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新型桶形芋螺毒素BtIIIB的分离纯化、氨基酸序列测定及二硫键定位研究 被引量:11
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作者 赵听友 曹瑛 +2 位作者 代先东 范崇旭 陈冀胜 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期163-168,共6页
采用凝胶色谱、高效液相色谱等方法从栖息于我国南海的桶形芋螺的毒液中纯化出一个新的芋螺毒素BtIIIB.采用氨基酸组成分析、质谱分析和Edman降解测定BtIIIB为15肽,其氨基酸序列为:CCELPCHGCVPCCWP.结构中含有6个半胱氨酸,形成3对分子... 采用凝胶色谱、高效液相色谱等方法从栖息于我国南海的桶形芋螺的毒液中纯化出一个新的芋螺毒素BtIIIB.采用氨基酸组成分析、质谱分析和Edman降解测定BtIIIB为15肽,其氨基酸序列为:CCELPCHGCVPCCWP.结构中含有6个半胱氨酸,形成3对分子内二硫键.采用部分还原的方法,分步还原毒素中的二硫键,用氰基化试剂衍生生成巯基,然后在碱性条件下将衍生的产物进行裂解,用MALDI-TOFMS测定裂解后片段的分子量,确定了其二硫键的配对方式为Cys1-Cys13,Cys2-Cys9,Cys6-Cys12的部分交叉式结构,是芋螺毒素中比较特别的配对方式. 展开更多
关键词 芋螺毒素 二硫键 氨基酸序列 半胱氨酸 MS 高效液相色谱 毒液 MALDI-TOF 栖息 分离纯化
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一种新型独特芋螺毒素的分离与结构鉴定 被引量:3
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作者 刘尚义 曹瑛 +4 位作者 赵听友 代先东 钟明鼐 范崇旭 陈冀胜 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1482-1484,共3页
Cone snails are tropical marine predatory molluscs,and there is an unprecedented variety of neuropharmacologically active peptide.Over seventy living species of cone snails are distributed in China.The ve-nom of Conus... Cone snails are tropical marine predatory molluscs,and there is an unprecedented variety of neuropharmacologically active peptide.Over seventy living species of cone snails are distributed in China.The ve-nom of Conus caracteristicus collected from South China Sea was studied in this work.A new conotoxin,cr5a,was isolated from the venom through Sephadex G-25 chromatography and HPLC,and then was identified by(amino) acid analysis,mass spectrometry,N-terminal sequence.The primary structure of cr5a was CCKFQFLNFCCNE,it shared a conserved T-superfamily of conotoxins arrangement of cysteine residues(CC-CC).Total chemical synthesis of the two possible disulfide linkages of cr5a was achieved,and the result of HPLC co-elution showed that cr5a was a tridecapeptide with a disulfide connectivity of Cys1-Cys10, Cys2-Cys11.So cr5a is a new member of the T-superfamily conotoxins. 展开更多
关键词 芋螺毒素 T-超家族 独特芋螺 结构鉴定
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托烷类生物碱的合成研究进展 被引量:3
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作者 黄锋 代先东 +2 位作者 胡亚兰 陈常英 朱国政 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期141-144,共4页
托烷类生物碱是具有 8氮杂双环 [3,2 ,1]辛烷分子骨架的一类化合物。它们及其类似物在医疗上占有重要地位。就其代表物东莨菪碱、山莨菪碱和包公藤甲素以及重要中间体的合成方法进行综述。
关键词 托烷类生物碱 东莨菪碱 山莨菪碱 包公藤甲素 合成
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MALDI-TOF质谱法检测人血清中沙林-丁酰胆碱酯酶加合物
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作者 姚戈 曹瑛 +4 位作者 范崇旭 刘尚义 代先东 温晓波 陈冀胜 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期129-136,共8页
对生物医学样品进行化学毒剂分析检测是禁止化学武器组织(OPCW)核查小组在毒剂指称使用调查中收集事实的方法之一。丁酰胆碱酯酶(BChE)作为有机磷毒剂在体内的作用靶点,是有机磷毒剂染毒检测的最佳生物指示物之一。利用亲和固相萃取(SPE... 对生物医学样品进行化学毒剂分析检测是禁止化学武器组织(OPCW)核查小组在毒剂指称使用调查中收集事实的方法之一。丁酰胆碱酯酶(BChE)作为有机磷毒剂在体内的作用靶点,是有机磷毒剂染毒检测的最佳生物指示物之一。利用亲和固相萃取(SPE)技术进一步发展了样品预处理方法,建立了血液样品中染毒BChE的分析方法;利用胰蛋白酶酶解方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)比较了血液中BChE在沙林染毒前后的肽指纹谱变化。该方法灵敏度高、快速简便,可用于OPCW生物医学样品中毒剂暴露染毒的追溯性检测。 展开更多
关键词 生物医学样品 有机磷毒剂 丁酰胆碱酯酶 基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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基于数值模拟的整体式结合齿轮复合冷整工艺研究
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作者 代先东 武欢 +2 位作者 孙阳 张金梁 曹建国 《热加工工艺》 北大核心 2022年第15期80-83,共4页
基于多向模锻工艺原理提出了结合齿轮复合冷整工艺。首先,对结合齿轮进行工艺分析,并设计了不同的模具结构。然后,利用Deform-3D软件模拟了各方案下锻件的成形过程,对比选出了最优模具结构。最后,以轴向载荷和成形质量为优化目标采用正... 基于多向模锻工艺原理提出了结合齿轮复合冷整工艺。首先,对结合齿轮进行工艺分析,并设计了不同的模具结构。然后,利用Deform-3D软件模拟了各方案下锻件的成形过程,对比选出了最优模具结构。最后,以轴向载荷和成形质量为优化目标采用正交试验优化了冷整前齿坯尺寸。结果表明:径向凸模采用浮动结构可使径向最大载荷降低31.5%,轴向载荷降低8%;采用优化后的齿坯成形锻件可使轴向最大载荷降低16.1%,且成形后齿部充填饱满无缺陷。 展开更多
关键词 整体式结合齿轮 复合冷整 模具设计 工艺优化
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6β—乙酰氧基—3—酮基去甲托烷的化学合成
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作者 代先东 朱国政 《防化研究》 2001年第1期19-20,共2页
简要介绍了托烷类化合物去甲基的方法。改进了文献报道了6β-乙酰氧基-3-酮基去甲托烷的合成方法,加入除酸剂,提高了原料的转化率。
关键词 托品酮 化学合成 6β-乙酰氧基-3-酮基去甲托烷 N-取代托烷 中间体
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基于数值模拟分析结合齿温锻成形工艺及缺陷控制研究 被引量:1
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作者 孙阳 黄斯韬 +2 位作者 武欢 代先东 曹建国 《模具工业》 2021年第1期1-5,共5页
针对结合齿预锻坯料结构及齿形填充不满、材料折叠、模具使用寿命短的问题,利用DeForm-3D数值模拟技术研究预锻坯料连皮在中心和底面、径向和正向的成形方案对结合齿成形情况、凸模载荷、应力应变分布、凹模磨损的影响,获得了冲孔连皮... 针对结合齿预锻坯料结构及齿形填充不满、材料折叠、模具使用寿命短的问题,利用DeForm-3D数值模拟技术研究预锻坯料连皮在中心和底面、径向和正向的成形方案对结合齿成形情况、凸模载荷、应力应变分布、凹模磨损的影响,获得了冲孔连皮在中间位置正向成形的温锻工艺方案,为结合齿预锻成形工艺提供了技术支撑,有助于企业降低开发和生产成本。 展开更多
关键词 结合齿 温锻 冲孔连皮 数值模拟 工艺分析
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褐边绿刺蛾幼虫刺毛结构及蛰伤机制初探
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作者 杨乐乐 段琛媛 +5 位作者 李晶 孟凡华 曹瑛 代先东 张爱兵 范崇旭 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期221-228,共8页
刺蛾科幼虫是我国常见的农林业害虫之一,其体表长有防御性的有毒刺毛,会伤害接触者,使其产生瘙痒、刺痛、丘疹、红肿、皮炎等症状。本研究利用体视显微镜、扫描电镜对褐边绿刺蛾Parasa consocia末龄幼虫的刺毛形态结构进行了观察,将不... 刺蛾科幼虫是我国常见的农林业害虫之一,其体表长有防御性的有毒刺毛,会伤害接触者,使其产生瘙痒、刺痛、丘疹、红肿、皮炎等症状。本研究利用体视显微镜、扫描电镜对褐边绿刺蛾Parasa consocia末龄幼虫的刺毛形态结构进行了观察,将不同刺毛提取物进行小鼠足底皮下注射,测试刺激活性,并使用SDS-PAGE电泳对提取物成分进行了初步分析。结果表明,褐边绿刺蛾幼虫具有4种结构的刺毛,分别为体刺、棒状体刺、修饰刚毛和微球刺;体刺和修饰刚毛的提取物均能引起小鼠疼痛和红肿反应,修饰刚毛提取物还能引起流涕、分泌眼屎等过敏症状;SDS-PAGE电泳显示提取物的主要成分为蛋白和多肽化合物。研究表明褐边绿刺蛾幼虫刺毛造成的伤害除机械伤害外,还存在沾染、刺入注射、刺入携带毒液3种化学毒害方式,机械伤害与化学伤害协同作用。 展开更多
关键词 褐边绿刺蛾 毛虫 修饰刚毛 体刺 生物毒素
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高效液相色谱-串联质谱法同时测定10种脂溶性贝类毒素 被引量:1
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作者 万嘉峻 孟凡华 +2 位作者 代先东 范崇旭 曹瑛 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期154-160,共7页
本研究采用甲醇提取,正己烷液-液萃取除油脂,HLB固相萃取柱富集净化,利用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测,建立了同时检测贝类中10种脂溶性贝类毒素的分析方法。该方法明显降低了基质抑制效应;对10种目标物的检出限(S/N=3)为0.10... 本研究采用甲醇提取,正己烷液-液萃取除油脂,HLB固相萃取柱富集净化,利用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测,建立了同时检测贝类中10种脂溶性贝类毒素的分析方法。该方法明显降低了基质抑制效应;对10种目标物的检出限(S/N=3)为0.104~3.87μg/kg;利用外标法进行定量,目标物线性良好;加标平均回收率(n=6)为77.54%~116.9%,相对标准偏差(RSD)小于15%。利用本方法对6种贝类样品进行了检测,部分样品检出低浓度的米氏裸甲藻毒素(GYM)和原多甲藻酸毒素(AZA1)。该方法基质干扰小,净化效果强,灵敏度高,适合贝类中多种脂溶性贝类毒素的同时检测。 展开更多
关键词 正己烷萃取 固相萃取 液相色谱-串联质谱 脂溶性贝类毒素
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微波辅助RGD环肽的固相合成
10
作者 时华曜 范崇旭 +2 位作者 代先东 刘尚义 曹瑛 《合成化学》 CAS 北大核心 2019年第2期137-140,共4页
以2-氯代三苯甲基氯树脂为载体,采用Fmoc/t-Bu/Dmab正交保护策略,在微波辅助下合成了环肽c(fKRGD),收率22.5%,纯度94.5%,其结构经MS(ESI), MS(MALDI-TOF)和HPLC确证。
关键词 微波辅助 固相环化 Dmab保护基 RGD环肽 合成
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固相多肽合成中Dmab保护基的脱除研究
11
作者 时华曜 范崇旭 +2 位作者 代先东 刘尚义 曹瑛 《化学研究》 CAS 2018年第3期257-263,共7页
在固相多肽合成中,Dmab作为羧基保护基具有脱保护条件温和、步骤简便、选择性高的特点,但有时脱保护效率并不稳定.为此,基于Fmoc/t Bu/Dmab三维正交保护策略,利用固相多肽合成技术设计并合成了4个肽树脂,对固相多肽合成中Glu和Asp主链... 在固相多肽合成中,Dmab作为羧基保护基具有脱保护条件温和、步骤简便、选择性高的特点,但有时脱保护效率并不稳定.为此,基于Fmoc/t Bu/Dmab三维正交保护策略,利用固相多肽合成技术设计并合成了4个肽树脂,对固相多肽合成中Glu和Asp主链和侧链羧基的Dmab保护基脱除规律进行了研究.结果显示,树脂上α-ODmab的脱保护快速、完全,β-ODmab和γ-ODmab脱保护反应较慢,可以检测到相应的中间产物(4-氨基苄酯肽),推测脱保护效率由快到慢依次为α-ODmab>β-ODmab>γ-ODmab.该结果表明Dmab作为α-COOH保护基具有较高的应用价值,但用于β-COOH和γ-COOH保护时,其脱保护条件尚不成熟. 展开更多
关键词 Dmab保护基 脱保护 固相多肽合成
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桶形芋螺毒素bt5a的分离纯化与结构鉴定(英文)
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作者 代先东 范崇旭 +3 位作者 曹瑛 蒋辉 刘尚义 陈冀胜 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期132-136,共5页
目的:对中国南海桶形芋螺(Conus betulinus)毒液的化学成分进行研究。方法:采用凝胶色谱、高效液相色谱对桶形芋螺毒液分离纯化,得到一个肽类毒素,通过质谱分析、氨基酸组成分析、N-端序列分析、二硫键定位确定了其化学结构,用合成物对... 目的:对中国南海桶形芋螺(Conus betulinus)毒液的化学成分进行研究。方法:采用凝胶色谱、高效液相色谱对桶形芋螺毒液分离纯化,得到一个肽类毒素,通过质谱分析、氨基酸组成分析、N-端序列分析、二硫键定位确定了其化学结构,用合成物对化学结构进行了验证。结果:从中国南海桶形芋螺毒液中鉴定了1个芋螺毒素,氨基酸序列为H-Ser-Gla-Cys-Cys-Ile-Arg-Asn-Phe-Leu-Cys-Cys-OH,其中Cys3与Cys10,Cys4与Cys11形成2个链内二硫键,命名为芋螺毒素bt5a。结论:芋螺毒素bt5a为未见文献报道的新毒素,是芋螺毒素T-超家族的一个新成员。 展开更多
关键词 桶形芋螺 芋螺毒素 分离纯化 结构鉴定 T-超家族
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半胱氨酸肽片段连接法合成ω-芋螺毒素MVIIA
13
作者 代先东 范崇旭 +3 位作者 曹瑛 刘尚义 蒋辉 陈冀胜 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第7期667-671,共5页
ω-芋螺毒素MVIIA是已上市的镇痛药Ziconotide的有效成分.采用标准Fmoc保护策略在聚苯乙烯树脂上合成ω-MVIIA比较困难,是固相合成中的"困难肽".本研究将ω-MVIIA分为N-端15肽硫酯和C-端10肽两个片段采用标准Fmoc保护策略分... ω-芋螺毒素MVIIA是已上市的镇痛药Ziconotide的有效成分.采用标准Fmoc保护策略在聚苯乙烯树脂上合成ω-MVIIA比较困难,是固相合成中的"困难肽".本研究将ω-MVIIA分为N-端15肽硫酯和C-端10肽两个片段采用标准Fmoc保护策略分别合成,再通过半胱氨酸肽片段连接得到全长的ω-芋螺毒素MVIIA肽链.该方法提高了合成ω-芋螺毒素MVIIA产率.该研究为"困难肽"的合成提供了较好的参考方法. 展开更多
关键词 半胱氨酸肽片段连接 多肽硫酯 多肽合成 ω-芋螺毒素MVIIA
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基于Deform二次开发的连杆折叠缺陷预测及优化 被引量:4
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作者 武欢 陈康 +4 位作者 代先东 黄斯韬 孙阳 张金梁 曹建国 《锻压技术》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期12-18,共7页
为解决某厂船用连杆生产过程中产生的折叠缺陷,借助Deform软件进行优化分析,由于Deform自带的折叠角不能准确地预测连杆折叠缺陷,故将折叠概率指数通过二次开发嵌入Deform软件从而对折叠缺陷进行预测,预测结果与实际情况相符,并利用材... 为解决某厂船用连杆生产过程中产生的折叠缺陷,借助Deform软件进行优化分析,由于Deform自带的折叠角不能准确地预测连杆折叠缺陷,故将折叠概率指数通过二次开发嵌入Deform软件从而对折叠缺陷进行预测,预测结果与实际情况相符,并利用材料流动分析确定了圆角过渡区产生折叠缺陷的原因。探究了坯料圆角过渡区的圆角半径、终锻温度、模具加压速度对折叠概率指数的影响,结合正交实验找到优化工艺参数组合,并在二次开发后的Deform软件中进行模拟,模拟结果显示折叠状况大大改善。最后进行了工厂试生产,所得锻件形状精整,折叠报废率由20.97%降至0.91%,且微观组织和晶粒度均达到了生产要求,验证了工艺优化的有效性,为类似的折叠缺陷优化工作提供了参考。 展开更多
关键词 折叠缺陷 连杆 折叠概率指数 二次开发 DEFORM
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电子屏蔽罩支架平面度超差原因分析及控制 被引量:1
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作者 张金梁 曹建国 +3 位作者 邵长伟 杜磊 武欢 代先东 《锻压技术》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期109-115,共7页
屏蔽罩支架是屏蔽罩的重要组成部分,为解决屏蔽罩支架产品的平面度超差问题,对其产生原因和工艺优化进行了分析。首先,采用数值模拟技术,探讨了顶料力、压边及压边力和板料工艺结构等因素对屏蔽罩支架成形质量的影响,结果表明,增大顶料... 屏蔽罩支架是屏蔽罩的重要组成部分,为解决屏蔽罩支架产品的平面度超差问题,对其产生原因和工艺优化进行了分析。首先,采用数值模拟技术,探讨了顶料力、压边及压边力和板料工艺结构等因素对屏蔽罩支架成形质量的影响,结果表明,增大顶料力、添加压边圈并全拉深、增加压边力、改进工艺结构有利于抑制该薄板冲压件的翘曲倾向。然后,根据影响因素设计了优化方案并最终通过实物实验,发现在精冲结束后增加一道过压量为0.01 mm的过压整形工序,以及更改引伸工序前面板料工艺结构为C型的优化方案有利于抑制翘曲,同时采用两种优化方案可以将平面度从0.6~0.8 mm减小至0.3~0.5 mm。 展开更多
关键词 屏蔽罩支架 平面度 回弹 翘曲 精冲
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