Lrrk2 R1628P转基因小鼠尿液外泌体诱导帕金森病样病理变化

目的:探讨Lrrk2 R1628P转基因小鼠尿液外泌体能否诱导帕金森病(PD)样病理改变。方法:提取野生型(WT)和Lrrk2 R1628P转基因小鼠尿液外泌体,使用免疫印迹法检测尿液外泌体标记物TSG101和CD81,Y216位点磷酸化糖原合成酶激酶-3β(pGSK-3β-216)表达水平。在C57小鼠纹状体中分别注射WT小鼠(C57-WT组,n=8)和Lrrk2 R1628P小鼠尿液外泌体(C57-Lrrk2组,n=8)。注射前3天,注射后1、3、6个月,利用平衡木、挂线、转棒和旷场实验对小鼠进行行为学分析,免疫组化法分析脑组织中磷酸化α-突触核蛋白(pα-syn)的沉积情况,免疫印迹法检测脑组织中pα-syn的表达。结果:Lrrk2 R1628P小鼠尿液外泌体TSG101和CD81表达水平与WT小鼠比较,差异无统计学意义(P>0.05),pGSK-3β-216表达水平高于WT小鼠(P<0.001)。C57-Lrrk2组小鼠出现PD样行为学表型(P<0.001),皮层、纹状体和黑质中有pα-syn沉积,脑组织中pα-syn表达水平为(0.44±0.06),C57-WT组则无表达(P<0.001)。结论:小鼠纹状体中注射Lrrk2 R1628P转基因小鼠的尿液外泌体能够诱导PD样病理改变。

电子化建设工程投标的运行效益评估

随着互联网技术的飞速发展,现代建设工程投标方式正逐步向电子化转变。当前研究的焦点主要集中在电子化建设工程投标上,以全面评估其作为新兴投标方式的运行效益。一开始的研究工作是理解电子化投标在建设工程中的应用环境,和学习其在当前市场的展现状况,核心目标是揭示其在对比传统投标形式时所具有的显明优越性。借此为基础,参考了相关学科的评估模型及方法,研发出一个专门评估电子化投标运行效益的分析模型。该模型的主体重点集中在电子化投标的时效性、透明度、便捷度以及成本节约等核心要素。最后,通过整理和研究相关数据,操纵这个评估模型,实现了对电子化投标运行效益的定量评级。研究结果显示,电子化投标在时效性、透明度、便利性等方面均优于传统的纸质投标方式,且可以有效节约投标过程中的各项成本。但同时也指出,电子化投标的推广应用还需要解决网络安全、信息化设备普及等问题。总的来看,本研究的结果对于推动电子化投标的广泛应用及其常规化管理具有重要的指导性,对于公众和决策者理解和评估电子化投标的运行效益也有积极的意义。

110kV架空输电线路雷击故障定位研究

随着电网建设的蓬勃发展,人们对供电可靠性的要求也不断增加。而雷击作为影响系统安全运行的重要因素之一,对生产生活造成了巨大影响。为此,针对传统双端法在雷击故障定位方面上的不足,提出一种基于雷击故障特性的架空输电线路雷击故障定位新方法。首先,根据检测装置在检测点获取得到的故障行波电流、极性以及其他相关信息,以确定折反射波起点以及可能受到影响的雷击范围;其次,根据所获得的信息,利用小波变换原理精确地确定波峰位置;最后,选取合适的雷击故障范围公式,以精确地定位雷击故障点。所提方法经仿真结果验证,雷击故障定位成功率大于99.7%。所提方法故障定位成功率得到了有效提升,对减少故障定位时间和电源的快速恢复具有重要意义。

生物医用亚稳β钛合金的研究进展

钛及钛合金具有高比强度、低的弹性模量、无磁性以及优异的生物相容性和耐腐蚀性能等特点,被认为是理想的生物医用金属材料。以无毒性的Nb,Mo,Ta,Zr和Sn等作为主要合金化元素,并具有更低弹性模量的亚稳β型钛合金是新一代医用钛合金材料的重点发展方向。本文综述了生物医用钛合金的基本特性和发展概况,并以Ti-Nb基医用钛合金为例,介绍了新型亚稳β生物医用钛合金的成分设计方法、合金化原理、研究现状和制备技术。最后指出进一步降低弹性模量,提高强度、疲劳性能和功能特性等综合性能是生物医用β钛合金重点的发展方向,今后可以针对合金化元素的交互作用机理、合金成分设计与组织性能调控方法以及微观力学机制等问题开展深入研究。

雷公藤多甙致大鼠生殖功能低下模型初探

目的:通过测定大鼠动情周期、卵巢和子宫指数、性激素水平及透射电镜下观察卵巢超微结构的改变,探索生殖功能低下大鼠模型的制备方法,进而为临床治疗此类疾病提供可靠的实验依据。方法:采用12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组借鉴前期研究中小鼠的造模剂量和时间,采用雷公藤多甙40mg/(kg·d)灌胃,连续10周,正常组不给药。分别观察2组大鼠动情周期、性激素、子宫和卵巢指数,并观察卵巢超微结构的改变。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,表现为动情周期缺失、不完整或延长,血清E2/P水平明显下降,子宫及卵巢质量下降且卵巢组织结构受损。结论:胃饲雷公藤多甙40mg/(kg·d)10周能损伤大鼠生殖功能,造成雌性大鼠生殖功能低下。

雷公藤多苷对大鼠卵巢血管生成及血供的影响

目的:观察雷公藤多苷对卵巢血管生成及血供的影响,探索其致卵巢功能损伤的机理,为建立卵巢功能低下动物模型奠定基础。方法:选12周龄SD雌性大鼠20只,随机分为正常组和模型组,模型组采用雷公藤多苷40mg/(kg.d)灌胃,连续10周,正常组不给药。给药结束后处死动物;免疫组化法检测Endostatin、VEGF/Flk-1;HE染色后在光镜下分析卵巢血管形态。结果:予雷公藤多苷40mg/kg/d连续灌胃10周,可造成大鼠动情周期紊乱或消失,卵巢血管中Endostatin表达显著升高,VEGF及Flk-1的表达显著降低;卵巢血管横截面积变小而血管壁厚度面积比增大。结论:雷公藤多苷可造成大鼠卵巢血管生成障碍,血液供应减少,导致卵泡发育障碍,从而影响卵巢功能。

TET1基因对小鼠uNK细胞增殖及IFN-γ、VEGF-C和TGF-β1转录水平的影响

本研究旨在了解去甲基化酶1(ten eleven translocation,TET1)对小鼠子宫内自然杀伤细胞(uterine natural killer,uNK)的增殖及其细胞因子分泌表达的影响。采集妊娠9~12 d小鼠子宫内膜,分离淋巴细胞,使用链霉亲和素磁珠法进一步分选uNK细胞进行培养;针对TET1基因合成RNA干扰序列,并将其连接入RNA干扰载体GM-19167,构建干扰表达质粒,包装成慢病毒(lentivirus)并进行病毒滴度的测定;按照慢病毒与细胞数(10~200)∶1的比例转染uNK细胞,168 h后荧光显微镜检测转染效果,收集uNK细胞,以β-actin为内参进行荧光定量PCR检测以验证TET1基因的干扰效果,利用Cell Counting Kit-8(CCK8)对uNK细胞的增殖情况进行检测,分别合成γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)和β1转化因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)3种细胞因子的检测引物,通过荧光定量PCR方法进行检测。结果发现,慢病毒感染168 h后uNK细胞中TET1的表达量显著下降(P<0.05);CCK8试验结果显示,与空载体病毒感染和空白对照组相比较,TET1干扰后其细胞增殖不受影响(P>0.05);荧光定量PCR检测结果显示,细胞因子TGF-β1的表达水平显著上升(P<0.01),而IFN-γ和VEGF-C两种细胞因子均显著下降(P<0.05)。下调TET1基因的表达不影响uNK细胞的正常增殖,但会影响其细胞因子的转录,进而对动物子宫内的天然免疫发挥重要作用。

鼻塞对大鼠血清锌 铜离子浓度的影响

目的:观察鼻塞对大鼠血清锌、铜离子浓度的影响。方法:采用人工堵塞大鼠鼻腔方法,14 d后检测血清锌、铜离子浓度。结果:鼻塞组锌、铜离子浓度均明显低于正常组(P<0.05)。结论:鼻塞能导致大鼠血清锌、铜离子浓度降低。

春之歌

伴着春姑娘轻盈的脚步，我们迎来了生机盎然的春天，整个世界像刚从一个漫长的睡梦中苏醒过来。

食源性乳杆菌中耐药基因的转移研究

为评估食品中乳杆菌(Lactobacillus spp.)耐药基因转移所引起的食品安全风险,对耐药乳杆菌菌株进行了红霉素、万古霉素和氟喹诺酮类药物耐药基因的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)中检测到红霉素耐药基因msr C,万古霉素和氟喹诺酮类药物耐药基因检测结果为阴性。以供体菌和受体菌菌液体积比为10∶1,通过滤膜杂交法,进行乳杆菌耐药基因msr C对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的体外转移,但仅获得1个接合子菌落;乳杆菌对粪肠球菌(Enterococcus faecalis)msr C基因体外转移频率约为2.2×10-2,与敏感菌相比,接合子生长速率减缓。在无特定病原体(specific pathogen free,SPF)裸鼠肠道内进行的L.delbrueckii对E.faecalis的msr C基因体内转移中未检测到接合子。结果表明,乳杆菌携带的可转移耐药基因在肠道内传递至致病菌或机会致病菌的机率很小,且接合子生长比敏感菌缓慢,在抗生素选择压降低或消失的条件下易被淘汰。因此,目前食源性乳杆菌中耐药基因可能引起的食品安全风险较小。

通脉大生片对雷公藤致卵巢损伤大鼠卵巢激素与卵泡发育的影响

目的:探究补肾养血法中药复方通脉大生片修复雷公藤多苷致大鼠卵巢功能损害的作用机理。方法:选雌性育龄期SD大鼠行阴道脱落细胞学涂片筛选出动情周期正常者为受试动物,随机选取6只为正常对照组,其余大鼠予雷公藤多苷40 mg/kg.d灌胃造模。取已造模大鼠30只,随机分为5组,每组6只,分别予倍美力等剂量和通脉大生片高、中、低剂量治疗7 d,模型空白组同期予等量生理盐水。各组均于治疗后第8 d采血并处死动物,称重法计算卵巢指数,放射免疫法检测血清雌二醇(E2)、孕酮,酶联免疫吸附法检测抑制素B(INHB);光镜下观察卵巢组织中生长卵泡和黄体数,测量生长卵泡截面积和周长。结果:①雷公藤多苷的生殖毒性使大鼠动情周期紊乱,卵巢指数下降,血中E2、INHB含量明显降低;生长卵泡和黄体数、卵泡截面积和周长均明显减少变小,与正常对照组比较P<0.05。②用通脉大生片治疗后,大鼠动情周期恢复正常,卵巢指数、E2、INHB水平明显升高,卵巢中可见大量初级、次级和接近成熟的卵泡,与模型空白组比较P<0.05,生长卵泡截面积和周长也有升高趋势。结论:①雷公藤多苷可造成育龄期大鼠卵泡发育障碍,补肾养血法复方通脉大生片能增加生长卵泡的数量,提高雌激素和抑制素B水平,从而修复雷公藤所致卵巢损伤,但对孕激素和黄体数量的影响不明显。②补肾养血复方治疗的有效性初步证实该大鼠模型符合中医肾虚证候属性。

块菌(松露)宿主可培养内生菌群落结构与多样性研究

探究四川凉山彝族自治州块菌主产区华山松内生菌群的结构及多样性。在会东县选取4个点(新田乡、新云乡、淌塘镇、雪山乡)的块菌宿主华山松的根、茎、叶为实验材料,通过不同培养基分离样品根、茎、叶的内生细菌、真菌、放线菌,DNA分子鉴定分离菌株的种属,最终分离得到细菌46株,其中欧文氏菌属(Erwinia)5株,沙门氏菌属(Salmonell)1株,杆菌属(Bacillus)22株,葡萄球菌属(Staphylococcus)2株,假单胞菌属(Pseudomonas)2株,类芽胞杆菌属(Paenibacillus)2株,布丘氏菌属(Buttiauxella)2株,肠杆菌属(Enterobacte)3株,爱文氏菌属(Ewingella)1株,泛菌属(Rahnella)1株,拉恩氏菌属(Rahnella Izard)2株,其他属3株;真菌19株,均为子囊菌门(Ascomycota),其中青霉属(Penicillium)4株,疱霉属(Phoma)1株,子囊菌门未知菌1株,篮状菌属(Cladosporium)1株,分枝孢子菌属(Sydowia)1株,曲霉属(Aspergillus)1株,其他属10株;放线菌33株,为链霉菌属(Streptomyces)22株,短小杆菌属(Curtobacterium)2株,短杆菌属(Brevibacterium)1株,其他属8株。研究结果表明,来自不同地点、不同植株部位、不同培养基分离得到的块菌宿主华山松内生菌有差异,证实微生物在土壤、块菌、宿主植物之间有着复杂的相互作用,为块菌的人工栽培提供参考。

肺气虚与变应性鼻炎的免疫相关性研究

目的:从动物实验角度探讨肺气虚与变应性鼻炎的免疫关系,为临床运用补益肺气法治疗变应性鼻炎提供实验依据。方法:用烟熏法造成肺气虚大鼠模型,应用卵白蛋白为致敏原,建立变应性鼻炎动物模型,运用补肺益气的中药进行药物反证。结果:在肺气虚状态下模型组的症状(鼻痒、喷嚏、清涕)明显,大鼠血清中IL-2含量降低,IL-4、IgE升高(P<0.01);而经过中药治疗后的模型组症状减轻,大鼠血清中IL-2含量升高,IL-4、IgE降低(P<0.01)。结论:在同样的致敏原作用下,肺气虚动物对致敏源的应答反应强烈,较正常动物更容易发生变应性鼻炎,而益气补肺方剂能通过免疫调节而对实验性AR大鼠发挥治疗作用。

通脉大生片对雷公藤致卵巢损伤大鼠性激素与抑制素的影响

目的:探讨补肾法中药复方干预性治疗的作用机理,为中医药调节女性生殖轴的研究提供一个新的符合中医证候特点的病证结合动物模型。方法:选雌性育龄期SD大鼠行阴道脱落细胞学涂片,筛选出动情周期正常者为受试动物,除正常组外,其余大鼠予雷公藤多苷致动情周期紊乱模型。雷公藤模型大鼠随机分为即空白组、倍美力组、中药高、中、低剂量组5组,分别予倍美力和通脉大生片不同剂量治疗7天,空白组同期给予等量生理盐水,正常组正常喂养。各组均于治疗前后采血,称重法测算卵巢指数;放射免疫法检测血清雌二醇、孕酮;酶联免疫吸附法检测抑制素B水平;免疫组化法检测卵巢雌激素受体(ER)、孕酮受体(PR)。结果:①予雷公藤多苷40 mg/kg.d连续灌胃10周,可造成育龄期大鼠动情周期紊乱或消失,卵巢指数下降,血中E2、INHB水平明显降低;卵巢组织中ER表达明显降低;②运用通脉大生片干预性治疗后,大鼠动情周期恢复至正常范围,卵巢指数升高;血清E2、INHB水平及卵巢组织中ER表达均明显升高;与空白组相比均有显著统计学意义。结论:雷公藤多苷可造成大鼠卵泡发育障碍和卵巢功能低下,补肾气益精血的中药复方"通脉大生片"能显著提高模型大鼠血清雌二醇和抑制素B水平及卵巢中ER表达,从而有效地提高雌激素的生物效应和卵巢储备功能。

四川3种商业块菌内生真菌的分离及鉴定

旨在探究四川块菌主产区商业块菌的内生可培养真菌的群落结构及物种多样性。采集四川省凉山彝族自治州4个块菌产区(新田乡、新云乡、淌塘镇、雪山乡)的新鲜块菌子囊果作为实验材料,用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)对采集子囊果中的内生真菌进行分离培养,通过分子方法鉴定分离菌株的种属。从印度块菌(Tuber indicum)、假凹陷块菌(Tuber pseudoexcavatum)以及中华夏块菌(Tuber sinoaestivum)中共分离得到21株丝状真菌,分属于木霉属(Trichoderma)、毛壳属(Chaetomium)、青霉菌属(Penicillium)、镰刀菌属(Fusarium)以及链格孢属(Alternaria)。木霉属、镰刀菌属以及青霉菌属在块菌的子囊果中分布较丰富。初步鉴定出四川3种商业块菌的内生可培养真菌的种类,对块菌的储存保鲜、指导菌根化苗培育、探究块菌的发生机理机制都有重要意义,但对于具体原理还需要进一步探究。