颈椎动态稳定器置入术与颈椎前路椎间盘切除减压植骨融合术治疗单节段颈椎病的临床效果

目的探讨颈椎动态稳定器置入术(DCI)与颈椎前路椎间盘切除减压植骨融合术(ACDF)治疗单节段颈椎间盘退变引起的脊髓或神经根颈椎病的临床效果。方法纳入武汉大学人民医院2013年3月~2014年8月收治的60例单节段颈椎退行性椎间盘疾病患者,按照其手术方式的不同,分为DCI组(24例)和ACDF组(36例)。临床评价指标主要如下:两组手术时间、术中出血量;两组术前、术后3,12个月颈部的视觉模拟评分(VAS-N)和上肢疼痛评分(VAS-A),颈部疼痛与残疾量表(NPAD),欧洲五维健康量表(EQ-5D)。影像学结果包括:手术邻近节段活动度(ROM)、颈椎整体角度(C_(2~7)Cobb角)结果。结果 DCI组手术时间及出血量均明显低于ACDF组(P<0.05)。DCI组和ACDF组术后临床疗效随访12~18个月,平均14.6个月。VAS-N、VAS-A、NPAD评分和EQ-5D评分:两组术后3、12个月随访结果与术前相比,差异均有统计学意义(P<0.05),临床疗效明显;但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。DCI组术后ROM较术前无明显改变(P>0.05);ACDF组术后12个月ROM较术前明显增加(P<0.05);DCI组术后12个月较ACDF组减小(P<0.05)。ACDF组术后3个月C_(2~7)Cobb角与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05),术后12个月与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DCI与ACDF治疗单节段颈椎病在中短期随访中临床效果满意。DCI能有效保留手术节段的活动度,与ACDF相比,能更好地保护脊柱的运动。

乳腺癌骨转移中的“恶性循环”研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,晚期乳腺癌患者大多出现骨转移。乳腺癌骨转移大多造成溶骨性破坏,由此导致一系列骨相关事件,如疼痛、高钙血症、病理性骨折、神经功能损害等,严重影响患者的生活质量。转移到骨组织中的肿瘤细胞与骨微环境相互作用、相互促进,形成一个"恶性循环",即:乳腺癌细胞通过分泌PTHr P,促进RANKL分泌并减少OPG合成,造成RANKL/OPG的比例失调,从而促进破骨细胞分化和成熟,造成骨质溶解,骨基质中的TGF-β大量释放又反过来促进乳腺癌细胞分泌PTHr P。本文综述了乳腺癌骨转移中的"恶性循环"研究进展,以期为以此"恶性循环"为靶点的骨改良药物的研究开发提供参考。

华蟾素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖迁移凋亡的影响

目的:研究华蟾素对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,用倒置显微镜观察不同浓度华蟾素对MDA-MB-231细胞形态的影响;CCK-8实验检测华蟾素对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;划痕实验检测华蟾素对MDA-MB-231细胞迁移能力的抑制作用;FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度华蟾素对MDA-MB-231细胞凋亡率的影响;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved capsase-3、Cleaved caspase-9和PTHrP的表达。结果:CCK-8结果显示华蟾素可以时间、浓度依赖性地抑制MDA-MB-231细胞增殖;划痕实验结果表明华蟾素可抑制MDA-MB-231细胞迁移;流式细胞术结果表明华蟾素可浓度依赖性地诱导MDA-MB-231细胞凋亡;Western Blot结果表明,华蟾素可上调MDA-MB-231细胞中促凋亡蛋白Bax、Cleaved capsase-3、Cleaved caspase-9,下调抑凋亡蛋白Bcl-2。此外,华蟾素还可抑制MDAMB-231细胞中PTHrP的表达。结论:华蟾素通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡可能是其抗三阴性乳腺癌的机制;华蟾素通过下调乳腺癌MDA-MB-231细胞中PTHrP进而抑制溶骨性骨转移的发生,有待于后续的动物实验来进行验证。

InterTan和PFNA-Ⅱ股骨近端髓内固定系统治疗高龄股骨转子间骨折的疗效比较

目的比较InterTan和PFNA-Ⅱ髓内固定系统治疗高龄股骨转子间骨折的临床疗效。方法回顾性分析2012年1月—2016年1月武汉大学人民医院骨一科采用InterTan(InterTan组,n=20)和PFNA-Ⅱ(PFNA-Ⅱ组,n=22)治疗的高龄(≥80岁)股骨转子间骨折患者的病例资料,对比分析2组患者围手术期资料、术后并发症、骨折愈合时间、髋关节Harris评分等情况。结果 InterTan组手术时间、术中失血量显著多于PFNA-Ⅱ组(t=2.331、3.948,P=0.035、0.016);InterTan组局部及全身并发症7例(35.0%),置入物相关并发症发生5例(25.0%),PFNA-Ⅱ组分别为8例(36.4%)和6例(27.3%),2组比较差异无统计学意义(P>0.05);所有患者平均随访3~12个月,中位数6.8月,InterTan组平均骨折愈合时间为(14.0±3.2)周,稍短于PFNA-Ⅱ组的(14.5±3.3)周,但差异无统计学意义(P>0.05);2组末次随访时髋关节Harris评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 InterTan和PFNA-Ⅱ髓内固定系统均可用于治疗高龄股骨转子间骨折,可获得即时稳定性,进行早期功能锻炼、但PFNA-Ⅱ髓内固定系统具有手术时间短、术中失血量少等的优势。

脊柱转移瘤动物模型的比较及研究进展

脊柱是恶性肿瘤骨转移的常见部位,晚期乳腺癌、肺癌、前列腺癌等患者大多可出现脊柱转移。肿瘤脊柱转移造成椎体溶骨性破坏,病理性骨折,从而导致脊柱不稳,再则出现疼痛以及神经功能损害等一系列骨相关事件,使患者生活质量严重下降。目前,对于恶性肿瘤脊柱转移的过程,以及其随后在脊柱中继续生长,侵袭的机制尚缺深入了解。因此,建立一个能有效模拟肿瘤在人体内侵袭、转移过程的动物模型以便于深入研究显得至关重要。本文综述了近些年国内外研究者们常用的建立脊柱转移瘤的动物模型及其方法,比较其优缺点,为研究者们提供参考。

华蟾素抗骨肉瘤作用中相关信号通路的研究进展

骨肉瘤是常发于青少年的恶性肿瘤,具有易转移、预后差的特点。随着诊疗水平的进步,骨肉瘤患者的5年生存率虽有明显提高,但仍有很大的提升空间。传统中药的抗肿瘤作用已被广泛关注,华蟾素是近些年来较为广泛使用的中药制剂,大量研究已经证实华蟾素能对骨肉瘤产生抑制作用,其中的分子机制复杂多样,尚未完全阐明。现就目前已研究的华蟾素抗骨肉瘤涉及的分子机制中相关信号通路进行综述,归纳起来,华蟾素可以通过抑制GSK-3β/NF-κB信号通路,激活ROS/JNK/p38信号通路,下调骨肉瘤细胞中的Notch信号从而发挥抗骨肉瘤的作用,为进一步探索华蟾素抗骨肉瘤的分子机制提供参考。

miR-145-3p通过下调CDK1抑制骨肉瘤MG-63细胞系的增殖、侵袭与凋亡

目的研究mircoRNA-145-3p(miR-145-3p)对骨肉瘤细胞系MG-63细胞的增殖、侵袭与凋亡的调控作用。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定miR145-3p在MG-63细胞与人成骨细胞系hFOB1.19细胞中的表达水平。将MG-63分成实验组和对照组,通过人工合成miR145-3p-mimic(miR-145-3p类似物),使用慢病毒载体将miR-145-3p-mimics转入实验组MG-63细胞内,同时使用慢病毒载体将空质粒转入对照组细胞内。通过CCK-8方法检测两组细胞增殖能力;流式细胞仪分析两组细胞的细胞周期及凋亡情况; Transwell实验测定细胞侵袭能力; RT-PCR测定两组细胞miR-145-3p和周期素依赖性蛋白激酶1(CDK1)的表达情况;通过Targetscan数据库和荧光素酶实验确定CDK1是否为miR-145-3p的靶基因; Western印迹法检测基因的表达水平。结果 miR-145-3p在骨肉瘤细胞系MG-63细胞中的表达量为(0. 59±0. 24),较人成骨细胞系hFOB1. 19细胞中的表达量(1. 46±0. 21)明显降低,差异具有统计学意义(P <0. 05)。CCK-8结果显示,在48 h、72 h、96 h、120 h时,实验组细胞增殖能力较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P <0. 05)。流式细胞周期结果显示,处于G1期细胞数量为(69. 92±0. 13)%,较对照组(49. 43±0. 09)%明显增多(P <0. 05),而处于S期细胞数量(26. 01±0. 08)%,较对照组(40. 67±0. 11)%明显减少,差异具有统计学意义(P <0. 05)。凋亡实验结果显示,实验组细胞的凋亡比率为(31. 3±4. 7)%,较对照组(9. 35±1. 9)%明显增高,差异具有统计学意义(P <0. 05)。转染野生型CDK1后,实验组荧光素酶活性较对照组明显降低,差异有统计学意义(P <0. 05);而转染突变型CDK1后,实验组荧光素酶活性较对照组无明显变化,差异无统计学意义(P> 0. 05)。Western印迹实验结果显示,实验组中CDK1的表达量较对照组明显降低,且表达水平较对照组也明显降低(P <0. 05)。结论 miR-145-3p通过下调节CDK1表达,抑制骨肉瘤细胞系MG-63细胞的增殖、侵袭能力,并促进其凋亡。

华蟾酥毒基对U2OS细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖和凋亡的影响,从而探讨华蟾酥毒基诱导骨肉瘤凋亡的可能机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系U2OS,CCK-8法检测不同浓度华蟾酥毒基对骨肉瘤细胞系U2OS增殖的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色,显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化,应用逆转录荧光定量PCR法检测华蟾酥毒基对凋亡通路相关mRNA表达的影响。结果:CCK-8检测显示华蟾酥毒基可抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性,在华蟾酥毒基浓度为20 nmol·L^(-1)时,对细胞增殖的抑制作用明显增强;流式细胞术检测显示华蟾酥毒基可明显诱导骨肉瘤细胞凋亡;Hoechst 33258染色可见凋亡小体;逆转录荧光定量PCR分析显示经华蟾酥毒基处理后的骨肉瘤细胞系U2OS表达Caspase-3,8,9较用药前明显增高。结论:华蟾酥毒基对骨肉瘤细胞系U2OS的增殖有显著抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用机制可能与激活Caspase依赖的凋亡途径有关。

Sextant内固定系统治疗单纯胸腰段椎体骨折附加病椎固定与跨病椎固定的疗效分析

目的比较使用Sextant内固定系统治疗胸腰段椎体骨折附加病椎椎弓根钉固定与跨病椎固定的临床疗效。方法选择武汉大学人民医院2013年1月至2016年1月收治的70例胸腰段椎体骨折患者,其中男性38例,女性32例;年龄37~53岁,平均年龄45.3岁。根据入院顺序随机分为附加病椎固定组(A组,35例)和跨病椎固定组(B组,35例)。采用Sextant内固定系统,A组将病椎及其上下相邻椎体共同固定;B组仅固定病椎上下相邻椎体,不对病椎进行处理。分别统计患者的手术时间、术中出血量、术后并发症发生率及术前、术后病椎前后缘高度比值、腰椎后凸畸形程度、视觉模拟量表(VAS)评分情况。结果所有患者均获得至少1年随访时间。两组患者在手术时间、术中出血量、术后伤口疼痛方面差异无统计学意义(P>0.05)。术后病椎椎体前缘高度比(92.1%±6.9%vs 82.9%±5.7%)、椎体前后缘高度比(84.1%±3.9%vs 70.9%±5.7%)、腰椎后凸畸形改善方面,A组明显优于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。术后并发症A组疼痛2例,并发症发生率5.71%;B组断钉4例,疼痛3例,并发症发生率20.00%;两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论附加病椎椎弓根螺钉内固定力学稳定性更好,并且在恢复椎体高度、改善腰椎后凸畸形、维持椎体高度上明显优于跨伤椎固定。因此,对于单节段、单纯胸腰段椎体压缩性骨折患者,使用经皮Sextant椎弓根螺钉内固定系统附加病椎椎弓根螺钉固定是更为理想的治疗方法。

退变性腰椎滑脱症的手术治疗进展

退变性腰椎滑脱是临床上较为常见的骨科疾病,是引起老年人腰腿痛的主要原因之一。退变性腰椎滑脱的治疗分为保守治疗和手术治疗,在手术治疗中,术式较多,可分为单纯减压、非融合固定与融合固定等,后者包括后外侧融合、后路腰椎间融合、经椎间孔腰椎间融合、前路腰椎间融合、前后路联合融合(360°融合)等,临床上多推荐经椎间孔腰椎间融合术,但随着腰椎微创手术的不断发展,微创理念加深,斜外侧腰椎融合术等开始运用于临床,使得退变性腰椎滑脱的手术方式更加多样。

DAPT对骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的观察γ-分泌酶抑制剂DAPT对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖和凋亡的影响,探讨DAPT抑制骨肉瘤增殖并诱导其凋亡的可能机制。方法采用体外培养人成骨肉瘤细胞系U2OS,CCK-8法检测不同浓度DAPT对成骨肉瘤细胞系U2OS生长的抑制作用;Annexin V-FITC/PI双标染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Hoechst 33258染色,倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化;应用RT-PCR和Western blot法检测DAPT对凋亡通路相关mRNA和蛋白表达的影响;采用Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性变化。结果CCK-8检测显示5~50μmol/L的DAPT可抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖并具有时间和剂量依赖性;流式细胞术检测显示5、10、20μmol/L的DAPT可明显诱导骨肉瘤U2OS细胞发生凋亡,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);5、10、20μmol/L的DAPT处理后,Hoechst 33258染色可见凋亡小体;RT-PCR和Western blot分析显示,经DAPT(5、10、30μmol/L)处理后的骨肉瘤细胞系U2OS表达Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA较对照组明显增高(P<0.05),促凋亡蛋白Bax表达增加(P<0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.05);Caspase活性检测显示,DAPT(5、10、20、30μmol/L)处理后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性较对照组明显升高(P<0.05)。结论γ-分泌酶抑制剂DAPT对骨肉瘤细胞系U2OS的增殖有显著抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用机制可能与激活Caspase依赖的凋亡途径有关。

重组人骨形态发生蛋白-2联合后椎弓根螺钉系统固定加椎间植骨融合治疗退变性腰椎滑脱的效果

目的探讨重组人骨形态发生蛋白-2(rh BMP-2)联合后椎弓根螺钉系统固定加椎间植骨融合(PLIF)在退变性腰椎滑脱中的疗效分析。方法回顾性分析2015年5月~2016年5月武汉大学人民医院收治的50例退变性腰椎滑脱患者的临床资料,将其分为试验组30例采用rhBMP-2联合PLIF手术,对照组20例采用单纯PLIF手术。对患者术前及术后随访测量的Prolo评分、滑脱率、奥斯沃斯特里功能障碍指数(ODI)、视觉疼痛模拟评分(VAS)及腰椎融合率进行统计学分析。结果术后3个月、6个月两组患者ODI、VAS评分均低于术前(P<0.05),且试验组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月、6个月试验组腰椎植骨融合率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后两组滑脱率低于术前(P<0.05),Prolo评分高于术前(P<0.05);且术后试验组滑脱率低于对照组(P<0.05),Prolo评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PLIF是治疗退变性腰椎骨滑脱较为有效合理、简单易行的方法,联合使用rhBMP-2能提高手术疗效,表现为提高术后Prolo评分,降低术后ODI脊柱评分和VAS疼痛模拟评分,降低术后滑脱率和提高腰椎植骨融合率等,近期预后佳,值得临床上推广。

两种植骨融合内固定术在退变性腰椎管狭窄症治疗中的临床疗效分析

目的比较后路椎间植骨融合(posteriorlumbar interbody fusion,PLIF)内固定术与后外侧植骨融合(posterolateral lumbarfusion,PLF)内固定术在退变性腰椎管狭窄症治疗中的临床疗效。方法退变性腰椎管狭窄症患者48例,将48例患者分为两组,PLIF组25例,PLF组23例,分别采用PLIF内固定术和PLF内固定术治疗,比较两组患者手术时间、出血量、术后住院时间、并发症、植骨融合率及优良率。结果48例患者得到5~29个月随访,平均12.8个月。PLIF组手术时间、术后住院时间、并发症、植骨融合率及优良率高于PLF组,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);PLIF组出血量高于PLF组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PLIF手术时间相对较长,出血量及并发症相对较多,但植骨融合率及优良率高于横突间植骨。临床上应根据患者病情,选择合适的植骨融合方案。

滑模技术在水利水电工程施工中的实施

作为我国经济和和社会发展中的重要基础,水利水电工程的建设工作也在近年来受到更多关注和重视。而在我国经济的飞速发展中,水利水电事业发展水平也得到极大的提高,各种现代化技术也不断出现,其中滑模技术以其高效便捷且成本低廉的优势得到广泛应用。

MiRNA在骨肉瘤中作用的研究进展

骨肉瘤是原发于骨组织的最常见的恶性肿瘤,好发于儿童和青少年。随着新辅助化疗的应用,骨肉瘤的治疗取得了显著的进步,但骨肉瘤的预后仍然很差。诊断患有骨肉瘤的患者中,30%生存期不过5年,研究骨肉瘤的新治疗方法仍然是很迫切的任务,但还有许多挑战和困难[1-3]。研究表明骨肉瘤细胞基因呈多样化改变,

顺铂影响骨肉瘤143B细胞Notch信号通路的实验研究

目的研究不同浓度顺铂对骨肉瘤143B细胞Notch通路的影响。方法不同浓度顺铂(2μM、4μM、6μM、8μM、10μM)处理不同时间(1 d、2 d、3 d、4 d、5 d))后,细胞增殖与活性检测(CCK-8法)测定顺铂对骨肉瘤细胞增殖抑制率的影响;实时定量PCR(qRT-PCR)分析Notch目的基因的相对表达量;Western blot及免疫荧光法半定量分析Notch目的基因的相对表达量。结果顺铂给药后143B细胞增殖受抑制,尤其是当浓度大于4μM时;qRT-PCR、Western blot及免疫荧光结果显示当顺铂浓度较低时(≤4μM),Notch信号通路激活,而浓度较高时(≥6μM)时则受抑制。结论顺铂对骨肉瘤Notch信号通路的影响具有剂量依赖性和时间依赖性,且必须在处理48 h后才能发挥其效应。

华蟾素联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究华蟾素联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和凋亡的影响,并探寻联合治疗增敏的可能分子机制。方法:采用不同浓度的华蟾素、顺铂单药和华蟾素联合顺铂处理人骨肉瘤U2OS细胞1-3天,通过CCK-8法检测其对U2OS细胞生长的抑制作用;平板克隆实验检测其对U2OS细胞集落形成能力的影响;流式细胞仪检测其对U2OS细胞凋亡的影响;RT-PCR及Western blotting检测Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9等凋亡相关分子mRNA及蛋白水平的表达。结果:单用华蟾素或顺铂均可以浓度和时间依赖的方式抑制骨肉瘤U2OS细胞的增殖并诱导其凋亡,两药联合应用具有协同效应,并可以上调促凋亡基因Bax下调抑制凋亡基因Bcl-2的表达;联合用药组凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9的表达较单药组明显增加。结论:华蟾素联合顺铂与单一用药相比能够显著抑制人骨肉瘤细胞U2OS细胞的增殖,促进其凋亡,两药联合应用对骨肉瘤细胞的杀伤效应具有一定的协同效应,其机制可能与激活凋亡通路有关。

MiR-335通过作用于POU5F1负性调节骨肉瘤干细胞特性的实验研究

目的:研究表明骨肉瘤干细胞与骨肉瘤的发生发展及耐药密切相关。本文探讨miR-335在骨肉瘤干细胞中所起的作用。方法:利用不同方法筛选出骨肉瘤干细胞,检测miR-335的表达水平。利用分子探针技术将骨肉瘤细胞分选为miR-335高表达组和低表达组,检测各组中骨肉瘤细胞的干细胞样特性。利用转染技术检测miR-335对骨肉瘤干细胞样特性的影响。利用荧光素酶报告基因系统,验证miR-335下游靶基因。最后,利用裸鼠移植瘤动物模型,检测pre-miR-335联合化疗药阿霉素对骨肉瘤的在体抑制效果。结果:miR-335在骨肉瘤干细胞中表达量明显减少。miR-335高表达细胞的干细胞特性明显降低。转染实验验证了上述结果。荧光素酶报告试验显示miR-335在转录后水平上负性调节POU5F1基因。动物实验表明pre-miR-335联合阿霉素在抑制骨肉瘤上明显优于单一阿霉素的抑制效果。结论:miR-335通过下调POU5F1负性调节骨肉瘤干细胞特性。miR-335联合传统化疗药可协同抑制骨肉瘤。

汉黄芩素抗骨肉瘤143B细胞的实验研究

目的:观察汉黄芩素对人骨肉瘤细胞系143B增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用体外培养人成骨肉瘤细胞系143B,CCK-8实验检测不同浓度汉黄芩素对骨肉瘤143B细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析汉黄芩素对癌细胞周期分布及凋亡的影响;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的表达水平。结果:CCK-8结果显示汉黄芩素以时间、浓度依耐性的方式抑制骨肉瘤143B细胞的增殖;流式细胞术结果表明汉黄芩素可导致骨肉瘤细胞周期阻滞于G0/G1期并以浓度依赖的方式诱导骨肉瘤细胞凋亡;Western Blot检测结果证明,汉黄芩素可上调骨肉瘤细胞中促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3的表达,而下调抑制凋亡蛋白Bcl-2。结论:汉黄芩素抑制骨肉瘤细胞增殖、导致细胞周期阻滞,促进其凋亡,并呈现时间和浓度依赖性,汉黄芩素激活Caspase凋亡途径及诱导细胞周期阻滞可能是其抗骨肉瘤的作用机制。