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养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析
被引量:
16
1
作者
兰江风
代云佳
林蠡
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期318-325,共8页
近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯...
近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯虾都携带有WSSV。采用WSSV-VP28蛋白特异性抗体对克氏原螯虾提取蛋白进行Western Blot检测,在WSSV-PCR阳性样品中可检测到VP28特异性条带,在WSSV-PCR阴性样品中没有检测到相应条带。采用实验室建立的WSSV绝对定量PCR方法,对携带病毒的克氏原螯虾6个组织(鳃、胃、肠、血淋巴细胞、肝胰腺和心脏)进行检测。结果表明,在鳃、胃和肠可检测到较多病毒量(约108拷贝/mg),其次是血淋巴细胞(107拷贝/mg)、肝胰腺(106拷贝/mg),在心脏中病毒的含量最低(103拷贝/mg),表明病毒的复制存在组织特异性。结果显示WSSV主要存在于消化系统中,预示着克氏原螯虾可能主要在摄食过程中感染WSSV;不同地区克氏原螯虾组织病毒携带量表现出一定差异,预示着WSSV感染可能受到环境因素的影响。
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关键词
克氏原螯虾
白斑综合征病毒
感染率
组织分布
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职称材料
草鱼核因子E2相关因子2基因克隆分析及其对呼吸爆发的调控作用
被引量:
5
2
作者
冯燕
秦真东
+6 位作者
代云佳
张玉蕾
刘小玲
周洋
兰江风
赵丽娟
林蠡
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期161-177,共17页
呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 bp...
呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 bp,编码593个氨基酸(aa)。氨基酸序列比对发现,草鱼Nrf2基因与鲤的同源性最高,为87%;草鱼Nrf2基因含有6个进化过程中保守的Neh[Nrf2-Epoxy chloropropane(ECH)homology]区。实时定量PCR(q RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测结果表明,Nrf2基因在检测的草鱼8个组织中均有表达。Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(t BHQ)处理草鱼肾细胞(CIK)后,CIK细胞总抗氧化能力显著上调,产生的活性氧下调,Nrf2及其下游的HO-1和GST基因的m RNA表达上调。Western blot和免疫荧光(IF)检测结果表明,t BHQ处理CIK后,Nrf2的蛋白表达也上调,并伴随着入细胞核现象。研究表明,保守的草鱼Nrf2基因在机体中广泛表达,能通过上调自身及其下游抗氧化基因的表达下调细胞活性氧的产生,从而参与调控呼吸爆发过程。
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关键词
草鱼
核因子E2相关因子2(Nrf2)
基因克隆
多克隆抗体制备
呼吸爆发
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职称材料
题名
养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析
被引量:
16
1
作者
兰江风
代云佳
林蠡
机构
华中农业大学水产学院
农业部淡水生物繁育重点实验室
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期318-325,共8页
基金
国家自然科学基金(31372563
31572657
+5 种基金
34115185)
中央高校基本科研业务费专项(2013PY069
2014PY035
2662015QC019)
湖北省科技支撑计划(2015BBA228)
农业部渔用药物创制重点实验室开放课题(201401)~~
文摘
近年来克氏原螯虾的养殖受到WSSV的威胁,病毒在宿主组织中的绝对定量对于了解病毒的致病性具有重要意义,但克氏原螯虾组织中WSSV的绝对定量分布还有待研究。实验调查了湖北省5个主养区克氏原螯虾WSSV的感染率,结果表明80%以上克氏原螯虾都携带有WSSV。采用WSSV-VP28蛋白特异性抗体对克氏原螯虾提取蛋白进行Western Blot检测,在WSSV-PCR阳性样品中可检测到VP28特异性条带,在WSSV-PCR阴性样品中没有检测到相应条带。采用实验室建立的WSSV绝对定量PCR方法,对携带病毒的克氏原螯虾6个组织(鳃、胃、肠、血淋巴细胞、肝胰腺和心脏)进行检测。结果表明,在鳃、胃和肠可检测到较多病毒量(约108拷贝/mg),其次是血淋巴细胞(107拷贝/mg)、肝胰腺(106拷贝/mg),在心脏中病毒的含量最低(103拷贝/mg),表明病毒的复制存在组织特异性。结果显示WSSV主要存在于消化系统中,预示着克氏原螯虾可能主要在摄食过程中感染WSSV;不同地区克氏原螯虾组织病毒携带量表现出一定差异,预示着WSSV感染可能受到环境因素的影响。
关键词
克氏原螯虾
白斑综合征病毒
感染率
组织分布
Keywords
Procambarus clarkii
white spot syndrome virus
infection rate
tissue distribution
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S917 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
草鱼核因子E2相关因子2基因克隆分析及其对呼吸爆发的调控作用
被引量:
5
2
作者
冯燕
秦真东
代云佳
张玉蕾
刘小玲
周洋
兰江风
赵丽娟
林蠡
机构
华中农业大学水产学院
仲恺农业工程学院动物科技学院
出处
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期161-177,共17页
基金
国家自然科学基金(31502199,31572657,31372563)
广东省海洋与渔业局基金(A201512C003,2015-115)
+2 种基金
湖北省科技支撑计划(2015BBA228,YSF2015000255)
武汉市科技局资助课题(2016020101010089)
中央高校基本科研业务费专项(2014PY035)
文摘
呼吸爆发过程可以产生大量的活性氧,核因子E2相关因子2(Nrf2)在此过程中起着重要作用。实验克隆和分析了草鱼的Nrf2基因,随后制备了Nrf2蛋白的多克隆抗体,研究了其和呼吸爆发的关系。草鱼Nrf2基因cDNA长度为1994 bp,开放阅读框为1782 bp,编码593个氨基酸(aa)。氨基酸序列比对发现,草鱼Nrf2基因与鲤的同源性最高,为87%;草鱼Nrf2基因含有6个进化过程中保守的Neh[Nrf2-Epoxy chloropropane(ECH)homology]区。实时定量PCR(q RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测结果表明,Nrf2基因在检测的草鱼8个组织中均有表达。Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚(t BHQ)处理草鱼肾细胞(CIK)后,CIK细胞总抗氧化能力显著上调,产生的活性氧下调,Nrf2及其下游的HO-1和GST基因的m RNA表达上调。Western blot和免疫荧光(IF)检测结果表明,t BHQ处理CIK后,Nrf2的蛋白表达也上调,并伴随着入细胞核现象。研究表明,保守的草鱼Nrf2基因在机体中广泛表达,能通过上调自身及其下游抗氧化基因的表达下调细胞活性氧的产生,从而参与调控呼吸爆发过程。
关键词
草鱼
核因子E2相关因子2(Nrf2)
基因克隆
多克隆抗体制备
呼吸爆发
Keywords
Ctenopharyngodon idella
NF-E2-related factor 2
gene cloning
polyclonal antibody
ROS
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S917.4 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
养殖克氏原螯虾体内白斑综合征病毒的绝对定量分析
兰江风
代云佳
林蠡
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
16
下载PDF
职称材料
2
草鱼核因子E2相关因子2基因克隆分析及其对呼吸爆发的调控作用
冯燕
秦真东
代云佳
张玉蕾
刘小玲
周洋
兰江风
赵丽娟
林蠡
《水产学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
5
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职称材料
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