纳米抗体在食源性微生物污染检测中的应用

食源性微生物污染对人们的生命健康产生威胁,检测技术大多为传统的培养方法,结果准确但操作烦琐,检测周期长。纳米抗体作为一种新的抗原识别和调控工具,具备分子小、免疫原性弱、水溶性好、组织渗透性强、稳定性和亲和力强、易于表达和修饰的优势,已广泛应用于食品安全快速检测领域。本文首先介绍了纳米抗体的结构特征,作为检测工具的优势,筛选与表达的基本情况。然后介绍了纳米抗体在沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌等食源性致病菌检测中的应用,并补充了纳米抗体检测食品中诺如病毒和生物毒素的研究。最后对纳米抗体在食源性微生物污染检测中的应用进行了展望,以期为开发更加高效、准确、便捷的检测方法提供参考。

重大活动食品安全保障中沙门氏菌现场检测方法的建立

目的针对重大活动食品安全保障工作对于现场检测的时间短和设备简单的要求及供应食品的类型,建立经加热处理和未经加热处理食品的沙门氏菌检测方法。方法将重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与侧流免疫层析法(lateral flow immunoassay,LFS)结合,建立RPA-LFS方法对切片水果样品进行检测,再加上叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)处理,建立PMA-RPA-LFS方法,对熟肉制品进行检测。并通过检测人工污染样品及实际样品验证方法的适用性。结果RPA-LFS的沙门氏菌纯菌检出限为2.0×10^(1)CFU/mL,新鲜水果基质检出限为2.0×10^(1)CFU/g。对人工污染样品和实际样品的检测结果与GB4789.4—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法的结果一致。PMA-RPA-LFS的PMA处理方法为0.1%脱氧胆酸钠37℃处理20 min,加入10μg/mL PMA,室温避光孵育10 min,曝光15 min。PMA-RPA-LFS方法的纯菌检出限为2.0×102CFU/mL,同时可抑制浓度为105CFU/mL的死菌的扩增。对人工污染样品和实际样品的检测结果与GB4789.4—2016方法的结果一致。结论本研究建立的PMA-RPA-LFS能区分沙门氏菌死菌和活菌,适用于经加热处理的食品的检测。RPA-LFS与PMA-RPA-LFS结合使用,能更好地满足不同类型食品类别的检测需求,为重大活动食品安全保障工作中致病菌检测的研究积累数据。

核酸适配体生物传感器在食源性致病菌检测中的应用

核酸适配体是一小段经体外筛选得到的寡核苷酸序列,因具备易合成、易修饰、特异性强、稳定性高且广泛结合各种靶标分子等优点受到广泛关注。文章综述了近几年核酸适配体在食源性致病菌检测的研究进展,介绍了核酸适配体的筛选和作用原理,列举了已经筛选获得的食源性致病菌适配体,总结了9种适配体生物传感器在食源性致病菌检测中的应用,提出了目前该技术仍存在的问题,并展望了核酸适配体生物传感器在食源性致病菌检测领域的未来发展趋势。

β-内酰胺酶检测进展研究

国家对乳制品中残留的抗生素含量有严格的限制,部分生产者为了规避检查,非法添加国家明令禁止的"生鲜牛乳抗生素分解剂",又称"解抗剂"。"解抗剂"的主要成分为β-内酰胺酶。目前检测乳制品中β-内酰胺酶的主要方法是杯碟法、酸度计法、碘量法、光纤生物传感器法、酶联免疫吸附法等。

畜禽肉中沙门氏菌活菌可视化检测方法的建立

文章结合叠氮溴化丙啶(PMA)处理、羟基萘酚蓝(HNB)和环介导恒温扩增(LAMP)技术,建立了禽畜肉中沙门氏菌活菌的检验方法。结果表明,经0.1%脱氧胆酸钠(SD)37℃处理20 min,再加入10μg/mL浓度PMA,室温避光孵育10 min,曝光15 min,能抑制10~5 cfu/mL沙门氏菌死菌的DNA扩增。建立的LAMP反应体系添加羟基萘酚蓝的浓度为210μmol/L,纯菌灵敏度可达到10~2 cfu/mL,在人工污染肉制品检出限为10~3 cfu/g。在对20份市售禽畜肉的检测中,建立的活菌可视化LAMP检测方法与国家标准方法GB 4789.4—2016相比,没有出现假阳性的情况。建立的方法为畜禽肉中沙门氏菌的检测提供了新技术,也为其他致病菌的检测提供了新思路。

市售休闲豆干中转基因成分的检测与分析

以休闲豆干为材料,采用磁珠吸附法和柱式吸附法对其进行DNA提取,分别用紫外分光光度法和实时荧光定量聚合酶链式反应PCR(qRT-PCR)检测内参基因,比较这2种提取方法的DNA质量,并对外源基因CaMV35S和NOS进行检测。调查了30批次市售休闲豆干,检测结果表明:有7批次检出转基因成分,阳性率为23.33%。所有检出阳性样品均无转基因标签标识,表明政府应加强对转基因产品的标识管理。