响。方法采集自然戒断6个月和18个月半的成瘾药物依赖者各40例及30例健康人的外周血,使用流式细胞仪检测Treg,用RT-PCR检测PBMC中TGF-β1 mRNA表达水平。结果与对照组比较,戒断18个月组Treg、TGF-β1 mRNA含量显著增高,而戒毒6个月组未发现显著性变化。结论成瘾药物对依赖者Treg的影响是长期性的,其介导的Treg异常,可能是引起成瘾药物依赖者免疫功能紊乱的原因之一。

海洛因和甲基苯丙胺依赖者自然戒断期免疫功能的研究

目的:通过测量自然戒断两周和半年后戒毒者外周血免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C4)及转化生长因子(TGF)-β水平来评价机体的免疫功能。方法:采集戒断两周和半年戒毒者血液各50例,分别采用散射比浊法和ELISA法测定外周血IgA、IgG、IgM、C3、C4和TGF-β含量,并与30例健康体检者(对照组)进行比较。结果:与对照组相比,戒断两周组IgM含量显著增高,IgG、C3含量显著降低,C4未见显著性差异。而戒断半年组IgG、C3、C4含量与对照组相比显著降低,TGF-β含量显著增高,且C4、TGF-β含量低于两周组。IgA各组间未见显著性差异。结论:海洛因和甲基苯丙胺依赖者免疫功能受损,自然戒断半年后有些指标逐渐恢复正常。

田螺多糖抑制肿瘤细胞增殖生物活性的实验研究

目的分析田螺多糖的理化性质;研究其体外抑制癌细胞的生物活性。方法苯酚-硫酸法测定多糖含量,紫外分析检测多糖蛋白,电解法检测硫酸基。以人宫颈癌细胞(Hela)、人大肠癌细胞株(HCT-8)为体外实验模型,将不同浓度的田螺多糖、5氟尿嘧啶(5-Fu)分别与癌细胞作用72 h,以不加药物的细胞对照,利用MTT法检测细胞活性,计算细胞抑制率,评价田螺多糖体外抗肿瘤生物活性。结果田螺多糖含量86.26%,蛋白含量少,含有硫酸基。田螺多糖在体外对Hela细胞、HCT-8细胞均有抑制作用,但抑制后者效果较差。结论田螺多糖具有抗肿瘤活性,但对抑制不同的肿瘤细胞可能存在一定的选择性或不同的抑制机理。

IL-17A与自发性高血压大鼠肾上皮间质转化密切相关

目的探究IL-17A在原发性高血压大鼠肾上皮间质转化(EMT)中的作用。方法4周龄的SPF级自发性高血压大鼠(SHR)(实验组)、京都维斯塔尔大鼠(WKY)(对照组)各20只,分别随机分为4组,每组5只,在4、6、10、30周龄进行实验观察。采用无创尾动脉血压测量仪动态检测大鼠的血压情况;流式细胞技术分析大鼠脾淋巴细胞中Th17细胞的频数;RT-PCR法及免疫组化技术检测大鼠肾脏IL-17A、iNOS、Arg-1、E-cadherin、α-SMAmRNA和蛋白的表达水平;ELISA法检测大鼠血浆中IL-17A的水平。结果从6周龄始SHR大鼠血压显著高于同期的WKY组(P<0.05或P<0.01),SHR大鼠Th17细胞频数以及肾脏和血浆中IL-17A的表达亦显著高于同期WKY组(P<0.05或P<0.01);在30周龄时SHR大鼠肾脏中E-cadherinmRNA及蛋白的表达显著低于WKY组(P<0.01),而Arg-1 mRNA及蛋白的表达显著高于WKY组(P<0.01);iNOS mRNA及蛋白的表达在6、10周龄时显著高于WKY组(P<0.05或P<0.01),α-SMAmRNA及蛋白从10周龄始显著高于WKY组(P<0.05或P<0.01)。SHR大鼠肾脏中IL-17A mRNA及蛋白表达水平从10周龄始与E-cadherinmRNA及蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.731,P<0.05;r=-0.827,P<0.01),而与α-SMAmRNA及蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.658,P<0.05;r=0.968,P<0.01)。结论IL-17A与SHR大鼠肾EMT的过程密切相关,可能是通过介导肾脏浸润的巨噬细胞M1/M2极化发挥作用。

中国圆田螺多糖对Hela细胞体外抑制作用的实验研究

目的初步研究中国圆田螺多糖对体外培养的人子宫颈癌细胞（Hela细胞）的抑制作用。方法采用水提法提取中国圆睚螺粗多糖。使用MTT法检测该多糖在不同浓度下对Hela细胞生长的抑制作用，用显微镜观察Hela细胞的形态变化。结果中国圆田螺多糖对Hela细胞有较显著的抑制作用，12．5ng／L时，细胞抑制率为7．37％，浓度为800ng／L时，细胞抑制率达64．83％。结论中国圆田螺粗多糖在体外可抑制Hela细胞增殖。

浅谈“项目-导师制”教学在生理学实验中的运用

在生理学实验中通过"项目-导师制"教学,实施自愿选择原则,培养学生的科研兴趣,提高操作技能与分析解决问题能力,加深医学基础学科、临床学科之间密切关系。扩大学生知识面、拓宽思路。在培养高素质新型医务工作者,适应国际化需求的方面,起到积极作用。

插值法在药物联合作用评价模型的应用研究

目的探讨插值法构建联合作用模型,结合等效线图法,评价二元混合药物联合作用效果。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞为受试细胞株,测定5氟尿嘧啶[(5-fluorouracil,5-FU),浓度设为2、4、8、16、32、64μmol/L]和3-溴丙酮酸[(3-Bromopyruvic acid,3-BrPA),浓度设为20、40、80、160、320、640μmol/L]单一及混合后联合作用人乳腺癌MDA-MB-231细胞24 h,采用CCK-8法检测药物对MDA-MB-231细胞增殖的影响。采用多元统计法评价混合药物整体联合作用。插值法计算混合药物整体联合作用函数表达式,并绘制联合作用曲面以及30%、50%效应下的浓度加和等效线与置信区间;利用等高线与联合作用曲面得到30%、50%效应的观测等效线。结果5-FU、3-BrPA单一作用MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用。5-FU的IC_(30)和IC_(50)分别为9.48μmol/L(95%C I:6.79~12.61)和37.96μmol/L(95%CI:27.19~60.83);3-BrPA的IC_(30)和IC_(50)分别为150.54μmol/L(95%CI:120.19~187.92)和410.07μmol/L(95%CI:316.25~575.94)。Bartlett检验显示3×3和6×6混合药物组数据方差无显著差异(P>0.05),交互效应图中曲线无明显相交,判断联合作用表现为相加作用。30%效应的观测等效线位于浓度加和等效线置信区间内,表现为相加作用;50%效应的观测等效线位于浓度加和等效线置信区间内以及下方,表现为相加作用,并可能存在协同作用。结论插值法与等效线图法构建的观测等效线可评价二元混合药物联合作用效果,为联合作用评价提供新的途径。

微课与PBL结合的“翻转课堂”教学模式在生理学教学中的应用

"翻转课堂"是在信息化环境中应运而生的新型教学模式。探索将微课与PBL结合的"翻转课堂"教学模式应用在生理学教学中,来激发学生学习兴趣、调动学生学习主动性,培养学生独立自主的获取知识的能力,提高学生分析问题和解决问题的能力,实现"学生为中心"和"自主学习"的教学目的。

PBL教学法融入“以器官系统为中心”的教学模式在医学基础课程整合中的应用及反思

PBL教学法融入"以器官系统为中心"的教学模式在医学基础课程整合中的应用,是对"以学生为中心"的医学教育人才培养模式的教改尝试,有助于培养学生自学能力、综合分析能力、创新意识、团队协作能力,有助于实现当前本科医学专业培养目标。