晚清书画裱件一株霉菌的鉴定及培养条件优化

对晚清书画裱件菌斑菌株复苏分离鉴定及培养条件优化.以改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基、萨氏培养基和查氏培养基作为复苏培养基.采用三点植入法和插片法对菌株形态学观察,通过PCR扩增、测序、构建系统发育树对菌株进行分子生物学鉴定.结果成功复苏一株霉菌,菌株鉴定为篮状菌属,最佳培养条件为改良后PDA培养基,培养温度30℃,pH 6.0,震荡频率130 r/min.

纸质文物上一株交链孢霉生物学鉴定及其培养条件的优化

目的:对带有“霉斑”的纸质文物上的霉菌进行分离鉴定并优化其培养条件。方法:通过形态学观察(三点植入法、镜下显微结构观察法)与分子生物学18S rDNA ITS序列扩增相结合对纸质文物上霉菌进行鉴定,采用单因素分析及正交试验对霉菌培养条件进行优化。结果:两种方法的鉴定结果均显示该菌株为链格孢霉菌(Alternaria eichhorniae),其培养最佳条件为28℃,pH 5.5,摇床震荡频率125 r/min。结论:确定该菌为链格孢霉菌(Alternaria eichhorniae),其培养条件实验室较易达到,为下一步纸制文物上的霉斑成份分析及生物法清洗霉斑的研究奠定基础,并为纸质文物上霉菌防治提供科学依据。

高盐胁迫及甜菜碱干预对同型半胱氨酸代谢的影响及机制

目的:研究高盐、甜菜碱对同型半胱氨酸代谢的影响并探讨其机制。方法:50只昆明小鼠随机分为对照组(0.5%Na Cl饲料)、高盐组(8%Na Cl饲料)和干预组(8%Na Cl饲料+2%betaine饮水)喂养8周,比较各组血清渗透压、Hcy、Glu指标数值变化。H4IIE细胞分为空白对照组、高盐组(50 mmol/L Na Cl)、干预组(50 mmol/L Na Cl+1%甜菜碱)和干预对照组(1%甜菜碱),细胞密度达80%时收集细胞,Western blot检测BHMT表达量。结果:与对照组相比,高盐组血清渗透压、Hcy、Glu显著升高(P<0.05),BHMT表达量显著下降(P<0.05),干预组无差异(P>0.05);与高盐组相比,干预组血清渗透压、Hcy、Glu显著降低(P<0.05),BHMT表达量显著升高(P<0.05)。结论:高盐胁迫降低BHMT表达量,升高血清Hcy、Glu水平,甜菜碱能显著改善高盐胁迫对Hcy代谢的影响。

TAT-Apoptin蛋白制备及其诱导BGC-823细胞的凋亡作用

为了制备单一组分TAT-Apoptin融合蛋白,检测其跨膜及凋亡活性.利用IPTG诱导目的质粒p GEX-6p-1-TAT-Apoptipn及对照质粒p GEX-6p-1-TAT-EGFP和p GEX-6p-1-TAT-Apoptin-EGFP可溶性表达,纯化蛋白并孵育BGC-823细胞,荧光显微镜、DNA ladder、流式细胞术检测融合蛋白跨膜及凋亡活性.结果表明,成功诱导融合蛋白表达,获得单一蛋白,荧光显微镜检测TAT将融合蛋白带入细胞内且不影响其活性,TAT-Apoptin融合蛋白处理BGC-823细胞36和48 h时后出现典型DNA Ladder条带,流式细胞术检测早期凋亡率48 h为61.5%,在24～48 h范围内凋亡率增加.结论为制备的TAT-Apoptin蛋白可跨膜诱导BGC-823细胞凋亡,且具有较高活性.