大补元煎通过MAPK通路增加食管癌细胞对铂类药物敏感性的实验研究

目的该研究旨在综合分析BATMAN-TCM数据库、TCGA数据库以及细胞生物学验证和裸鼠荷瘤实验,深入探讨大补元煎在食管癌治疗中的潜在作用机制,尤其关注其对顺铂治疗敏感性的影响。方法首先通过BATMAN-TCM数据库对大补元煎的成分和对靶蛋白的影响进行综合分析,并进行相关富集分析。其次在TCGA数据库中筛选食管癌差异基因并进行详细的富集分析。随后进行大补元煎对食管癌细胞对顺铂的敏感性的细胞生物学验证。最后通过裸鼠荷瘤实验证明大补元煎能够增强顺铂对肿瘤的抑制作用。结果BATMAN-TCM和TCGA的分析结果显示,大补元煎靶蛋白在细胞对化学刺激的反应、代谢途径、癌症通路等关键功能中发挥重要作用。实验验证表明,大补元煎不仅能够显著增强食管癌细胞对顺铂的敏感性,还通过激活MAPK通路进一步加强了顺铂的治疗效果。细胞增殖和裸鼠荷瘤实验证实了大补元煎与顺铂的协同作用,显著抑制了食管癌细胞的增殖和荷瘤小鼠肿瘤的生长。结论该研究得出结论,大补元煎可能通过激活MAPK通路来提高顺铂对食管癌的敏感性,为大补元煎在癌症治疗中的应用提供了新的理论基础和实验依据。

虎七散诱导食管癌EC9706细胞线粒体凋亡和铁死亡的研究

目的:本研究旨在探讨虎七散能否通过调控氧化还原和线粒体稳态诱导线粒体凋亡和铁死亡,并进一步分析其对P53蛋白表达的影响。方法:线粒体凋亡试验分为空白对照组、虎七散2、4、8 mg/mL组;铁死亡试验分为空白对照组、铁抑素-110μmol/L组、联合给药组(铁抑素-110μmol/L+虎七散8 mg/mL)、虎七散8 mg/mL组。采用CCK-8法检测细胞存活率;采用试剂盒检测细胞内GSH、MDA含量,SOD活力;ROS荧光探针(DCFH-DA)、脂质过氧化荧光探针(BODIPYTM581/591C11)、线粒体膜电位探针JC-1及铁离子Phen green SK(PGSK)探针,分别测定ROS、脂质ROS、线粒体膜电位及铁离子的荧光强度;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;TUNEL一步凋亡法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞线粒体凋亡蛋白(BCL-2、BAX、CytC、Active Caspase-3)、铁死亡蛋白(xCT、ACLS4、GPX4)及P53蛋白的表达。结果:通过线粒体凋亡试验,与空白对照组相比,虎七散8 mg/mL组明显抑制食管癌EC9706细胞增殖,细胞内GSH含量和SOD活力降低,ROS水平增加和线粒体膜电位单体的荧光强度增强,细胞的凋亡率升高,细胞的侵袭和迁移降低,BAX、CytC、Active Caspase-3和P53表达上调,BCL-2表达下调(P<0.05或P<0.01)。铁死亡实验结果显示,与空白对照组相比,虎七散8 mg/mL组的细胞内GSH含量减少,MDA含量增加,ROS水平增加以及线粒体膜电位单体荧光强度增强,铁离子荧光强度降低,ACSL4和P53表达上调,xCT和GPX4表达下调(P<0.05);与虎七散8 mg/mL组相比,铁抑素-110μmol/L+虎七散8 mg/mL组细胞内GSH含量增加,MDA含量降低,ROS水平及线粒体膜电位单体荧光强度均降低,铁离子荧光强度增强,ACSL4和P53蛋白表达下调,xCT和GPX4蛋白表达上调(P<0.05)。结论:虎七散有促氧化作用,能通过促进ROS和脂质ROS过度累积,调控氧化还原和线粒体稳态,诱导线粒体凋亡和铁死亡,上调P53表达;其靶向氧化还原、线粒体稳态及P53,协同线粒体凋亡和铁死亡可能是治疗癌症的潜在药物。