汉防己甲素与5-溴汉防己甲素逆转耐药机制与降低MRP7表达水平有关(英文)

本研究的目的是探索汉防己甲素(Tet)与5-溴汉防己甲素(BrTet)逆转耐药的机制是否与调节多药耐药相关蛋白7(MRP7)表达水平有关。采用MTT法检测柔红霉素(DNR)对人白血病敏感细胞株K562与人白血病耐药细胞株K562/A02细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)及耐药倍数。将细胞分组,加入BrTet、Tet,用实时PCR法检测细胞MRP7 mRNA表达,Western bolt法检测细胞MRP7蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的表达,流式细胞术检测细胞内DNR蓄积。结果表明:K562/A02对DNR的耐药倍数为23.65倍。分别加入1μmol/L Tet与2.0μmol/L BrTet后,K562/A02细胞的MRP7 mRNA相对表达水平分别降低至2%和12%,MRP7蛋白表达降低了53.2%与83.7%,P-gp表达分别下调58.47%与52.20%;1.0μmol/L Tet与2.0μmol/L BrTet分别使K562/A02细胞内DNR提高了94.32%与271%。结论:BrTet与Tet均可逆转耐药,其逆转机制除了抑制P-gp的表达之外,还可能与抑制MRP7的表达,增加肿瘤细胞内抗肿瘤药物浓度有关。在相同摩尔浓度下,Tet与BrTet对MRP7表达的下调作用无显著性差异。

酪氨酸激酶抑制剂对CML患者Th1、Treg细胞的影响

目的:比较第二代酪氨酸激酶抑制剂(TKI)达沙替尼和尼洛替尼与第一代TKI伊马替尼对慢性髓系白血病(CML)患者的免疫调节作用。方法:对本中心使用达沙替尼(n=10)、尼洛替尼(n=26)或伊马替尼(n=44)治疗≥3个月的CML患者进行T细胞亚群等免疫指标的检测,并将上述指标与患者的临床疾病缓解状态及预后评估相关联分析。结果:达沙替尼、尼洛替尼和伊马替尼治疗的3组CML患者外周血Th1比例(Th1/CD4+T)高于正常值上限的例数分别为80.0%、16.6%和27.5%,其中达沙替尼组Th1比例值30.86%±9.75%显著高于尼罗替尼组17.37%±9.35%(P <0.001)和伊马替尼组20.79%±9.01%(P <0.001)。3组患者外周血CD8+T比例(CD8+T/Lymphocyte)各组无显著差异(P> 0.05), Th2比例(Th2/CD4+T)也无显著差异(P> 0.05)。Treg比例(Treg/CD4+T)达沙替尼组1.31%±0.10%显著低于尼洛替尼组2.65%±0.97%(P <0.001)和伊马替尼组2.99%±1.40%(P <0.001)。统计分析所有用药治疗后的患者:Th1比例高于正常上限25.8%的患者(n=28)中:84.62%为CCyR(完全细胞遗传学缓解),71.43%为MMR(主要分子生物学缓解),71.43%为MR4.5; Th1比例正常范围内11.8%-25.8%的患者(n=45)中:90.7%为CCyR,75.56%为MMR,75.56%为MR4.5;而Th1比例低于正常下限11.8%的患者(n=21)中:57.14%为CCyR,47.62%为MMR,47.62%为MR4.5。结果显示Th1升高组及正常组具有更高的缓解率及更深的缓解度。结论:本研究结果提示CML在TKI治疗中,Th1比例升高或正常提示更大的CCyR、MMR、MR4.5机率,而达沙替尼相比尼洛替尼及伊马替尼能显著提升患者Th1水平、降低Treg水平。

艾迪注射液联合V-DECP方案治疗复发难治多发性骨髓瘤临床研究

目的探讨艾迪注射液联合V-DECP方案治疗复发难治多发性骨髓瘤的临床疗效。方法选取医院2014年11月至2018年1月收治的患者76例,按随机数字表法分为对照组和观察组,各38例。两组患者均在支持治疗基础上采用V-DECP方案治疗,观察组患者加用艾迪注射液。两组患者均以4周为1个疗程,连续治疗3个疗程。结果观察组总有效率为68.42%,显著高于对照组的44.74%(P<0.05);治疗后,两组患者骨髓瘤细胞、β2微球蛋白(β2-MG)、M蛋白、CD8^+水平均较治疗前显著降低(P<0.05),血红蛋白(Hb)、CD4^+及CD4^+/CD8^+均较治疗前显著升高(P<0.05),且观察组改善幅度大于对照组(P<0.05);观察组与对照组不良反应发生率相当(81.58%比78.95%,P>0.05)。结论艾迪注射液联合V-DECP方案治疗复发难治多发性骨髓瘤,可提高患者的免疫功能。

慢性髓细胞白血病不同临床缓解状态下的T细胞亚群特点研究

目的探讨不同临床缓解状态下慢性髓细胞白血病(CML)患者T细胞亚群特点。方法 104例CML患者分为未缓解组(n=24),细胞遗传学缓解(CCyR)组(n=13),主要分子生物学缓解4. 5(MR4. 5)组(n=67),流式检测外周血CD8+T及CD4+T亚群Th1、Th2、Treg。结果未缓解组、CCyR组、MR4. 5组分别有62. 50%、15. 38%及15. 15%的患者Th1低于正常下限。未缓解组Th1降低率高于CCyR组及MR4. 5组,Th1平均值低于CCyR组及MR4. 5组(P <0. 05)。Treg、Th2及CD8+T三组间差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 CML患者良好的临床缓解状态表现出较高的Th1水平。

小剂量环磷酰胺预防异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的临床研究

目的评估小剂量环磷酰胺替代甲氨蝶呤的急性移植物抗宿主病（aGVHD）预防新方案的疗效及安全性。方法选择2013年1月至2015年5月于四川省人民医院血液科接受异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的75例血液系统疾病患者为研究对象，其中43例患者接受亲缘全相合allo—HSCT，32例接受亲缘单倍体相合atlo—HSCT。按照研究对象接受aGVHD预防方案不同分为，研究组（n=32，接受小剂量环磷酰胺联合环孢素A、吗替麦考酚酯的aGVHD预防新方案），对照组（n=43，接受甲氨蝶呤联合环孢素A、吗替麦考酚酯的aGVHD预防经典方案）。对2组患者的性别构成比、年龄、不同疾病种类构成比、不同allo～HSCT类型构成比、移植后中性粒细胞及血小板植活时间、aGVHD及慢性移植物抗宿主病（cGVHD）发生率、移植相关性口腔黏膜炎及出血性膀胱炎（HC）发生率、复发率、总体生存（OS）率等指标进行回顾性分析，并进行统计学比较。本研究遵循的程序符合四川省人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准，得到该委员会批准，征得患者知情同意，并签署知情同意书。结果①2组患者的性别构成比、年龄、不同疾病种类构成比、不同allo—HsCT类型构成比等一般临床资料分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。②全部患者接受allo—HSCT后均获得造血干细胞植入，均达到完全嵌合状态，并且获得造血重建。研究组患者中性粒细胞植活时间为（13．9±1．6）d，对照组患者为（14．6±1．2）d，二者相比，差异无统计学意义（t=0．559，P=0．606）；研究组患者血小板植活时间为（15．1±1．3）d，对照组患者为（17．2±1．4）d，二者相比，差异亦无统计学意义（t=1．512，P=0．374）。③2组中接受亲缘全相合allo-HSCT的患者，allo—HSCT后100d内Ⅰ～Ⅳ度aGVHD的累积发生率相比，差异无统计学意义（x^2=0．135，P=0．447）。其中，Ⅰ～Ⅱ度及Ⅲ～Ⅳ度aGVHD的发生率分别比较，差异均无统计学意义（x^2=0．157、0．254，P=0．776、1．328）。截至随访结束，2组中接受亲缘全相合allo—HSCT的患者局限型及广泛型cGVHD发生率分别比较，差异均无统计学意义（x^2=0．018、1．342，P=0．264、0．327）。2组中接受亲缘单倍体相合allo—HSCT的患者，allo—HSCT后100d内Ⅰ～Ⅳ度aGVHD的累积发生率相比，差异无统计学意义（x^2=1．316，P=0．283）；其中，Ⅰ～Ⅱ度及Ⅲ～Ⅳ度aGVHD的发生率分别比较，差异均无统计学意义（x^2=1．472、1．087，P=0．296、0．379）。截至随访结束，2组中接受亲缘单倍体相合allo—HSCT的患者局限型及广泛型cGVHD发生率分别比较，差异均无统计学意义（x^2=1．312、1．129，P=0．287、0．284）。④研究组患者接受allo—HSCT后，移植相关性口腔黏膜炎发生率为29．3％（9／32），低于对照组的75．6％（32／43），并且差异有统计学意义（x^2=7．26，P=0．008）。其中，研究组患者2～4级移植相关性口腔黏膜炎发生率仅为12．6％（4／32），而对照组患者为52．8％（23／43）。⑤2组患者接受allo—HScT后HC发生率相比，差异无统计学意义（x^2=0．596，P=0．142）。⑥截至随访结束，2组患者的复发率及OS率分别比较，差异均无统计学意义（x^2=1．317、0．115，P=0．281、0．734）。结论小剂量环磷酰胺替代甲氨蝶呤的aGVHD预防新方案，不仅具有与aGVHD预防经典方案相似的预防aGVHD作用，保证造血重建，并且可以显著减低移植相关性口腔黏膜炎的发生率，同时并未增高HC的发生率。allo—HSCT后小剂量环磷酰胺替代甲氨蝶呤的aGVHD预防新方案是否可以作为aGVHD预防经典方案的替代选择，则尚需多中心、大样本的随机对照试验进一步研究、证实。

泊马度胺对慢性粒细胞白血病患者单核细胞起源树突状细胞成熟的影响

目的:探索泊马度胺对慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者单核细胞起源树突状细胞(monocyte derived dendritic cells,moDCs)成熟/活性的影响。方法:分别采集长期服用伊马替尼(n=10)、尼洛替尼(n=10)和达沙替尼(n=9)治疗的CML患者外周血,体外诱导培养其中单核细胞形成树突状细胞(moDCs),该过程中给予10μmol·L^(-1)泊马度胺或等量药物溶媒处理。流式检测moDCs表面成熟/活性相关标志物CD40、CD83和HLA-DR的表达,流式液相多重蛋白定量技术检测细胞培养上清液中DC活性相关细胞因子IL-6和MIP-1α的分泌。结果:与对照组相比,泊马度胺分别显著提高了伊马替尼、尼洛替尼和达沙替尼治疗的CML患者moDCs上CD40、CD83和HLA-DR的表达比例(均为P<0.05)。分析整体29例CML患者moDCs,结果显示泊马度胺显著提高了DC活性相关细胞因子IL-6和MIP-1α的分泌浓度(均为P<0.05)。结论:10μmol·L^(-1)泊马度胺在体外可有效促进长期服用伊马替尼、尼洛替尼或达沙替尼治疗CML患者moDCs的成熟/活性,其有望作为DC佐剂应用于以DC为基础的免疫治疗策略中,如DC抗肿瘤疫苗及DC细胞治疗。

慢性髓细胞白血病患者Th1及CD8^+T淋巴细胞水平与疗效的相关性分析

目的分析慢性髓细胞白血病(CML)患者辅助性T淋巴细胞1(Th1)及CD8^+T淋巴细胞水平与临床疗效的关系。方法选取2018年2-12月于四川省人民医院确诊为CML的患者,采用流式细胞学技术检测患者外周血Th1比例(Th1/CD4^+T)及CD8^+T淋巴细胞比例(CD8^+T/Lymphocyte),并评估检测时相应缓解状态,进一步分组比较。结果初诊组(n=10)Th1低于正常下限的患者所占比例高于细胞遗传学完全缓解(CCyR)组(n=13)及分子学缓解4.5(MR4.5)组(n=67),差异均有统计学意义(P=0.01、0.00);初诊组Th1/CD4^+T亦低于CCyR组及MR4.5组,差异均有统计学意义(P=0.01、0.00)。进一步统计分析显示:Th1高CD8^+T高组患者(n=15)MR4.5率高于Th1高CD8^+T非高组(n=17),差异有统计学意义(P=0.03);而两组未缓解率比较,差异无统计学意义(P=0.74)。Th1高CD8^+T高组患者MR4.5率高于Th1低CD8^+T高组(n=10),未缓解率低于Th1低CD8^+T高组(均P=0.00)。结论治疗后良好的疗效表现为较初诊时显著升高的Th1水平,Th1/CD4^+T及CD8^+T/Lymphocyte均高于正常上限者显示出更高的缓解率与更深的缓解度。

多药耐药相关蛋白7及其抑制剂

多药耐药（MDR）的机制与转运蛋白有关，现在研究最多的为P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）1、乳腺癌耐药相关蛋白（BCRP）等的抑制剂。MRP7可介导对紫杉醇、长春新碱和长春碱等的耐药。MRtr7抑制剂近年研究主要包括千斤藤素、酪氨酸酶抑制剂、环孢素A等，MDR是多种机制共同作用的结果，对其他转运体的研究会提供更全面、更广泛的MDR逆转途径。

类脂囊泡在不同给药途径中的研究进展

纳米载体具有靶向递送药物至特定部位的潜力,因此纳米载体的开发一直受到广泛关注。近10年里,制备基于表面活性剂的纳米囊泡以改善药物递送,引起了研究者们的兴趣。类脂囊泡由非离子表面活性剂在水性介质中自组装形成,具有既能包裹亲水性化合物又能包裹亲脂性化合物的囊泡结构,广泛应用于各种给药途径。与脂质体相比,类脂囊泡不仅具有与其相似的优点,如既能装载亲水性药物又能装载亲脂性药物,而且类脂囊泡的制备方法更简单,制备原料价格更便宜,稳定性更好,克服了脂质体的主要缺点。本文综述了类脂囊泡各制备方法的优缺点及其在不同给药途径中的研究进展。

类脂囊泡载药系统递送生物药物的研究进展

生物药物如蛋白质核酸类药物生物稳定性差,在体内易受酸碱酶破坏。类脂囊泡作为一种新型药物载体具有许多优点,如生物可降解性良好、可改善生物药物的溶解度、保护生物药物免受酸碱酶破坏等,并能通过适当的载体修饰达到靶向效果,降低毒副作用。类脂囊泡递送系统在药物载体领域有广泛的应用及前景。本文对类脂囊泡递送生物药物的研究进展进行综述。