JTE-013介导RhoA/ROCK1/Drp1信号轴调控线粒体损伤和凋亡缓解过敏性鼻炎

目的探究JTE-013通过RhoA/ROCK1/Drp1通路调控线粒体损伤和凋亡对过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)保护作用及机制。方法用卵清蛋白(OVA)建立小鼠AR模型。造模结束后,记录揉鼻、打喷嚏的次数。然后鼻组织切片进行HE、TUNEL和DHE染色。在体外,通过人重组白细胞介素-13(IL-13)刺激人鼻黏膜上皮细胞(HNEpCs),Western blot法检测JTE-013和Y27632对RhoA、ROCK1、Drp1及其相关磷酸化的蛋白和细胞凋亡相关蛋白表达影响。免疫荧光观察JTE-013和Y27632对细胞总ROS、线粒体膜电位和线粒体ROS生成,Drp1易位情况以及Cyt-c的表达情况。结果JTE-013减少了AR小鼠的揉鼻和打喷嚏频率,减轻鼻黏膜增厚并降低嗜酸细胞浸润。TUNEL和DHE染色结果提示,JTE-013可以抑制小鼠鼻上皮细胞凋亡并减少ROS表达。Western blot结果表明,JTE-013和Y27632都能明显降低RhoA、ROCK1、Drp1及p-Drp1(616),抑制凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、Cyt-c、cleaved-caspase-9表达并上调了p-Drp1(637)、Bcl-2表达。免疫荧光显示JTE-013或ROCK1的抑制剂几乎阻断了IL-13介导鼻黏膜上皮细胞ROS和mtROS生成增加、抑制了线粒体膜电位降低,阻滞了Cyt-c表达和Drp1易位。结论JTE-013能够通过抑制RhoA/ROCK1/Drp1信号轴调节线粒体的形态和功能,从而缓解AR小鼠鼻黏膜上皮细胞炎症。