淫羊藿素通过调控铁死亡增加鼻咽癌细胞的放射敏感性

目的探索淫羊藿素对鼻咽癌细胞放射增敏作用以及机制。方法通过MTT实验和克隆形成实验,观察淫羊藿素对鼻咽癌HONE1和HNE1细胞增殖能力的影响,筛选出给药剂量以及照射剂量。建立鼻咽癌细胞γ射线照射模型以及淫羊藿素给药模型,将细胞分为空白组、淫羊藿素组、照射组和淫羊藿素与照射联合组。通过流式细胞术检测4组细胞活性氧(ROS)的变化、周期分布以及细胞凋亡情况,通过Westernblot实验检测DNA损伤标志蛋白γ-H2AX、周期相关蛋白CDC25C、p-CDC25C、和CyclinB1以及铁死亡标志蛋白ACSL4和GXP4的表达情况。构建HONE1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察淫羊藿素与放射联合对肿瘤组织的生长情况的影响。结果淫羊藿素以剂量依赖性方式抑制鼻咽癌细胞活力,增强放射对鼻咽癌细胞增殖能力的抑制作用。流式细胞术及Westernblot实验显示,淫羊藿素与放射联合后促进鼻咽癌细胞ROS增多,γ-H2AX表达上调(P<0.001)。与单纯照射组相比,联合组会使鼻咽癌细胞发生G2期阻滞,CDC25C和CyclinB1表达下调,p-CDC25C表达上调(P<0.01)。联合组会促进鼻咽癌细胞发生细胞凋亡,铁死亡蛋白ACSL4表达上调而GXP4表达下调(P<0.001)。与空白组相比,其余3组的肿瘤生长速度明显减慢。与照射组相比,联合组肿瘤生长速度减慢,瘤体重量下降(P<0.001)。结论淫羊藿素可在体内、体外均增强鼻咽癌对放射的敏感性,可能主要是通过增强细胞活性氧促进鼻咽癌细胞发生铁死亡来达到放射增敏的作用。