超声结合原卟啉Ⅸ对腹水型S180肿瘤细胞的损伤作用

目的:根据原卟啉IX(PpIX)在S180肿瘤细胞内的含量变化及亚细胞定位分析,研究聚焦超声结合PpIX对S180肿瘤细胞的损伤作用。方法:应用荧光分光光度法测定PpIX在S180肿瘤细胞内的富集;激光共聚焦扫描显微镜观察PpIX的亚细胞定位;台盼蓝拒染法检测超声结合不同浓度的PpIX作用后细胞的存活率;环境扫描电镜观察细胞膜表面超微结构变化。结果:PpIX在S180肿瘤细胞内的富集是一个动态变化过程,45min达到最高点,此时为最佳声照处理时间点,且此时PpIX主要定位于细胞膜;超声激活PpIX对S180肿瘤细胞的杀伤作用明显大于单纯超声组,其膜损伤程度也更为严重。结论:细胞膜可能是超声激活PpIX作用的一个主要靶点。

原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22肿瘤细胞损伤机制的研究

研究了频率为1.43 MHz、强度为1 W/cm2的聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对H-22肿瘤细胞的损伤作用,并探讨其生物学机制.应用台盼蓝拒染法检测不同处理后肿瘤细胞的存活率,环境扫描电镜和透射电镜观察细胞表面和内部的超微结构变化,荧光标记技术检测肿瘤细胞内活性氧的产生,硫代巴比妥酸(TBA)法检测肿瘤细胞脂质过氧化水平的变化.发现原卟啉Ⅸ-声动力学方法对H-22细胞产生的损伤效应表现为:细胞存活率明显下降,细胞表面和内部的超微结构改变,胞内活性氧和脂质过氧化水平增高.结果表明:原卟啉Ⅸ-声动力学方法能够使肿瘤细胞产生活性氧自由基,造成膜脂质过氧化,直接或间接地破坏细胞的膜系统,从而杀伤肿瘤细胞.

聚焦超声对艾氏腹水瘤细胞膜损伤作用的研究

目的 初步探讨频率为2.2 MHz的聚焦超声对艾氏腹水瘤(EAC)细胞膜的损伤作用.方法 台盼蓝拒染法检测不同强度聚焦超声辐射下的细胞的相对存活率;扫描电镜观察细胞膜表面超微结构的变化;流式细胞仪检测辐射后大分子异硫氰酸荧光素钠标记的右旋糖酐(FD500)进入细胞内的量;乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒检测不同辐射后细胞悬液中乳酸脱氢酶的释放量.结果 扫描电镜下观察到EAC细胞膜表面具有声孔现象;聚焦超声辐射30 s与60 s组细胞胞内FD500含量分别为11.46%和18.50%,较对照组含量(0.21%)明显增加;而聚焦超声30 s组和60 s组胞外LDH的活性分别为(2.94±0.02)U/L、(3.28±0.04)U/L,即LDH释放量均随辐射时间的延长而增加.结论 聚焦超声辐射可导致细胞膜通透性改变,其损伤程度与聚焦超声辐射时间有一定的相关性.