深低温冷冻对大鼠髌腱肌腱干细胞干性及多向分化能力的影响

目的:研究深低温冷冻对大鼠髌腱肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的干性以及成骨、成脂肪、成软骨和成肌腱分化能力的影响。方法:实验组大鼠髌腱组织用深低温冷冻处理2周,对照组未作特殊处理。从两组髌腱组织中分离培养出TDSCs,采用细胞免疫荧光检测TDSCs干性相关标志物Nanog、Oct4和Sox2的表达,成骨、成脂肪、成软骨诱导分化实验分别检测成骨、成脂肪、成软骨分化能力,细胞免疫荧光和实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测成肌腱能力。结果:两组TDSCs培养7 d(P0代)时均可见大的多边形和星形细胞形态,P3代时均可见均一的成纤维样细胞形态。两组TDSCs均表达干性相关标志物Nanog、Oct4和Sox2,均具有成骨、成脂肪、成软骨和成肌腱分化特性,且两组细胞的干性相关标志物Nanog、Oct4及Sox2的表达和多向分化能力之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:深低温冷冻处理的髌腱组织中检测到有活性的TDSCs,且TDSCs干性和多向分化能力无明显变化,这些发现可能为研究同种异体肌腱移植治疗肌腱缺损中关于内源性修复的存在提供依据。

骨形态蛋白在慢性腱病发病机制中的作用

慢性腱病又称肌腱过度使用性损伤，是一种常见的临床运动性病变，其发病机制目前仍不清楚。慢性腱病的临床标本及动物模型标本均可观察到成骨、成软骨源性骨形态蛋白（BMPs）如BMP-2、BMP-4、BMP-7的表达，也可观察到导致肌腱愈合失败的软骨样细胞、骨样细胞、脂肪细胞及钙化点，BMPs可能就是导致慢性腱病发病机制中组织化生和其他病理变化的主要原因。该论文总结了目前支持BMPs在慢性腱病发病机制中发挥作用的证据，从BMPs在慢性腱病中异常表达、作用的效应细胞、发病机制中的作用和潜在治疗方法这4个方面分别阐述，以更好地理解BMPs在慢性腱病发病机制中的作用，为慢性腱病退行性病变的干预和治疗提供参考。

老年股骨转子间骨折患者术后死亡危险因素分析

目的分析老年股骨转子间骨折术后死亡率及其危险因素。方法以2014年1月-2015年12月因股骨转子间骨折行股骨近端交锁髓内钉内固定治疗的患者为研究对象,其中135例患者符合选择标准纳入研究。收集患者临床资料,包括性别、年龄、入院至手术时间、合并内科疾病,以及入院时血红蛋白、白蛋白、总淋巴细胞计数(total lymphocyte count,TLC)、营养状况。采用单因素分析及Cox比例风险模型筛查患者术后死亡危险因素。结果内固定术后2年内共27例(20.0%)患者死亡,其中16例(11.9%)于术后1年内死亡。单因素分析显示,年龄、合并冠状动脉粥样硬化性心脏病、合并内科疾病数量、入院时血红蛋白及白蛋白水平是股骨近端交锁髓内钉内固定治疗的老年股骨转子间骨折患者术后死亡影响因素(P<0.05)。多因素分析显示,年龄(≥80岁)、合并2种以上内科疾病和术前白蛋白<35 g/L是患者术后死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论老年股骨转子间骨折患者术后死亡率高,因此对于此类患者,尤其是高龄、合并内科疾病较多和低白蛋白患者,应综合评估围术期风险,加强围术期管理,以改善临床预后。

深低温冷冻对大鼠髌腱组织内肌腱干细胞生物学特性影响的研究

目的探讨深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的成活、细胞活力、早期凋亡、迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法取12只4月龄雄性SD大鼠双侧髌腱组织,其中6只大鼠12条髌腱组织(实验组)进行深低温冷冻处理;剩余髌腱组织(对照组)不作处理,作为正常对照。取两组髌腱组织用0.3%Ⅰ型胶原酶消化获得有核细胞,分别用锥虫蓝染色检测有核细胞成活率、结晶紫染色检测有核细胞克隆形成能力;取两组髌腱组织分离培养TDSCs,并传至第3代,采用Alamar Blue法检测细胞体外增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡率;Transwell法检测细胞迁移能力;实时荧光定量PCR检测细胞肌腱相关基因Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col1α1)、scleraxis(Scx)和tenomodulin(Tnmd)m RNA表达。结果与对照组(91.00%±3.63%)比较,实验组原代有核细胞成活率为61.65%±4.76%,差异有统计学意义(t=12.010,P=0.000)。两组有核细胞接种后,均呈克隆样生长;培养12 d,实验组每1 000个有核细胞克隆集落形成数为(8.41±0.33)个,较对照组(15.19±0.47)个显著减少(t=28.910,P=0.000)。实验组TDSCs占活性有核细胞比例为1.37%±0.09%,较对照组1.67%±0.10%显著减少(t=5.508,P=0.003)。第3代TDSCs培养14 d内两组细胞生长趋势一致;两组各时间点吸光度(A)值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组及对照组TDSCs早期凋亡率分别为1.67%±0.06%、1.63%±0.06%,比较差异无统计学意义(t=0.707,P=0.519)。镜下见,两组均有TDSCs黏附于Transwell小室下室,实验组细胞数为(445.00±9.70)个,对照组为(451.50±12.66)个,比较差异无统计学意义(t=0.998,P=0.342)。实验组Col1α1、Scx、Tnmd的m RNA相对表达量分别为3.498±0.065、0.062±0.002、(4.211±0.211)×10–5,对照组分别为3.499±0.113、0.062±0.001、(4.341±0.274)×10–5,比较差异均无统计学意义(t=0.013,P=0.991;t=0.042,P=0.969;t=0.653,P=0.549)。结论大鼠肌腱组织经深低温冷冻后其有核细胞成活率降低,但肌腱组织仍保留大量有活性TDSCs,且细胞增殖能力、早期凋亡率、体外迁移能力及成肌腱分化能力未见明显异常。

老年股骨颈骨折患者人工股骨头置换术后死亡的危险因素分析

目的分析老年股骨颈骨折患者人工股骨头置换术后死亡率及其危险因素。方法以2011年1月—2015年12月因股骨颈骨折行人工股骨头置换术患者为研究对象,将符合选择标准的109例患者纳入研究,收集临床资料,包括年龄、性别、合并基础疾病数量、入院至手术时间以及术前血红蛋白、营养状况。采用单因素分析和Cox比例风险回归模型筛查术后死亡危险因素。结果术后1年和2年死亡率分别为6.4%(7/109)和17.4%(19/109)。单因素分析显示年龄、术前血红蛋白水平和营养状况是患者术后死亡的影响因素(P<0.05)。多因素分析显示,年龄≥80岁和营养不良是患者术后死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论老年股骨颈骨折患者人工股骨头置换术后死亡率高,对于此类患者,尤其是高龄和营养不良者,应多学科综合评估围术期风险,加强围手术期管理和优化,以改善临床预后。