人体骨组织数值与形态特点

目的 :研究确立骨组织数据的基准参照点,为医学、生物学和人类学等相关研究提供参考。方法 :利用昆明市区10例,汉族、30岁±1岁男性的正常额骨和股骨新鲜解剖学教学标本作为研究材料,制作骨磨片。获取额骨鳞部垂直位、水平位骨磨片和股骨中段水平位骨磨片。在光学显微镜下,观察骨组织的类型和各自的细胞数量(代表骨组织所占百分比例);并测量骨细胞的长径、宽径和厚径。分别直接测量与应用生物力学测量仪测量“额鳞中部”新鲜骨、脱脂脱水骨和煅烧骨的密度与抗压强度。结果 :额骨鳞部骨组织分为编织骨(62.0%)、板层骨(28.8%)和束状骨(9.2%)3种类型;骨细胞亦呈扁椭圆形,但体积大于股骨骨细胞;其中编织骨骨细胞椭圆面平行于颅骨表面。股骨中份骨组织分为骨单位(68.5%)、间骨板(27.3%)和环骨板(4.2%)3种类型;股骨多数骨细胞长径与骨单位中央管平行。“额鳞中部”新鲜骨、脱脂脱水骨和煅烧骨的密度与抗压强度的相关系数为0.6074。结论 :获得一特定人群中额骨与股骨的骨细胞的方向和径值、骨组织的类型和占比,确立了骨组织结构数据的一个基准参照点。额鳞中部骨的密度与抗压强度呈线性正相关关系。

建立大鼠颞下颌关节骨关节炎动物模型的2种方法比较

目的 通过被动张口和咬合紊乱2种方法建立大鼠颞下颌关节骨关节炎的模型,观察软骨和软骨下骨的病理变化来比较2种建模方法并评价其实用性。方法 21只8周龄雄性SD大鼠随机分为4组,对照组(Control组)3只大鼠常规饲养。剩余18只大鼠随机分成3组:被动张口组(OP组),每天保持张口度20 mm,持续1 min;咬合紊乱组(OD组),0.25 mm的结扎丝包绕第一磨牙,结扎在第一磨牙的面;咬合紊乱对照组(ODS组)采用同样的手术方法,结扎结在第一磨牙的近中。4周后处死所有大鼠,解剖下颌骨后,通过MicroCT,番红-O-固绿染色,HE染色来评估颞下颌关节的变化。结果 OD组和OP组均出现了颞下颌关节骨关节炎样组织学改变,Micro CT分析都表现出骨体积分数的下降,骨体积比和骨小梁厚度在OD组与OP组的差异无统计学意义(P> 0.05)。OD组和OP组的改良Mankin评分均增高,但差异无统计学意义(P> 0.05),且OP组中有2个样本未出现颞下颌关节骨关节炎样组织学改变。结论 咬合紊乱为较为稳定的大鼠颞下颌关节骨关节炎的建模方法,被动张口能造成大鼠颞下颌关节骨关节炎的组织病理学表现,但不稳定且效率较低。

凉血活血中药含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的以血清药理学方法观察凉血活血中药对人脐静脉内皮细胞(ECV304)增殖的影响,从体外实验角度研究,为临床对新生血管类眼病的治疗寻找相应的干预靶点.方法设立空白血清组对照应用MTT法检测不同浓度的凉血活血含药血清对血管内皮细胞ECV304细胞毒性考察及增殖影响,并检测VEGF含量的变化.结果 20%浓度凉血活血含药血清组既可抑制细胞增殖又对细胞无毒性作用.结论凉血活血中药抑制血管新生可能与其通过抑制ECV304细胞增殖及降低VEGF的表达有关.

SOX9在SD大鼠胚胎发育髁突软骨与胫骨生长板软骨中的时间表达研究

目的通过建立SD大鼠的发育模型,观察髁突软骨与胫骨生长板软骨在胚胎发育过程中的不同生长特性,探讨比较SOX9在2种不同性质软骨生长发育过程中的表达变化及其意义。方法30只成年SD大鼠按2雌1雄的比例合笼,观察雌鼠于合笼后是否发现阴栓作为怀孕的标志,计为妊娠0 d,隔离常规饲养。分别于孕鼠妊娠13 d、14 d、15 d、16 d、17 d、18 d、19 d、20 d、21 d剖腹取出胎鼠(embryo,E),连续切片获得E13 d~E21 d的髁突软骨和胫骨生长板软骨不同发育时间的切片标本。利用HE染色、免疫组织化学方法观察2种软骨胚胎发育中的组织学结构特点并检测SOX9在两种软骨胚胎发育中的表达变化。采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析和两独立样本t检验。结果E14 d~E21 d,髁突软骨和胫骨生长板软骨的HE染色观察发现其组织学形态结构存在显著差异;免疫组化染色结果显示,E15 d、E17 d、E20 d胎鼠胫骨生长板软骨SOX9阳性表达强于髁突软骨,有统计学意义(P<0.05)。2种软骨组织中SOX9阳性细胞的分布规律基本一致,且均多位于增殖层。结论髁突软骨和胫骨生长板软骨组织结构具有相似的胚胎发育,其差异主要表现为细胞分层排列的方式,而早期胚胎发育相关基因SOX9在髁突软骨、胫骨生长板软骨中均有表达,呈现一定的时空变化,提示SOX9与2种软骨细胞的分化和软骨发育密切相关。

β趋化因子MCP-1、MIP-1α、RANTES在皮肌炎患者肌肉、皮损中表达的相关性研究

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1);巨噬细胞炎性蛋白-lα(MIP-1α);调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)在皮肌炎患者皮损和肌肉组织的表达,探讨MCP-1、MIP-1α、RANTES与皮肌炎的相关性。方法所有病例均符合1975年Bohan and Peter提出的皮肌炎诊断标准(即B/P标准)。采用免疫组织化学法测定皮肌炎患者及正常对照组的肌肉及皮损组织中MCP-1、MIP-1α、RANTES的表达水平,对结果进行统计分析。结果①皮肌炎肌肉及皮损中MCP-1在炎性细胞表达率分别为65.4%、42.3%,与正常对照组比较均有显著差异(P<0.05);②皮肌炎皮损中MIP-1α、RAN-TES在真皮炎性细胞表达率均为42.3%,与正常对照组有显著差异(P<0.05),而在皮肌炎肌肉组织炎性细胞表达率分别为38.5%、15.4%,与正常对照比较均无显著差异(P>0.05)。结论①在皮肌炎皮损炎性反应中,MCP-1、MIP-1α和RANTES均可能参与反应;②在皮肌炎肌肉损伤炎性反应中,仅MCP-1参与,而MIP-1α和RANTES无明显影响。

黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤中FUS-CHOP融合基因和MDM_2蛋白的表达及意义

目的探讨FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白在黏液样/圆细胞型脂肪肉瘤(MRCLs)组织中的表达及意义。方法收集MRCLs标本25例。以非MRCLs的脂肪肉瘤及其它软组织肿瘤共18例作对照组。用嵌套式RT-PCR的方法检测FUS-CHOP融合基因mRNA并经和DNA测序证实,以β-actin基因作为内对照。用免疫组化S-P法检测25例MRCLs中MDM2蛋白表达情况。结果MRCLs组和对照组β-actin阳性率分别为72.0%(18/25)和66.7%(12/18)。25例MRCLs中15例检出型FUS-CHOP融合基因表达,阳性率为(60.0%),去除β-actin阴性病例的阳性率为83.3%(15/18)。对照组18例标本未检出FUS-CHOP融合基因。MRCLs中MDM2蛋白阳性表达率为56.0%(14/25),在圆细胞为主的病例组阳性表达率最高,差异有显著性。FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白表达无相关性。结论(1)MRCLs中FUS-CHOP融合基因与MDM2蛋白的表达无相关性。(2)FUS-CHOP融合基因在MRCLs中呈特异性表达,可作为该肿瘤的特异性标志物用于诊断。(3)MDM2蛋白过表达与MRCLs的进展相关。

干扰肿瘤相关巨噬细胞的P2X4受体表达可抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭

目的研究P2X4受体在小鼠胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响及分子机制。方法将16只健康C57BL/6小鼠随机分为肿瘤组、对照组(8只/组),利用小鼠胶质瘤GL261细胞接种于小鼠大脑尾状核,建立小鼠脑胶质瘤模型。术后第21天处死小鼠,取荷瘤小鼠及正常小鼠脑组织,采用HE染色观察小鼠胶质瘤形态,利用免疫荧光检测Iba-1、P2X4受体的表达情况;应用GL261条件培养基将RAW264.7细胞诱导为TAMs,采用RT-qPCR检测巨噬细胞极化相关标志物及P2X4受体在TAMs的mRNA表达情况;采用Westernblot检测P2X4受体在TAMs的蛋白表达情况;采用siRNA P2X4,下调TAMs中P2X4受体的蛋白表达,RT-qPCR、Westernblot检测siRNA P2X4转染后TAMs中IL-1β、IL-18的mRNA及蛋白表达;利用transwell侵袭及迁移实验检测siRNA P2X4转染后TAMs对GL261细胞侵袭迁移能力的影响。结果与对照组相比,荷瘤小鼠脑胶质瘤组织中有较高数量的Iba-1阳性细胞(P<0.0001),且P2X4受体在Iba-1阳性细胞中的表达增高(P=0.001);使用GL261条件培养基刺激RAW264.7细胞转化为TAMs后,M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调(P=0.0001、0.001),M1型巨噬细胞标志基因iNOS、TNF-α表达也上调(P=0.006、0.001),但以M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调更为显著,同时TAMs中P2X4受体蛋白表达水平及mRNA水平均增高(P=0.005、0.014)。干扰TAMs中P2X4受体表达引起其IL-1β、IL-18的mRNA(P<0.01)及蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05)降低,并抑制TAMs促进胶质瘤细胞侵袭和迁移的能力(P=0.004、0.017)。结论降低肿瘤相关巨噬细胞P2X4受体表达可能通过IL-1β、IL-18影响胶质瘤细胞的迁移和侵袭。

中医药抑制脉络膜新生血管的研究进展

脉络膜新生血管类疾病可造成患者视力不可逆性损害,是世界公认的难治性眼底疾病之一,检索阅读相关文献,发现近年来中医药对抑制脉络膜新生血管在实验研究、临床取得了一定的进展,对此进行了综述。

VEGF siRNA联合凉血通络方治疗脉络膜新生血管的实验研究

目的研究VEGF siRNA联合凉血通络方对脉络膜新生血管(CNV)的治疗作用。方法 90只棕色挪威(BN)大鼠,右眼通过激光光凝方式建立CNV模型,随机分为空白对照组、VEGF siRNA组、联合用药组(VEGF siRNA+中药),每组30只。3组分别在光凝后第14 d行荧光素眼底血管造影检查(FFA)、眼球标本行组织病理切片光镜观察、蛋白印记检测、实时荧光定量PCR检测。结果 FFA:VEGF siRNA组及联合用药组在光凝后14 d,荧光素渗漏面积减少,与空白对照组相比差异均具有统计学意义(VEGF siRNA组t=2.627,P=0.014;联合用药组t=5.361,P=0.000),且联合用药组荧光渗漏面积小于VEGF siRNA组,差异具有统计学意义(t=2.733,P=0.011);HE染色:CNV最大中央厚度与FFA检查趋势一致。蛋白印记检测:光凝后14 d,VEGF siRNA组、联合用药组VEGF蛋白表达程度均较空白对照组表达减弱,差异有统计学意义(VEGF siRNA组t=2.495,P=0.019;联合用药组t=5.242, P=0.000),联合用药组VEGF蛋白表达低于VEGF siRNA组,差异有统计学意义(t=2.747,P=0.011)。光凝后14 d,VEGF siRNA组PEDF蛋白表达程度与对空白照组比较无明显差异(t=-1.847,P=0.076),联合用药组PEDF蛋白表达程度较空白对照组增强,差异存在统计学差异(t=-11.11,P=0.000)。实时荧光定量PCR检测与蛋白印记检测趋势一致。结论 VEGF siRNA联合凉血通络方能有效抑制脉络膜新生血管生长,可为CNV的治疗提供了新思路。

颈部肌力失衡对年青大鼠髁突生长发育的影响

目的探讨颈部肌力失衡是否会影响髁突的发育.方法 18只4周龄SD大鼠,分为手术侧组(去除部分胸锁乳突肌)、对侧组及空白对照组.于术后1,3,5周处死,组织学观察髁突形态变化,免疫组化及TUNEL观察软骨细胞增殖与凋亡情况.结果 PCNA阳性细胞术后3周,肥大层阳性细胞数手术侧与非手术侧及空白组有差异.凋亡细胞数不同时间点及不同组数未见到显著性差异.结论颈部肌力失衡在一定程度内对髁突软骨细胞增殖有影响,但对髁突的发育影响不明显.

瓷层厚度和变色基底对瓷贴面修复四环素牙光学性能的影响

目的分析不同瓷层厚度和变色基底对瓷贴面修复四环素牙的色彩学性能和半透性的影响。方法用粉浆涂塑烧结法制作瓷试件:体瓷/遮色瓷厚度分别为0.40 mm/0.10 mm、0.30 mm/0.20 mm、0.65 mm/0.10 mm和0.55 mm/ 0.20 mm。利用分光光度计测量试件在模拟四环素牙背景及黑白背景下的L*、a*、b*值,计算试件在模拟四环素牙背景上与背景颜色的色差ΔE001,与试件在白背景上色差ΔE002以及试件的半透性TP值。结果 1)除黄色基底外,其余基底上总厚度0.75 mm的2组色差ΔE001显著大于0.50 mm组,差异有统计学意义(P<0.01)。2)不同背景下,不同厚度瓷试件的色差ΔE002均<1.25,且差异无统计学意义(P>0.01)。3)不同厚度瓷试件TP值均<1,且差异无统计学意义(P>0.01)。结论对于偏黄、偏红和偏灰的四环素牙,选用0.50 mm厚IPS d.SIGN瓷贴面(0.10 mm的遮色瓷与0.40 mm的体瓷)可实现目标色的良好匹配,但其通透性与天然牙相比较差。

纯钛基底和多次烧结对遮色瓷颜色的影响

目的 研究纯钛基底和多次烧结对3种遮色瓷颜色的影响。方法 制作A1、A3、B1色Ti-22,DuceratinKiss和自制GG遮色瓷的钛瓷试件及遮色瓷烧结体。采用色差计测量色度值L*a*b*并计算钛瓷试件与遮色瓷烧结体的色差,以及钛瓷试件多次烧结后与第一次的色差。利用SPSS17.0软件包对色差进行统计分析。结果 DuceratinKiss熔附纯钛基底后色差值均大于临床可接受阈值,且显著大于其余2种遮色瓷(P<0.05)。DuceratinKiss钛瓷试件多次烧结后色差Eab*最小;Ti-22钛瓷试件的色差较大;GG钛瓷试件色差位于上述两者之间。结论 纯钛基底对遮色瓷颜色的影响与瓷粉种类和色号有关。多次烧结后Ti-22遮色瓷色差变化大于临床可接受阈值。

下颌骨三维有限元模型分析模拟咬合创伤对髁突的力学影响

目的建立下颌骨的三维有限元模型,模拟可导致咬合创伤的异常咬合力,研究对髁突力学影响及位移变化,为临床研究TMD与咬合创伤提供实验证据.方法选咬合关系正常的男性志愿者,CBCT扫描后得到DICOM数据,髁突顶作约束设计,经划分网格生成有限元模型.工况一:左侧下颌第1磨牙不咬合接触面垂直加载不同负荷;工况二在同一模型上设计颊侧方向不同负荷,研究不同工况下左侧髁突处应力分布变化的规律.结果建立了下颌骨的三维有限元模型,随着载荷的成倍数增加,髁突受力范围一致,但张力和应力也成倍数增加.然后模拟咬合创伤条件下相同牙位施加相同载荷后,应力较垂直负荷时变大,髁突位移距离也增加,结论形成咬合创伤的异常咬合力,可影响髁突的力学传导,导致髁突的病理性改变.

咬合创伤对大鼠髁突生长发育影响的实验研究

目的探讨咬合创伤是否会影响髁突的发育.方法采用4周龄SD大鼠18只,随机分为2组,实验组在左侧上颌磨牙粘结直径为1 mm的钢丝,对照组不做处理,于1,3,5周处死大鼠,取实验组双侧及对照组左侧髁突做组织切片.组织学观察髁突形态变化,免疫组化和TUNEL检测髁突形态及软骨细胞增殖和凋亡情况.结果组织学显示1,3,5周实验组双侧关节与对照组无明显差异.免疫组化和TUNEL显示1,5周时,实验组创伤侧与非创伤侧及对照组软骨细胞增殖与凋亡差异无统计学意义(P>0.05);3周时,创伤侧软骨细胞增殖数减少,与非创伤侧及对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).创伤侧软骨细胞凋亡数增加,与非创伤侧及对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论一侧咬合创伤对同侧髁突从形态上没有明显影响,但在细胞生长方面有一定影响,提示一定程度的咬合创伤不足以对生长发育期的髁突产生明显的影响.