应用QF-PCR和CNV-seq以及染色体核型分析检测羊水的染色体畸变及结果分析

目的评价定量荧光PCR(QF-PCR)在染色体畸变中诊断的准确性,探讨QF-PCR、基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)和染色体核型分析(核型分析)这3种技术在染色体畸变的产前诊断中的应用价值以及多方法联合诊断的优势和必要性。方法采用QF-PCR检测106例产前筛查高风险孕妇的产前羊水的染色体畸变,同时使用CNV-seq(102例)及核型分析(4例)检测;统计QF-PCR与后两者之间的阳性符合率。结果在21、18、13、X、Y共5种染色体非整倍体检测方面,QF-PCR与CNV-seq及核型分析的阳性符合率均为100%。对于所有46条染色体畸变的检测,CNV-seq阳性但QF-PCR无法检出的共21例,其中20例微缺失或微重复均小于5 Mb,核型分析可能均无法检出。结论QF-PCR对5种染色体非整倍体的检测具有很高的准确性。QF-PCR结合CNV-seq,相互补充和印证,快速且覆盖面广,具有部分替代核型分析的潜力;多方法联合诊断对染色体畸变的检出具有很大的优势和必要性。

基于质谱测定小分子与Aβ亲和力的受体结合分析方法的建立和验证

建立基于质谱的受体结合分析方法(MSBA),测定小分子探针与淀粉样蛋白-β(Aβ)聚集体的亲和力。针对阳性探针IMPY及其氘代产物IMPY-D6建立液相色谱-质谱(LC-MS)联用方法和定量方法,随后进行基于质谱的饱和结合实验及竞争结合实验,最后将结果与文献中放射性受体结合实验结果进行比较。成功建立了IMPY的LC-MS方法及基于质谱的受体结合测定方法。其中,饱和结合实验中IMPY与Aβ1-40及Aβ1-42的Kd分别为(3.80±0.39) nmol/L和(18.38±1.11) nmol/L。竞争结合实验中IMPY与Aβ1-40及Aβ1-42的Ki分别为(18.64±0.76) nmol/L和(25.44±2.38) nmol/L。均与文献中放射性受体结合实验结果基本一致。MSBA作为一种非放射性结合实验方法,测定结果与放射性受体结合实验基本一致,可用于小分子探针与Aβ的亲和力的测定,该技术平台可拓展至用于常规小分子配体与受体亲和力的测定。