澳洲坚果抗菌肽分离纯化及其肽段鉴定与分析

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽(macadamia nut peptide⁃0,MNP⁃0),以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201⁃C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25对其进行逐级分离纯化,获得抑菌活性较强的抗菌肽,并运用液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC⁃MS/MS)技术对其进行肽段组成与氨基酸序列分析。结果表明:超滤分离的不同分子量澳洲坚果多肽在所有多肽中所占质量分数不同,抑菌活性也有所差异。其中,澳洲坚果多肽组分MNP⁃4占比最高,为29.55%;抑菌活性也最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为10.01 mm与9.41 mm。大孔吸附树脂纯化多肽组分MNP⁃4的技术条件为75%乙醇溶液为解吸剂,静态吸附3 h,动态洗脱体积60 mL。经大孔吸附树脂与交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25分离纯化,获得3个澳洲坚果纯化多肽(macadamia nut purified peptide,MPP)组分,其中组分MPP⁃2的抑菌活性最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为18.67 mm与16.83 mm,优于多肽MNP⁃0与超滤分离多肽组分。分离纯化的澳洲坚果抗菌活性多肽MPP⁃2含有DDLTDPAPA、VLL、WDY、VPV、WDL、LLW、LWL、FDW 8个肽段,经预测分析,属于抗菌肽的肽段为WDL与FDW,其概率得分a(1.00≥a≥0.50)均为1.00,疏水率均为66.67%,均带有1个负电荷,等电点分别为0.69与0.67,并具有较好的溶解性。研究结果表明澳洲坚果可通过酶法制备具有抗菌活性的肽类成分。

响应面法优化澳洲坚果真空油炸工艺及品质分析

以澳洲坚果果仁为原料,制备真空油炸产品。采用单因素实验和响应面Box-Behnken试验进行真空油炸工艺优化;以原料果仁为对照,测定真空油炸果仁含油率、酸价、过氧化值、色差与感官品质指标。结果表明:冷冻温度、真空油炸温度、真空油炸时间和真空度对澳洲坚果果仁的口感和风味品质影响差异极显著(P<0.01),澳洲坚果果仁真空油炸最佳工艺条件:冷冻温度−24℃、真空油炸温度113℃、真空油炸时间58 min、真空度−0.095 MPa,在该工艺条件下制得的澳洲坚果果仁香味浓郁、口感酥松,感官评分为95.90分,酸价、过氧化值分别为0.23 mg/g、0.14 g/100 g,在低水平范围内,符合LY/T 1963-2018的标准要求。因此,真空油炸工艺极显著提高了澳洲坚果果仁的品质。

澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定

为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))6.18 mg/mL与还原能力IC_(50)2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC_(50)0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC_(50)0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于10个氨基酸,匹配得分大于200分的9条肽段分子量为631~920 Da,均无毒性;筛选获得高抗氧化活性肽HLLPK、KEFFP、KEFFPA,其分子量分别为606.84、666.83、737.92 Da。本研究初步揭示了澳洲坚果抗氧化肽组成,深化了澳洲坚果抗氧化肽的研究,为澳洲坚果抗氧化肽的开发利用提供了理论参考。

不同分子量澳洲坚果多肽制备工艺与抗氧化活性

采用不同蛋白酶水解澳洲坚果粕制备多肽,以ABTS^(+)自由基清除率为评价指标,筛选制备抗氧化多肽适宜的蛋白酶。利用DA201-C大孔树脂纯化、超滤膜逐级分离,获得不同分子量澳洲坚果多肽(MNAP-1、MNAP-2、MNAP-3、MNAP-4)组分,并以谷胱甘肽为对照,研究了其对DPPH、羟基、ABTS^(+)自由基的清除能力及还原能力。结果表明:制备澳洲坚果抗氧化多肽的适宜蛋白酶为复配蛋白酶,相同浓度下其对ABTS^(+)自由基清除能力优于中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶与菠萝蛋白酶。不同分子量澳洲坚果多肽呈现不同的抗氧化效果,其对DPPH、ABTS^(+)自由基具有较强的清除作用,具有一定的羟基自由基清除能力和还原能力。其中,MNAP-4(分子量小于1000 Da)的抗氧化活性最好,其对DPPH、ABTS^(+)、羟基自由基清除能力及还原能力的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为0.36、6.75、0.08、3.19 mg/mL,低于其他分子量多肽。相关性分析得出不同分子量澳洲坚果多肽与其清除DPPH自由基(r=0.947,P<0.01)、羟基自由基(r=0.964,P<0.01)、ABTS^(+)自由基(r=0.948,P<0.01)及还原能力(r=0.856,P<0.01)之间存在极显著相关。澳洲坚果复配蛋白酶酶解产物含有抗氧化活性较好的肽类,研究结果可为其抗氧化肽的制备与应用提供一定的理论依据。

低蛋白恒黏度天然橡胶的制备及性能

研究不同恒黏剂与木瓜蛋白酶制备低蛋白恒黏度天然橡胶。对比分析了两种恒黏剂用量对木瓜蛋白酶脱蛋白效果的影响,并对所得低蛋白恒黏度天然橡胶理化性能、硫化特性及物理机械性能进行研究。结果表明,加入0.2%(质量分数)木瓜蛋白酶能使天然橡胶氮质量分数降至0.16%,恒黏剂用量对木瓜蛋白酶脱氮效果影响不明显,0.5%(质量分数)的OPRHAZ-100与0.2%(质量分数)木瓜蛋白酶可制得天然橡胶门尼黏度为63.03,氮含量为干胶质量分数的0.16%,正硫化时间较短为888 s,拉伸强度为26.7 MPa;0.05%(质量分数)的盐酸羟胺与0.2%(质量分数)木瓜蛋白酶可制得天然橡胶门尼黏度为58.7,氮含量为0.17%(质量分数),正硫化时间为894 s,拉伸强度为26.8 MPa。与传统甲酸凝固工艺相比,两种低蛋白恒黏度天然橡胶硫化性能及物理机械性能较好。

澳洲坚果青皮不同极性溶剂分步提取物功能成分与抗氧化活性及其相关性分析

采用80%(体积分数,下同)乙醇超声提取澳洲坚果青皮,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇4种不同极性溶剂对其提取物进行分步萃取,剩余为水溶解物,分别得到80%乙醇提取物、石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物与水溶解物6种溶剂提取物,测定其总酚、黄酮、多糖等主要功能成分质量分数与抗氧化活性,并分析其相关性。结果表明:总酚和黄酮质量分数在澳洲坚果青皮乙酸乙酯提取物中均最高,分别为(40.36±0.48)%与(41.68±0.93)%,多糖质量分数在正丁醇提取物中最高,为(22.08±2.09)%。澳洲坚果青皮不同极性溶剂分步提取物具有较强的2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除能力与较高的还原力,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基与超氧阴离子自由基拥有一定的清除能力。其中,乙酸乙酯提取物对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除能力最强,还原力最高,其半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别为0.67、0.05、0.09 mg/mL。正丁醇提取物对超氧阴离子自由基的清除能力最强,其IC_(50)为0.08 mg/mL,相同质量浓度下优于芦丁。通过对各指标进行皮尔逊相关性分析得出,澳洲坚果青皮不同极性溶剂分步提取物对DPPH自由基清除能力、ABTS阳离子自由基清除能力与还原力均与其总酚、黄酮、多糖质量分数呈极显著正相关(P<0.01),对超氧阴离子自由基的清除能力与其多糖质量分数呈极显著正相关(P<0.01)。应用多元回归分析建立了澳洲坚果青皮不同极性溶剂分步提取物DPPH自由基清除能力(Y_(1))、超氧阴离子自由基清除能力(Y_(2))、ABTS阳离子自由基清除清除能力(Y_(3))、还原力(Y_(4))与其功能成分(总酚(X_1)、黄酮(X_(2))、多糖(X_(3))与皂苷及其他成分(X_4))质量分数之间的线性回归方程,分别为Y_(1)=7.634 4-0.071 0X_(1)+0.170 2X_(2)+0.227 6X_(3)-0.013 3X_(4)、Y_(2)=29.024 5-0.405 0X_(1)+0.320 0X_(2)+0.597 2X_(3)、Y_(3)=40.305 6+0.188 8X_(1)+0.030 4X_(4)与Y_(4)=0.298 2+0.004 5X_(2)+0.006 0X_(3)。结论:研究为开发利用澳洲坚果青皮资源提供一定的技术依据。

氯化锌活化制备澳洲坚果壳活性炭试验

以澳洲坚果壳为原料,采用氯化锌活化法制备活性炭,通过单因素与正交试验研究了活化时间、浸渍比(g:m L)、活化温度、氯化锌质量分数与浸渍时间对制备活性炭得率及吸附能力的影响,优化了最适宜的制备条件,并利用傅里叶红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS)、氮气吸附脱附等技术对最优工艺条件下所制备的活性炭进行了结构表征。结果表明,澳洲坚果壳活性炭制备工艺的各个因素对制备活性炭得率、亚甲基蓝吸附值和碘吸附值影响的主次顺序依次为:活化时间、浸渍比、浸渍时间、活化温度、氯化锌质量分数。最佳制备工艺条件为:活化时间3.5 h、浸渍比1∶4、活化温度550℃、氯化锌质量分数50%、浸渍时间19 h,在此条件下,制备活性炭的得率、水分质量分数、灰分质量分数、强度、亚甲基蓝吸附值和碘吸附值分别为49.95%、1.45%、0.84%、96.78%、412 mg/g和1830 mg/g。制备的澳洲坚果壳活性炭的结构表征结果表明:比表面积为1174 m2/g,其中微孔占总比表面积的42.33%,中孔占57.67%;总孔容为0.82 cm3/g,微孔占总孔容的29.27%,中孔占70.73%;平均孔径为2.80 nm,微孔孔径主要分布在0.93~1.61 nm,中孔孔径分布在2~10 nm,属于中孔型活性炭,并拥有较大比例的微孔,其表面存在醇羟基、酚羟基、醚基、羰基、羧基等含氧官能团,具有一定的亲水性及较强的吸附能力。

不同贮藏条件下3种市售澳洲坚果产品品质及脂肪酸变化

【目的】筛选适宜的澳洲坚果贮藏条件,为澳洲坚果产业化生产和贮藏保鲜提供技术参考。【方法】以带壳果、果仁和开口壳果3种主要市售澳洲坚果产品为研究对象,采用低温冷藏(4℃)和常温贮藏2种方式,以水分含量、酸价、过氧化值、碘值、脂肪酸为评价指标,研究了0~12月的贮藏期间3种澳洲坚果产品品质指标与脂肪酸组成的变化。【结果】随贮藏时间延长,低温冷藏和常温贮藏条件下澳洲坚果带壳果、果仁和开口壳果产品的果仁水分含量及仁油的酸值、过氧化值、C16:0含量、C18:0含量、总饱和脂肪酸含量总体均呈上升趋势,仁油的碘值及C16:1、C18:1、C18:2、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、总不饱和脂肪酸含量均呈下降趋势。相同贮藏方式条件下,贮藏过程中澳洲坚果带壳果各指标变化幅度大于果仁和开口壳果产品。贮藏前期,3种澳洲坚果产品的品质指标、脂肪酸含量在低温冷藏与常温贮藏处理间无显著差异(P>0.05)。在随后的贮藏期内,两者间存在显著差异(P<0.05),其变化幅度均为低温冷藏小于常温贮藏,且随贮藏时间延长,差距逐渐增大。贮藏12月时,低温冷藏条件下澳洲坚果带壳果、果仁和开口壳果产品果仁的水分含量分别为5.09%、1.59%、1.36%,仁油酸价分别为0.227、0.214、0.219 mg/g,仁油过氧化值分别为0.405、0.293、0.226 mg/g,仁油总饱和脂肪酸含量分别为17.49%、16.53%、16.67%,均低于常温贮藏。仁油碘值分别为708.76、750.23、718.17 mg/g,仁油总不饱和脂肪酸含量分别为82.05%、82.56%、82.53%,均高于常温贮藏。【结论】澳洲坚果带壳果贮藏期在6月以内、果仁和开口壳果产品贮藏期在8月以内时,低温冷藏与常温贮藏条件下其品质和脂肪酸含量差别不大,可以选择常温贮藏。更长时间的贮藏时,低温冷藏可有效延缓水分含量的升高和果仁的氧化酸败,使其保持较高的不饱和脂肪酸含量,建议选择低温冷藏,以保证产品品质。

不同焙烤条件对澳洲坚果带壳果品质的影响

采用热风循环旋转烘烤炉对澳洲坚果带壳果进行焙烤处理,运用方差分析评定不同焙烤温度和时间对其果仁色泽、风味及口感感官品质影响,测定其酸价与过氧化值理化指标。结果表明,不同焙烤条件对澳洲坚果带壳果感官品质影响显著(P<0.05),对理化指标影响不显著。以此确定的最佳焙烤条件为:焙烤温度130℃,焙烤时间30 min。在此工艺条件下,焙烤的澳洲坚果果仁感官品质特征最佳,色泽淡黄,风味浓郁,口感脆而细腻,酸价和过氧化值低。

不同成熟度诺丽果主要活性成分分析

通过测定不同成熟度诺丽果中多糖、总酚、总黄酮、总皂苷、总蒽醌、莨菪亭、桃叶珊瑚苷、蛋白质的含量,并对成熟度与活性成分间的相关性进行分析,结果表明:不同成熟度诺丽果的活性成分含量存在较显著差异,除总蒽醌成分含量为青果高于白果和熟果外,其他成分含量均是白果高于其他两种类型果;诺丽果部分活性成分间存在显著的相关性。成熟度的选择可能会对诺丽果后续加工所得产品的质量和有效性产生影响。

澳洲坚果乳的制备及稳定性研究

以澳洲坚果果粕为原料,用单硬脂酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯为乳化剂,羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、卡拉胶、黄原胶、复配瓜尔胶为增稠剂,采用高压均质法制备澳洲坚果乳。以产品稳定系数和感官评分为指标,采用单因素和正交试验,研究澳洲坚果果粕与水质量比、乳液pH值对澳洲坚果乳品质和稳定性的影响;乳化剂添加量和复配比例对澳洲坚果乳乳化效果的影响;不同增稠剂与均质条件对澳洲坚果乳稳定性的影响。得到最优工艺:澳洲坚果果粕与水最佳质量比为1∶15,乳液pH值为6.5~7.0;乳化剂为0.3%,最佳复配比例为4∶6;增稠剂添加量为海藻酸钠0.01%、羧甲基纤维素钠0.03%、复配瓜尔胶0.03%;最优均质工艺参数:温度65℃,压力30 MPa,均质两次。制备的澳洲坚果乳色泽乳白、香气浓郁、组织状态均匀。

含水量对澳洲坚果带壳果浮选效果的影响

以新鲜澳洲坚果带壳果为原料,采用先自然干燥后强制加温干燥的方式获得不同含水量的带壳果,通过水浮选分选为下沉果和上浮果,测定其含水量、脂肪含量、可用果率、缺陷果率及上浮果占比的变化,筛选澳洲坚果带壳果适宜的浮选工艺条件。结果表明:带壳果含水量对浮选效果影响显著,确定的澳洲坚果带壳果适宜的浮选工艺条件为带壳果含水量11%~15%,在此条件下分选的上浮带壳果占比<20%,其可用果率<70%;下沉果的缺陷果率<3%。

不同分子量澳洲坚果多肽氨基酸组成与抑菌活性

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备多肽(MNP-0),通过分级透析将其分离为8种不同分子量的澳洲坚果多肽(MNP-1、MNP-2、MNP-3、MNP-4、MNP-5、MNP-6、MNP-7、MNP-8)组分,测定其多肽含量、氨基酸组成与抑菌活性。结果表明:不同分子量澳洲坚果多肽呈现不同的质量占比,氨基酸组成也有所差异。其中,澳洲坚果多肽MNP-8占比最高,为25.09%,其所含有的与抗菌作用有关的丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、脯氨酸及总疏水性氨基酸占比最高,分别为3.38%、2.42%、4.67%、4.39%与26.92%。多肽MNP-6占比也较高,为18.52%,与多肽MNP-4无显著性差异(P>0.05),其所含有的与抗菌作用有关的赖氨酸占比最高,为6.03%。不同分子量澳洲坚果多肽抑菌效果也不尽相同,其对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌抑菌活性较好,对白色念珠菌与黑曲霉相对较差。其中,澳洲坚果多肽MNP-8对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌抑菌活性最好,在4 mg/mL浓度下,其抑菌圈直径分别为15.92、14.67、13.70、16.98、12.47 mm,最低抑菌浓度(MIC)分别为4.0、5.0、4.5、3.5、18.0 mg/mL。不同分子量澳洲坚果多肽的抑菌活性与其分子量及氨基酸组成密切相关。

天然橡胶乳清废水与菌渣堆肥的研究

针对天然橡胶加工废水与食用菌菌渣产生环境污染的问题,为寻求一种废弃物治理和资源化利用的有效方法,以高浓度乳清和牛肝菌菌渣为研究对象,将二者混合后添加发酵菌剂(EM)进行好氧堆肥处理,对不同处理堆肥过程中的温度、C/N比、有机质、腐殖酸、pH值及含水率变化趋势进行分析,并用发酵完全后的处理A进行种子发芽指数(GI)试验。结果表明,与未加入乳清的堆肥处理B相比,加入高浓度乳清的处理A可快速提高堆体温度,最高温度达60℃,C/N比可下降至20以下。处理A和B有机质含量较发酵前分别下降16.1%和7.4%,发酵前后处理A腐殖酸含量无明显化,处理A发酵后pH值为5.79,含水率为25.5%。处理A堆体温度变化与微生物数量变化趋势相符。种子发芽指数(GI)结果表明,乳清与菌渣堆肥发酵后均能完全腐熟无毒性。

5个橡胶树品系天然橡胶性能的研究

研究5个橡胶树品系天然胶乳的季节性干胶含量和天然橡胶(NR)的理化性质、贮存性能、硫化特性、物理性能。结果表明:各橡胶树品系胶乳的干胶含量随季节变化明显,其中GT1胶乳的平均干胶含量最大,且胶乳的干胶含量随季节波动最小;云研77-4和云研77-2 NR的贮存性能较好;GT1 NR的t90最短,RRIM600和云研77-4 NR的t90较长;GT1和PRI107 NR的物理性能较好。

不同品种珠芽黄魔芋化学成分及多酚氧化酶研究

为了分析不同品种珠芽黄魔芋的化学成分及多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)特性,对5个珠芽黄魔芋品种的葡甘聚糖、粗纤维、蛋白质、生物碱、重金属元素进行测定,研究了3个珠芽黄魔芋品种的PPO最适温度、pH及其热稳定性。结果表明:5个珠芽黄魔芋品种的葡甘聚糖含量为55.30%~63.90%,粗纤维含量为2.77%~3.47%,蛋白质含量为8.08%~10.50%,生物碱的含量为1.73%~1.89%,锰含量为4.36~12.50 mg/kg,镉含量为0.0154~0.206 mg/kg,砷含量为0~0.0102 mg/kg,存在显著性差异(P<0.05);脂肪含量为0.27~0.35%,无显著性差异(P>0.05)。‘弥勒魔芋’、‘西傣9号’、‘云热1701’的多酚氧化酶最适温度为35℃、40℃、35℃,最适pH为6.0、6.0、5.5,温度达到90℃时珠芽黄魔芋中的多酚氧化酶会在短时间内失活。不同品种珠芽黄魔芋的化学成分及多酚氧化酶存在差异性,本研究可为珠芽黄魔芋品种的筛选、加工提供一定的参考依据。

单因素结合响应面法优化魔芋多酚含量测定方法

对Folin-Ciocalteu比色法测定魔芋中多酚含量的条件进行了优化,研究了5%碳酸钠用量、福林酚试剂用量、水浴温度及时间对魔芋多酚含量测定的影响,在单因素试验的基础上,进一步通过响应面设计优化魔芋多酚的检测条件。结果表明,魔芋多酚的最适检测条件为5%碳酸钠溶液用量为2.75 mL、福林酚试剂用量为1.20 mL、反应温度为62℃,待其反应60 min后在769 nm波长处测定吸光度。经验证该检测方法重复性、稳定性好,精密度、回收率高,检测结果准确可靠,该研究结果可为魔芋的开发利用提供实验参考。

超声波-微波联合辅助提取澳洲坚果青皮多糖工艺优化及其抗氧化活性

为了开发澳洲坚果青皮多糖产品,促进澳洲坚果青皮的综合利用,我们以澳洲坚果青皮为试材,比较澳洲坚果果实不同部位的多糖提取率,并采用超声波-微波联合辅助法,运用单因素与正交试验比较微波功率、提取时间、料液比、超声温度4个因素对多糖提取率的影响,研究其最优提取条件。以维生素C为对照,测定澳洲坚果青皮多糖清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟基自由基的能力与还原力,评价其抗氧化活性。结果表明,澳洲坚果果实不同部位中,青皮多糖提取率最高。青皮多糖超声波-微波联合辅助提取工艺中各因素对提取率的影响力从高到低依次为提取时间>料液比>超声温度>微波功率,且均达到极显著水平(p<0.01),最佳提取工艺条件为提取时间90 min、超声温度65℃、料液比(1∶25)g/mL、微波功率400 W,此条件下提取率达到1.96%。澳洲坚果青皮多糖的抗氧化活性与质量浓度呈极显著正相关(p<0.01),相关系数R分别为0.9707、0.9813、0.9912,具有较强的DPPH、羟基自由基清除能力和较高的还原力,其半抑制浓度(IC 50)分别为38.55、20.38、41.51μg/mL,相同浓度下略低于维生素C。

Folin-Ciocalteu比色法测定澳洲坚果青皮中多酚含量

以没食子酸为标准品,对Folin-Ciocalteu比色法测定澳洲坚果青皮中多酚含量的条件进行优化。结果表明,最优检测条件为:检测波长762 nm, Folin-Ciocalteu试剂加入量1 mL, 15%的Na_(2)CO_(3)溶液加入量3 mL,加蒸馏水定容至10 mL,显色温度40℃,显色时间60 min,多酚质量浓度在20~80μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(R^(2)=0.999 0)。该方法的平均回收率为100.65%,相对标准偏差为1.27%。该方法操作简便,重复性、稳定性好,精密度、回收率高,可用于澳洲坚果青皮多酚含量的测定。