基于SPOC的完全线上病例讨论的教学设计

基于当前多种教学方式争鸣的教学时代,通过临床教学实践总结提出基于小规模限制性在线课程(small private online courses,SPOC)的完全线上病例讨论教学模式,该模式以学生为主体,以典型病例分析讨论为导向,教师须做好课程教学的策划、设计、组织、监督,以充分激发学生的学习兴趣,增强临床诊疗思维的培养,提升在线教育质量,总结线上医学教育经验。该模式打破了传统教学的时间空间限制,在大规模开放式在线课程(massive open online courses,MOOC)教学模式的基础上增加监管反馈设计,线上实现1对1、多对多双面交流教学,进而充分利用教育资源,提高教学效率。为将来外地住院医师规范化培训学生、基层医生的线上职业培训提供参考。

延边地区大白菜主要病虫害种类及绿色防控

大白菜是延边地区最喜爱的蔬菜之一,病虫害是影响其产量和质量的主要生物因素。现阶段延边地区危害大白菜生产的主要病虫害有8种,本文主要介绍其种类、发病症状和条件,并提出简要绿色防控措施,为大白菜生产者提供参考。

影响洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的因素研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为外植体,研究了蔗糖浓度、暗处理及取材时间对洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响,以期优化胚性愈伤组织的形成条件,为转基因提供良好受体并为建立高频再生体系奠定基础。结果表明:40g/L蔗糖及光培养最适合愈伤组织的诱导;50g/L蔗糖及暗培养最适合胚性愈伤组织的诱导,最适宜的取材时间为45d。

洋葱胚性愈伤组织的诱导及增殖条件的研究

[目的]探讨洋葱离体培养的最佳条件,为建立其高频再生体系及转基因研究奠定技术基础。[方法]以洋葱(Allium cepa L.)种子为外植体,对洋葱愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织获得及增殖的培养条件进行了初步研究。[结果]不同培养基种类对愈伤组织的诱导有影响,BDS优于MS和B5培养基;当培养基中24,-D浓度为0.5 mg/L时种子出愈率最高;适当降低生长素浓度,添加分裂素BA能够促进胚性愈伤组织的发生,且无分化现象产生,胚性愈伤组织诱导最佳培养基为BDS+24,-D 0.25 mg/L+BA 2.0 mg/L,增殖最佳培养基为BDS+24,-D 0.25 mg/L+BA 1.0 mg/L。[结论]该试验建立的基因转化受体系统为洋葱基因转化奠定了良好基础。

基于电流上升速率的柔性直流环网输电线路反时限保护

针对柔性直流环网远端高阻接地故障保护灵敏度低及相邻非故障线路干扰严重问题,提出一种基于电流上升速率的反时限保护方法。文中通过计算故障电流及其上升速率初始值,分析比较了故障线路和非故障线路的本质差异。采用滑动时窗使得到的电流上升速率最接近实际,并具有一定的抗干扰能力。应用反时限方法,通过设置较低的启动值,使得高阻故障时保护能够可靠延时动作,设置合适的瞬时动作值保障了较低过渡电阻情况下能够快速切除故障,方法的反时限特性排除了非故障线路和非故障极的干扰。最后,分析了线路分布电容对电流上升速率的影响,并提出了相应的修正方法。大量仿真实验表明,所提方法具有高灵敏性、选择性和可靠性,并具有强耐受过渡电阻能力。

基于CLC调谐半波长输电线路边界特性的纵联保护

当发生线路内部故障时,调谐电路与线路连接处线路侧测点采集的故障电流高频成分丰富;当发生线路外部故障时,线路侧测点采集的电流高频成分较小,借此特性构造一种基于调谐电路边界特性的半波长输电线路边界特性的方向元件。对于调谐电路,利用其无故障模型,将模拟电流波形进行比较匹配,若匹配成功,则说明调谐电路内部无故障,否则调谐电路内部有故障。将方向元件与调谐电路保护结合构成其纵联保护方案,此纵联保护无需双端数据同步。大量RTDS实时数模混合测试表明,该纵联保护方案全线长范围内有效,不受电流互感器饱和的影响,具有较好的鲁棒性。

无公害黄瓜温室栽培技术及病虫害防治

随着物质生活水平的提高,温室栽培已经成为市场上蔬菜供应,尤其是冬季蔬菜供应的主要途径。但如何在保证蔬菜有效供应的前提下,还能够确保食品安全则是当前社会关注的焦点。本文以无公害黄瓜温室栽培为例,对相关栽培技术以及病虫害防治措施进行探究。

洋葱胚性愈伤组织的诱导及胚状体萌发的研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为材料,研究Picloram浓度对愈伤组织诱导及BA和2,4-D浓度配比对胚性愈伤组织诱导的影响,同时为探明胚状体发生的条件,研究了GA3和ABA对胚状体发生的影响。研究结果表明,洋葱愈伤组织在Picloram浓度为1mg/L时出愈率最高,达到72.3%;MS培养基中添加2mg/L BA和0.25mg/L 2,4-D时促进胚性愈伤组织的诱导,诱导率(56.7%)显著高于其它处理;ABA浓度为0.5mg/L时胚状体萌发率(70.73%)最高且生长情况最好,但GA3对洋葱胚状体的萌发起抑制作用。

旋毛虫肌肉囊包内幼虫数量和囊包形态演化的观察

旋毛虫是一种人兽共患的寄生虫病，我国普遍存在，黑龙江省是重要流行区。旋毛虫成虫寄生于宿主的消化系统，幼虫寄生于肌肉系统，可导致包括人体在内的多种哺乳动物宿主感染旋毛虫病。一般认为，肌肉内囊包幼虫数目1～2条，多则6～7条，肌肉内幼虫囊包沿肌纤维平行走行呈梭形。

华支睾吸虫病患者血清中细胞间黏附分子水平及对肝功能的影响

目的了解华支睾吸虫病患者细胞间黏附分子(ICAM-1)水平的动态变化,探讨其与肝功能的关系。方法分别采集50例未经治疗的华支睾吸虫病患者和20位健康献血者(对照组)静脉血5 ml,检测血浆中总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)和谷氨酸转氨酶(ALT)含量,参照Child-Pugh肝功能分级法,根据肝功能受损程度,将华支睾吸虫病患者分成Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3组。采用双抗体夹心ELISA法,检测血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平。采用放射免疫分析法检测血清白细胞介素-4(IL-4)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。采用鲎三肽基质染色定量法检测血浆细菌脂多糖(LPS)水平。结果华支睾吸虫病患者血清或血浆中sICAM-1、LPS、IL-4、IL-6、TNF-α、TBIL和ALT的含量[分别为(729.34±75.67)μg/ml、(0.18±0.08)Eu/ml、(3.46±0.38)ng/ml、(223.48±46.90)pg/ml、(1.39±0.62)ng/ml、(15.45±10.81)μmol/L和(39.25±8.82)IU/L]明显高于对照组[(269.15±38.21)μg/ml、(0.07±0.03)Eu/ml、(0.74±0.22)ng/ml、(106.06±32.96)pg/ml、(0.56±0.14)ng/ml、(6.31±4.70)μmol/L和(18.43±9.81)IU/L](P<0.05或P<0.01),ALB含量[(28.35±5.38)g/L]明显低于对照组[39.43±7.91)g/L](P<0.05)。经相关性检验,患者血清sICAM-1含量与TBIL、ALT和LPS均呈正相关(r=0.662,P<0.01;r=0.514,P<0.01和r=0.499,P<0.01),与ALB呈负相关(r=-0.423,P<0.01)。而IL-4与肝功能参数无相关性(P>0.05)。按Child-Pugh分级,随肝功能受损程度加重,患者血清sICAM-1、LPS、IL-6和TNF-α含量依次递增,Ⅲ级组与Ⅰ级组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论华支睾吸虫病患者血清中sICAM-1、LPS、IL-6和TNF-α含量较高,共同参与介导了华支睾吸虫病肝损伤过程。

贯叶连翘的组织培养和金丝桃素的生产

以贯叶连翘种子为材料,对贯叶连翘组培苗进行生根培养,筛选和优化生根培养基,进一步在生物反应器内诱导培养不定根,并研究了蔗糖浓度、铵态氮/硝态氮配比以及MS培养基浓度对不定根中金丝桃素含量积累的影响。结果表明:贯叶连翘在3/4MS+IBA 2.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L(pH 5.8)培养基上的生根效果最佳;40 g/L的蔗糖有利于金丝桃素的积累,此时不定根中金丝桃素的含量最高、达0.94 mg/g;当铵态氮/硝态氮配比为30/30时,金丝桃素的含量和生产量达到最大,分别为0.98 mg/g和12.41 mg/L;不定根在不同浓度范围的MS培养基中均可生长,金丝桃素在2MS培养基上的生产量最大、为15.70 mg/L。

约氏疟原虫感染早期小鼠Treg/Th17比值的初步研究

目的 研究约氏疟原虫（Plasmodium yoelii）感染早期小鼠调节性T细胞（Treg）/辅助性T细胞17（Th17）比值变化。 方法 20只6～8周龄雌性BALB/c小鼠经腹腔注射1×106个约氏疟原虫17XL感染的红细胞，其中10只小鼠分别于感染前、后1 d注射1 mg CD25单克隆抗体（7D4），建立约氏疟原虫感染小鼠模型和Treg消除小鼠模型。于感染后1～7 d采小鼠尾静脉血，计数红细胞感染率，统计小鼠存活率。另取两模型组小鼠各10只，于感染前（0 d）、感染后3 d和5 d分别取3只小鼠脾组织，制备脾细胞悬液，流式细胞仪分别检测脾细胞中Treg和Th17数量占CD4＋ T细胞的百分比，计算Treg/Th17比值，分析Treg数量百分比与Th17数量百分比的相关性。 结果 约氏疟原虫17XL感染后2 d，感染组小鼠外周血中出现疟原虫感染的红细胞；感染后5 d，红细胞感染率上升至（49.8±4.7）%，小鼠存活率降至60.0%（6/10）；感染后6 d，小鼠全部死亡。Treg消除组小鼠也于感染后2 d外周血中出现疟原虫感染的红细胞，至感染后5 d红细胞感染率仅为（10.0±3.5）%，于感染后7 d上升至60.0%，感染后8 d小鼠全部死亡。感染后3 d，感染组小鼠Treg和Th17数量百分比分别为（11.1±1.3）%和（16.7±3.3）%，感染后5 d增加为（26.1±4.5）%和（19.6±2.6）%，均显著高于感染前［（5.0±0.7）%和（2.4±0.3）%］（P＜0.01）；感染后3 d和5 d 的Treg/Th17比值分别为0.7±0.1和1.3±0.4，均低于感染前（2.1±0.5）（P＜0.01，P＜0.05）；Treg消除组小鼠Treg和Th17数量于感染后3 d和5 d分别为（2.4±1.3）%、（4.3±2.9）%和（26.1±2.2）%、（6.5±2.1）%；Treg/Th17比值分别为0.1±0.1和0.7±0.4，均低于感染前（3.6±0.4）（P＜0.01）。相关性分析结果显示，Treg数量百分比与Th17数量百分比呈正相关（r=0.8166，P＜0.01）。 结论 约氏疟原虫17XL感染早期小鼠Tregs/Th17比值明显降低。

人参不定根生物反应器培养及其动态学研究

利用5 L气球型气升式生物反应器研究蔗糖和氧化锗浓度对不定根生长和人参皂苷合成的影响,结果表明,当MS+IBA 5 mg/L培养基中加入蔗糖50 g/L时,每个反应器可收获不定根34.5 g(干重),皂苷生产量达到61.1 mg/L,显著好于蔗糖30和70 g/L处理;培养基中加入氧化锗30或60μmol时,促进不定根鲜重的增加,干重和增殖率在60μmol时最好;不定根生长30 d后将60μmol的氧化锗加入培养基时,促进皂苷的合成,氧化锗处理12 d后皂苷含量由5.66 mg/g DW增加到10.8 mg/g DW.对反应器培养不定根生长、皂苷合成及培养基变化动态进行研究结果,不定根生物量(鲜重和干重)和皂苷生产量随着培养时间的延长而增加,培养30 d时生物量达到最高值,但培养时期继续延长时生物量则不再增加,而皂苷生产量却在40 d时最高。因此,为获得更多的皂苷,反应器不定根培养时期以40 d为最佳。培养基中糖浓度的变化与生物量的变化呈负相关;pH在培养初期呈下降趋势,以后随培养时间逐渐上升,培养结束时接近培养初期值.

急诊危重症病人动脉血气检测血钾的可靠性分析

[目的]比较床旁动脉血气分析和实验室检测方法检测血钾的差异,分析床旁动脉血气分析检测结果的可靠性,为急诊危重症病人及时有效急救提供参考。[方法]回顾性分析386例危重病人的临床资料,比较动脉血气分析结果中血钾值和实验室检测的血钾值。[结果]动脉血气分析血钾值低于实验室检测值,高钾血症时动脉血气分析血钾值高于实验室检测值,而在低钾血症和高钾血症情况下,两种检测方法差值大于血钾正常情况。[结论]床旁动脉血气测量血钾方便快捷,高钾血症时需要慎重对待检测结果。

疟疾感染过程中Tregs对DCs免疫功能的抑制作用与机理

目的探讨疟疾感染过程中调节性T细胞(Treg)对DCs免疫功能的抑制作用与机理。方法建立P.y17XL感染和Tregs消除BALB/c小鼠模型,计数红细胞感染率;感染后第0、3和5d制备脾细胞悬液,FACS检测脾脏中DCs亚群数量变化;DCs表面分子MHC-II、CD80和CD86的表达水平及分泌IL-10的DCs数量变化。结果与正常感染组小鼠相比,Tregs消除组小鼠于感染后第3dDCs亚群,MHC-II,CD80和CD86的表达均明显增加,感染后第5dDCs亚群数量、MHC-II和CD80表面分子的表达均明显减少;然而分泌IL-10的DCs数量于感染后第5d明显增加,是同天感染鼠的3.5倍。另外,我们采用两种anti-CD25mAb体内阻断Tregs,效果有着明显的差异。7D4能长期有效的阻断CD25表达,而PC61仅能短期内维持CD25低表达。结论 P.y17XL感染早期,BALB/c小鼠Tregs数量升高与DCs功能受损具有相关性。Tregs能抑制DCs的免疫功能,这一现象可能与Tregs调控DCs的亚群、表型和细胞因子分泌模式等方面有关。

春石斛根端染色体制片技术的优化

为优化春石斛染色体制片技术体系,以春石斛组培苗根为材料,研究根端长度、预处理方法和酸解时间对制片的影响,结果表明,春石斛根端染色体制片时取根尖长度为1.0cm,在8-羟基喹啉和饱和对二氯苯的混合液中预处理4h,用1mol/L的盐酸在常温(25℃)下解离18min时制片效果佳,染色体形态清楚,易于观察。

东北刺人参不定根提取工艺优化及其对酪氨酸酶活性的影响

为研究东北刺人参不定根不同提取条件对酪氨酸酶活性抑制的影响,筛选最佳的提取工艺,采用多巴色素法,以东北刺人参生物反应器培养的不定根为材料,比较甲醇、乙醇和水提取物对酪氨酸酶抑制活性的影响;利用L9(34)正交试验法研究了提取时间、提取温度、提取次数和料液比的影响,优化不定根乙醇提取条件。结果表明:不定根乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制率高于甲醇和水提物。正交试验结果发现,乙醇提取物的最佳提取工艺为提取时间1.5h,料液比1∶20,提取温度70℃,提取次数3次,在此条件下东北刺人参不定根提取物对酪氨酸酶活性的抑制率达到最高,为77.6%。

几种因素对白鹤芋组培苗增殖生长的影响

为寻找一种简单、低成本及可规模化生产模式,以白鹤芋组培苗单株(2cm)为外植体,研究不同培养方法、接种量、通气量和糖种类对白鹤芋组培苗生长的影响。结果表明:利用接触式生物反应器培养,有利于白鹤芋丛生芽增殖,组培苗叶色浓绿,鲜重和干重高于其它处理。同时,在接种量60个单株、通气量为0.3vvm的处理中达到最佳效果。为大规模培养节约成本,糖种类选择了白糖。

IL-10在Plasmodium yoelii 17XL和Plasmodium chabaudi AS疟原虫混合感染宿主病理损伤中的作用研究

为探讨IL-10在致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)和夏氏疟原虫(Plasmodiumchabaudi AS,P.cAS)混合感染宿主病理损伤中的作用,用P.y17XL、P.cAS和P.y17XL+P.cAS分别感染DBA/2小鼠,计数红细胞感染率;感染后第3、5、8、10、12和19天分别尾静脉取血,肝素抗凝后短暂离心,采用高纯度DNA提取试剂盒抽提DNA,实时定量PCR检测虫负荷水平;感染后第0、1、3、5、8、10、12和15天制备脾细胞悬液,ELISA检测脾细胞培养上清中IL-10水平。实验结果发现,P.y17XL单独感染和混合感染小鼠IL-10水平在感染后第5天和第8天分别达峰值,随后开始下降至正常水平,小鼠虫血症均达中等水平,存活率100%;相比P.cAS感染小鼠IL-10在感染后第3天突然出现高水平升高并且维持时间较长;于感染后第8天达峰值,是同天P.y17XL单独感染和混合感染小鼠IL-10水平的2倍,虫血症水平较高,小鼠全部死亡。同时实时定量PCR结果发现,混合感染小鼠,于感染后3～12 d P.y17XL增殖占优势,而感染后15～19 d则P.cAS增殖处于优势状态。表明以IL-10为核心的免疫调节网络与疟疾感染过程中病理损伤密切相关。同时提示混合感染小鼠应答模式与P.y17XL感染小鼠的应答模式相同。

冠状病毒HcoV-229E S1蛋白的原核表达及鉴定

目的克隆表达冠状病毒HcoV-229E S1基因片段,表达S1蛋白。方法合成冠状病毒HcoV-229ES1蛋白特异性基因片段并克隆入pET21a原核表达载体,转化BL21(DE3)菌,经IPTG高效诱导表达得到重组蛋白,用金属螯合亲和层析纯化,并通过Western blot对表达的重组蛋白进行鉴定。结果获得了主要以包涵体形式存在的目的蛋白,Western blot鉴定其为S1基因片段蛋白。结论成功构建了HcoV-229E S1蛋白的表达载体,并在BL21(DE3)中得到了高效表达,为下一步表达蛋白免疫原性及疫苗抗病毒保护性测定打下了基础。