N-三甲基壳聚糖透皮吸收促进作用的初步研究

目的考察N-三甲基壳聚糖(-Ntrimethyl chitosan,TMC)作为透皮吸收促进剂的作用,并对其作用机制做初步研究。方法用壳聚糖及碘甲烷为主要原料,合成季铵化程度为60%的TMC,即TMC60,通过1H-NMR确定其季铵化程度。应用衰减全反射傅立叶红外光谱(ATR-FTIR)探讨TMC60对角质层角蛋白的作用。以月桂氮酮为阳性对照,睾酮为模型药物,考察TMC60对离体皮肤的透皮作用。结果经1H-NMR确定合成得到的TMC60季铵化程度为67.2%。鼠角质层经TMC60处理后,角蛋白的酰胺吸收峰Ⅱ带的峰位从1 538.7 cm-1向低波数位移到1 536.8 cm-1。结合用去卷积方法对酰胺吸收峰Ⅱ进行处理,结果表明,TMC60可使部分角蛋白从α-螺旋型结构向β-折叠型结构和无规则卷曲型结构转变。体外透皮实验中,TMC60组的累积透过量、稳态渗透速率显著大于空白组和月桂氮酮组(P均小于0.05)。结论TMC60有较好的透皮吸收作用,其作用机制与影响皮肤角质层角蛋白结构有关。

羟基喜树碱包衣纳米脂质体的处方及制备工艺研究

目的研究羟基喜树碱包衣纳米脂质体的处方筛选及制备工艺。方法采用薄膜分散法制备羟基喜树碱脂质体;用柱色谱法分离游离药物;用紫外分光光度法测定包封率;用正交实验优选处方;用氯化壳聚糖包被脂质体,经高压乳匀得到纳米脂质体(<100nm)并测定Zeta电位、粒径大小及分布;用不同冻干保护剂进行冷冻干燥,以筛选合适的保护剂。结果最佳处方制备的药物平均包封率为(68.8±0.9)%(n=3);包衣纳米脂质体的Zeta电位为55.1mV,平均粒径为90.9nm,粒径分布为20-120nm;以15%海藻糖做冻干保护剂的脂质体冻干前后粒径变化最小。结论本试验制备的羟基喜树碱包衣纳米脂质体具有包封率高,稳定性好,表面带正电荷等特点,为其进一步研究奠定了基础。

羟基喜树碱包衣纳米脂质体的制备及在小鼠体内组织分布的研究

目的研究羟基喜树碱（HCPT）氯化壳聚糖（CS-HCl）包衣纳米脂质体（nanoliposomes）的制备方法,并考察其在小鼠体内的组织分布.方法采用薄膜分散法制备HCPT脂质体,用CS-HCl包衣后乳匀,得到CS-HCl包衣的HCPT纳米脂质体（平均粒径＜100nm）.除去游离HCPT后,测定其包封率（EE%）、平均粒径、粒径分布及Zeta电位.以5 mg·kg^-1羟基喜树碱的剂量小鼠尾静脉注射HCPT注射液、普通HCPT脂质体、HCPT纳米脂质体、包衣HCPT纳米脂质体,测定血浆及肝、脾组织中的血药浓度.结果包衣HCPT纳米脂质体的EE%为（61.2±1.20）%,平均粒径为（91.9±8.78）nm,Zeta电位为（55.1±1.04）mV（n=3）.包衣HCPT纳米脂质体在血液中AUC0～48为HCPT纳米脂质体的1.3倍,为普通HCPT脂质体的4.7倍,为注射液的25.4倍.AUCplasma/AUCRES表明,包衣HCPT纳米脂质体为HCPT纳米脂质体的1.4倍,为普通脂质体的8.7倍,为注射液的3.4倍.结论该包衣HCPT纳米脂质体具有大小均匀,带有较大正电荷,能显著延长药物在血液循环中的时间,减少RES对脂质体的吞噬作用等特点.

N-三甲基壳聚糖对胰岛素液体栓剂直肠吸收的促进作用研究

目的研究不同季铵化程度及其不同浓度的N-三甲基壳聚糖(-Ntrimethyl chitosan,TMC)对胰岛素液体栓剂药物直肠吸收的影响。方法以壳聚糖及碘甲烷为主要原料合成两种季铵化程度的TMC,即TMC40和TMC60。以泊洛沙姆407(P407)和泊洛沙姆188(P188)(15%∶20%)为基质,分别以浓度为0,0.1%和0.5%的TMC40或TMC60作为黏膜吸收促进剂制备胰岛素液体栓剂。以2 g.kg-1(相当于胰岛素200 U.kg-1)给药剂量直肠给糖尿病小鼠不同的胰岛素液体栓剂,用血糖试纸测定给药后糖尿病小鼠不同时间点的血糖值,计算出各制剂的AUC0→4,进行比较。结果未加TMC的胰岛素液体栓剂没有降血糖的作用;加入了TMC的液体栓剂均能显著降低糖尿病小鼠的血糖水平,且随着TMC浓度的增加,促进作用增强,而当浓度相同时,TMC60的作用大于TMC40,其中含有0.5%TMC60的胰岛素液体栓剂降血糖的作用最好,在1.5 h时血糖降至最低,为初始水平的(19.6±6.5)%,其AUC0→4为(108.2±4.6)。结论TMC可以促进胰岛素的直肠吸收,且随着其季铵化程度的增加,其促吸收作用增强。

莲子心中酚性生物碱3种主要成分定量分析及其特征图谱研究

目的 :建立同时测定莲子心中酚性生物碱 :莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的RP -HPLC法以及酚性生物碱的特征图谱。方法 :采用RP -HPLC法 ,流动相为乙腈 水 三乙胺 (2 5∶75∶0 .1 ,用磷酸调 pH3.3) ,紫外检测波长 2 82nm ,流速0 .8mL·min-1 ,进样量 2 0 μL。结果 :莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱线性方程显示线性关系良好。特征图谱研究确定了酚性生物碱 1 6个共有峰。结论 :本方法简便、准确 ,重现性好 ,专属性强 ,可为莲子心中生物碱类物质标准提取物质量控制提供参考。

不同季铵化程度的N-三甲基壳聚糖透皮吸收促进作用的研究

目的研究不同季铵化程度的N-三甲基壳聚糖(N-trimethylchitosan,TMC)对药物透皮吸收的促进作用,以判断季铵化程度对TMC发挥透皮吸收促进作用的影响。方法以壳聚糖及碘甲烷为主要原料,合成不同取代度的TMC,即TMC40和TMC60,通过1H-NMR确定其季铵化程度。以睾酮为模型药物,分别以溶液法和凝胶法考察两种不同季铵化程度TMC的透皮吸收促进作用。结果经1H-NMR确定合成得到的TMC40,TMC60季铵化程度分别为38·8%和67·2%。溶液法及凝胶法两种方法的体外透皮实验结果均表明TMC60组、TMC40组及空白组的累积透过率、稳态透皮速率的作用大小顺序为TMC60组>TMC40组>空白组。结论TMC60的透皮促进作用大于TMC40,表明在一定范围内随着季铵化程度的增加,TMC透皮吸收促进作用增大。

羟基喜树碱包衣纳米脂质体在小鼠体内的抗肿瘤活性研究

目的比较羟基喜树碱(HCPT)氯化壳聚糖包衣纳米脂质体与HCPT注射液、HCPT脂质体、HCPT纳米脂质体在小鼠体内的抗肿瘤活性。方法采用动物移植性肿瘤的瘤重实验法,用小鼠艾氏腹水瘤癌细胞接种于小鼠右侧背部皮下形成实体瘤。以5mg·kg-1HCPT的剂量给药,考察不同制剂对实体瘤的瘤重抑制率及肿瘤坏死范围。结果HCPT包衣纳米脂质体给药组的瘤重抑制率及肿瘤坏死范围均显著高于其他几种制剂给药组(P<0·05)。结论同HCPT注射液、HCPT脂质体及HCPT纳米脂质体相比,HCPT包衣纳米脂质体的抗肿瘤活性有显著提高。

替莫唑胺壳聚糖缓释微球的制备及体外释药特性

目的:制备替莫唑胺壳聚糖缓释微球,并对其体外释药模式进行研究.方法:以替莫唑胺为模型药物,采用乳化交联法制备壳聚糖微球,两步优化法优化处方和制备工艺.通过测定微球的粒径及其分布、载药量、包封率和体外释放速度对微球进行质量评价.结果:优化工艺制得的微球平均粒径为(3.9±1.6)μm,载药量为(7.1±0.5)%(n=3),包封率为(25.0±0.8)%(n=3),体外释药特性研究具有良好的缓释特性,在0～8 h符合Higuchi方程,Q=11.717+26.951t1/2(r=0.980),8～24 h符合一级释放曲线,lnQ=4.37+0.007 5t(r=0.983).结论:通过优化处方和制备工艺,采用乳化交联法可制备出以壳聚糖为载体、替莫唑胺为模型药物的缓释微球,其体外释药具有明显的缓释作用.

N-三甲基壳聚糖对胰岛素液体栓剂体外性质的影响

目的研究不同季铵化程度及其不同浓度的N-三甲基壳聚糖(-Ntrimethyl chitosan,TMC)对胰岛素液体栓剂体外性质的影响。方法用壳聚糖及碘甲烷为主要原料,合成不同季铵化程度的TMC,即TMC40和TMC60,通过1H-NMR确定其季铵化程度。以泊洛沙姆407和188为基质,以TMC作为黏膜吸收促进剂制备胰岛素液体栓剂,用血糖试纸测定给药后小鼠不同时间点的血糖值,TMC季铵化程度及其不同浓度(质量分数为0%,0.1%,0.5%,1%)对液体栓剂的体外胶凝温度、胶凝强度和生物黏附力影响。结果经1H-NMR确定合成得到的TMC40,TMC60季铵化程度分别为38.8%和67.2%。同一种季铵化程度TMC,随着TMC浓度的增加,胰岛素液体栓剂的胶凝温度减小,胶凝强度和生物黏附力均增大。同一浓度的TMC,随着季铵化程度的增加,其胶凝温度升高,胶凝强度和生物黏附力均减小。结论TMC季铵化程度及其不同浓度对液体栓剂的体外性质有着显著的影响,可以通过使用不同季铵化程度的TMC和改变其浓度来改善胰岛素液体栓剂的体外性质,可能更有效的促进胰岛素的直肠吸收。

羟基喜树碱包衣纳米脂质体的制备及体外释药研究

目的:进行羟基喜树碱氯化壳聚糖包衣纳米脂质体(Nanoliposome,N-liposome)的制备及体外释药考察,以提高包封率和稳定性.方法:采用薄膜分散法制备羟基喜树碱脂质体并用氯化壳聚糖包衣,经高压均质机多次乳匀得到纳米脂质体(＜100nm),用激光粒度分析仪测定其zeta电位、粒径大小及分布,用不同冻干保护剂进行冷冻干燥,用透析法考察药物体外释药性质.结果:包衣纳米脂质体zeta电位为+55.1mV,平均粒径(ZAve)为91.9 nm,粒径分布为20～120 nm;以15%(W/V)的海藻糖做冻干保护剂的脂质体冻干前后粒径变化最小,再水化后平均粒径为98.2 nm,包封率为(61.2±1.2)%(n=3);氯化壳聚糖包衣脂质体外释药曲线符合Higuchi方程(Q=0.055+0.0228t1/2).结论:本试验制备的羟基喜树碱包衣纳米脂质体具有包封率高,稳定性好,大小均匀,以及体外能显著延缓药物的释放的性质.

壳聚糖对泊洛沙姆液体栓剂基质影响的体外研究

目的考察壳聚糖对以泊洛沙姆(poloxamer)为基质的液体栓剂的物理化学性质的影响,为两者的配伍使用提供试验依据。方法将 5种不同浓度壳聚糖质量分数ω=0%、0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%合并泊洛沙姆溶液[P407和P188的质量分数分别为 15%和 19% ]作为液体栓剂的基质,测定不同质量分数壳聚糖对液体栓剂基质的胶凝温度、胶凝强度和生物黏附力的影响。结果当壳聚糖的质量分数从 0%上升至 0. 4%时,基质的胶凝温度依次为 27. 8、28. 0、28. 1、28. 4、28. 8℃;胶凝强度依次为 12、40、86、107、168s;生物黏附力值依次为 36. 9、50. 5、54. 7、62. 2、85. 6(×102dyne/cm2 )。说明随着壳聚糖浓度增高,泊洛沙姆液体栓剂基质的胶凝温度、胶凝强度和生物黏附力均逐渐升高。结论壳聚糖可改善以泊洛沙姆为基质的液体栓剂的物理化学性质,值得进一步研究。

莲心碱冻干粉针抗室性心律失常的药效学及一般药理学研究

目的:研究莲心碱冻干粉针抗室性心律失常的药理作用及一般药理学。方法:采用哇巴因、氯化钙抗心律失常模型,分别考察不同剂量组的莲心碱冻干粉针的抗室性心律失常作用;并通过实验考察其对血压、心电、呼吸及神经系统的影响。结果:莲心碱冻干粉针按1,2,3 mg·kg-1给药,均能显著提高哇巴因致豚鼠室性早搏(VE)、室性纤颤(VF)及心脏停搏(CA)时的用量,延长氯化钙(CaCl2)诱发大鼠心律失常出现的时间,缩短生存大鼠的窦性心律恢复时间,减少死亡率。3 种剂量的莲心碱冻干粉针均能降低大鼠收缩压和舒张压,减慢心律,延长QRS、QT间期,且对呼吸频率和深度及小鼠自主活动次数无明显影响。结论:莲心碱冻干粉针具有抗室性心律失常作用,且能降低血压,对大鼠呼吸、小鼠自主活动次数无明显影响。

莲心碱冻干粉针抗心律失常药效学研究

目的研究莲心碱冻干粉针抗心律失常的药效学。方法采用哇巴因、氯化钙、乌头碱、氯仿诱导心律失常动物模型 ,分别观察不同剂量组的莲心碱冻干粉针抗心律失常的作用。结果高、中、低剂量的莲心碱冻干粉针均能显著提高哇巴因和乌头碱致大鼠室性早搏 (VE)、室性纤颤 (VF)及心脏停搏 (CA)时的用量 ;延长氯化钙诱发大鼠心律失常出现的时间 ,缩短生存大鼠的窦性心律恢复时间 ,减少死亡率 ;降低氯仿所致小鼠室颤发生率 ,延长小鼠出现室颤的时间。

缬沙坦口服纳米骨架制剂的处方筛选及体外溶出评价考察

目的通过纳米骨架给药技术提高难溶性药物缬沙坦的体外溶出度。方法应用旋转蒸发法制备缬沙坦口服纳米骨架制剂,以溶出度为评价指标,用正交设计筛选处方,优化处方的纳米骨架制剂与市售制剂在不同pH介质中的体外溶出行为进行对比研究,并对优化处方进行形态学观察。结果筛选的优化处方为:Valsartan:Sylysia 350:Eudragit L100-55=1:2:2。与市售制剂相比,优化处方的纳米骨架制剂在pH=1.2、pH=4.5和水中有更好的溶出行为。结论纳米骨架制剂能够提高缬沙坦的体外溶出,具有一定的应用前景。

经口给予纳米骨架系统中载体荷电性对缬沙坦体外释放的影响

目的考察经口给予纳米骨架给药系统中载体的荷电性对荷电药物缬沙坦体外释放的影响,以期寻找到经口给予纳米骨架给药系统中荷电药物的释放规律。方法采用溶剂挥发法制备不同处方的口服纳米骨架给药系统,用桨板法测定药物释放度,应用X射线衍射法、扫描电镜法、透射电镜法和红外吸收光谱法对其进行表征。结果调节载体材料种类和比例可以控制药物释放速度和程度。当药物与载体带有相反电荷时,加入电解质使药物释放增加;当药物与载体带有相同电荷时,加入电解质使药物释放减少。结论药物与载体之间的电荷作用对经口给予纳米骨架系统中药物的体外释放行为具有重要的影响,可为制备荷电药物的经口给予纳米骨架系统提供参考。

海绵园林建筑中雨水循环系统应用案例分析

随着建设海绵城市理念的普及,越来越多的项目开始建造雨水循环再利用系统,如何将该系统更巧妙的与建筑融为一体,是建筑设计中值得探讨研究的问题。介绍一高端住宅小区在裙房屋面花园的人行道下方设置排水沟,排水沟中的雨水流至跌水井,排至地下1层的雨水收集池内,经过滤后由加压泵将水抽至室外各给水点供园林浇灌使用。

iRGD修饰的阿霉素主动靶向脂质体的细胞毒与抗肿瘤效果评价

本研究拟制备iRGD修饰的阿霉素主动靶向脂质体,对其理化性质、细胞毒和抗肿瘤效果进行评价,并与载阿霉素的被动靶向脂质体、RGD修饰的阿霉素主动靶向脂质体进行比较。首先将同时具有肿瘤细胞靶向和细胞穿透功能的iRGD肽以及RGD肽连接到DSPE-PEG-NHS上得到iRGD及RGD修饰的导向化合物DSPE-PEG-iRGD和DSPE-PEG-RGD;然后采用硫酸铵梯度法制备iRGD、RGD修饰的主动靶向脂质体和被动靶向脂质体;最后采用动态光散射测定不同脂质体的粒径,柱层析法测定其包封率,SRB法评价其细胞毒性,荷B16黑色素瘤的C57BL/6小鼠进行抑瘤效果的评价。结果表明,不同脂质体粒径在90～100 nm,包封率达到95%以上,制备重现性好;在细胞毒性方面,iRGD修饰的脂质体与被动靶向脂质体、RGD修饰的脂质体均无显著性差异;在抗肿瘤效果方面,iRGD修饰的脂质体与RGD修饰的脂质体对荷B16黑色素瘤的C57BL/6小鼠的抑制肿瘤生长效果显著强于被动靶向脂质体,但二者的抑瘤效果没有显著性差异。综上,iRGD修饰的阿霉素主动靶向脂质体,作为一种药物输送系统,在肿瘤治疗方面有一定的应用前景。

盐酸川芎嗪眼用温敏原位凝胶的制备及兔眼房水内药动学

目的:制备盐酸川芎嗪眼用温敏凝胶并探讨其在家兔眼房水内的药动学特征。方法:以泊洛沙姆为温敏材料,制备盐酸川芎嗪眼用温敏原位凝胶。分别于兔眼中滴入眼用凝胶50μl,采用高效液相色谱法测定给药后不同时间兔眼房水中的盐酸川芎嗪的浓度,绘制药-时曲线,利用DAS 2.0药动学软件计算相关药动学参数。结果:盐酸川芎嗪眼用温敏原位凝胶在兔眼内的吸收和消除过程呈线性二室模型动力学特征,其动力学方程为C=5.47×e-0.599 t+4.98×e-0.173 t-9.91×e-1.670 t,tmax为1.4 h,Cmax为4.732 mg·L-1,吸收相半衰期t1/2 a为0.420 h,分布相半衰期t1/2α为1.157 h,消除相半衰期t1/2β为4.006 h,药时曲线下的面积AUC为31.984 mg·h·L-1。结论:此方法可用于测定房水中盐酸川芎嗪的浓度,为盐酸川芎嗪眼用温敏凝胶的药动学研究提供评价方法。

FRET技术研究PEG-PCL胶束跨MDCK细胞单层转运的完整性

本文旨在研究聚乙二醇-聚ε-己内酯[poly(ethylene glycol)-co-poly(ε-caprolactone),PEG-PCL]胶束跨犬肾极性上皮细胞(madin-darby canine kidney,MDCK)单层转运后的完整性。通过化学键合的方法将异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate isomer I,FITC)连接于PEG-PCL上,制备荧光标记的载体材料PEG-PCLFITC,并采用荧光光谱法进行鉴定。采用薄膜水化法制备两种荧光标记的胶束:一种是同时物理包载荧光共振能量转移(F?rster resonance energy transfer,FRET)荧光对3,3'-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate(DiO)与1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate(Di I)的胶束(DiO-DiI-M);另一种是含有部分PEG-PCL-FITC载体材料并物理包载Di I的胶束(FITC-DiI-M)。采用动态光散射法测定胶束的粒径,荧光光谱法测定胶束在孵育介质中的稳定性。采用激光共聚焦扫描显微镜和FRET技术研究这两种荧光标记的胶束跨MDCK极性上皮细胞单层的完整性。结果表明,FITC与PEG-PCL被成功连接。DiO-DiI-M与FITC-DiI-M的粒径大小一致,均约为30 nm,多分散度良好,且两种胶束在4 h内可在孵育介质中以稳定形式存在,基本无释放。通过比较Transwell层和接收层的FRET效率和皮尔森共定位系数(Person’s coefficient)可知,1 h时,两种胶束的FRET效率与Person’s系数在Transwell层和接收层间基本不变,但4 h时,接收层FRET效率与Person’s系数明显下降,同时FITC-DiI-M下降的幅度大于DiO-DiI-M,说明1 h时胶束基本保持完整且能以完整形式从极性上皮细胞基底侧排出并被接收室中的细胞摄取,4 h时部分胶束已在与细胞单层相互作用的过程中被破坏,以完整形式跨膜的比例有所下降。

载香豆素6的PEG-PCL胶束跨MDCK极性上皮细胞的转运过程

本课题对聚乙二醇聚ε-己内酯[poly(ethyl ethylene phosphate)-co-poly(ε-caprolactone),PEG-PCL]胶束跨犬肾极性上皮细胞(Madin-Darby Canine Kidney,MDCK)的转运过程进行了研究。采用薄膜水化法制备载香豆素6(coumarin 6,C6)的PEG-PCL胶束,并采用激光粒度测定仪测定其粒径,芘荧光探针法测定其临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)。通过透射电镜、激光共聚焦扫描显微镜和荧光能量共振转移等方法研究了载C6的PEG-PCL胶束跨MDCK极性上皮细胞的转运过程。结果表明,PEG-PCL胶束的粒径约为30 nm,CMC为1.01μg·mL 1。PEG-PCL胶束以完整的形式被内吞进入细胞,经过细胞内转运过程将疏水性的模型药物C6从极性上皮细胞的基底侧排出,而PEG-PCL胶束本身很难以完整的形式跨膜。PEG-PCL胶束转运C6的过程是穿细胞途径,而非打开细胞紧密连接的细胞旁路途径。