犊牛腹泻的病因及中草药治疗研究进展

犊牛腹泻是影响犊牛生长发育的主要疾病之一。造成犊牛腹泻的因素有细菌、病毒、寄生虫性腹泻及非感染因素。细菌性腹泻是犊牛临床常见的腹泻原因之一,其发生机制主要是细菌进入肠道后大量增殖,破坏肠道菌群的平衡,进而对犊牛的肠黏膜屏障造成严重破坏。中草药具有调节机体肠道菌群、增强免疫功能、降低犊牛腹泻率等作用。文章对犊牛腹泻的病因及其中草药治疗研究进展进行综述,为中草药临床治疗犊牛腹泻的应用提供参考。

冷应激对奶牛的影响及其防控措施

奶牛冬季冷应激问题已经成为影响畜牧业健康发展的重要问题之一。冷应激会导致奶牛采食量降低,产奶量和生产繁殖性能下降,严重影响奶牛养殖户的经济效益。内蒙古地处寒冷地区,动物长期处于寒冷环境,受冷应激影响较为常见。为了更具体地了解冷应激对奶牛生产性能的影响,文章综述了冷应激对奶牛的行为、产奶量、神经内分泌、生化指标、免疫、抗氧化功能、肠道菌群等方面的影响,总结了目前预防奶牛冷应激有效的防控措施,以期为奶牛冷应激预防及缓解工作的进一步研究提供参考。

中药催情散的急性和亚慢性毒性研究

【目的】研究中药催情散对小鼠的急性毒性和对大鼠的亚慢性毒性,为催情散在奶牛持久黄体治疗中的应用提供参考。【方法】制备1g/mL(以生药计)的催情散药液,选取60只小鼠,随机分为6组,其中5个急性毒性试验组分别按20 000,16 000,12 800,10 240和8 192mg/kg剂量一次性灌服催情散药液,对照组灌服等体积自来水,连续观察7d,记录中毒症状和死亡数并计算半数致死量(LD50);另取20只小鼠随机分为给药组和对照组2组,给药组于12h内分3次给小鼠灌胃1g/mL催情散药液,每次灌胃体积为每20g体质量0.8mL(最大灌胃体积),对照组灌服等体积自来水,连续观察7d,记录中毒症状、死亡数并确定最大耐受量;取40只大鼠,随机分为催情散高、中、低剂量给药组和对照组,给药组分别按10 000,5 000和2 500mg/kg剂量灌服给药,对照组灌服等体积自来水,连续灌服30d,灌药前和灌药第7,14,21,28和30天称量大鼠体质量、检测血常规和血液生化指标、测定脏器系数并观察组织病理学变化情况。【结果】急性毒性试验各剂量组均无小鼠死亡,故无法计算LD50;小鼠对催情散的最大耐受量为120g/kg,表明该受试药物无毒。亚慢性毒性试验中,各给药组大鼠体质量、血常规、血液生化指标和脏器系数与对照组相比差异不显著(P>0.05);病理剖检和组织切片观察发现,除了由于心脏采血导致部分心肌纤维出现坏死和间质血管出血外,其他各器官组织未见明显异常变化。【结论】中药催情散实际无毒,临床按推荐剂量使用不会对奶牛产生毒害作用。

中药催情散对持久黄体奶牛血清中生殖激素含量的影响

为阐明中药催情散治疗奶牛持久黄体的作用机制,通过直肠及B超检查技术将确诊的36头持久黄体奶牛分为高、中、低剂量组和对照组,试验组灌服不同剂量的催情散,对照组灌服温性自来水,连续灌服4d。统计有效率并用酶联免疫吸附法(ELISA)对用药前及用药后不同时间点试验奶牛血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)的含量进行测定,并进行组间及组内比较。结果显示:高、中剂量组总有效率都为70%,低剂量组总有效率为30%,对照组总有效率为16.7%;高、中剂量组总有效率与低剂量组相比差异显著,与对照组相比差异极显著。从激素水平来看,高、中、低剂量组奶牛用药后血清中FSH、LH、E_2水平均呈现升高趋势,P4水平均呈现下降趋势,在个别时间点甚至达到极显著水平,其中高剂量组变化趋势最明显,其次为中剂量组;而对照组奶牛灌服自来水后血清中生殖激素含量在各采样点间差异不显著,但LH和E_2在用药后16~19d有小幅度的升高趋势。以上结果表明,中药催情散通过调节持久黄体奶牛血清中生殖激素水平来达到治疗目的,从4组奶牛血清中生殖激素变化水平、用药后治愈率和有效率来看,高剂量组治疗效果最佳。

中西药物治疗奶牛持久黄体的B超影像学监测

为应用中药和西药治疗奶牛持久黄体提供理论依据,本试验将26头持久黄体奶牛分为中药治疗组、西药治疗组和阴性对照组,中药治疗组灌服中药催情散,阴性对照灌服温性自来水,连续灌服4d,西药治疗组肌注氯前列醇钠;应用B超对卵巢长宽、子宫角、子宫颈纵径进行测量,每3d进行一次,监测周期为22d。结果中药、西药物治疗组总有效率为70%、90%,两组相比差异显著(P<0.05);与阴性对照组16.7%有效率相比差异极显著(P<0.01)。从B超影像学上来看,中、西药物治疗组奶牛持久黄体侧卵巢平均长宽在停药后均有所降低,但差异不显著(P>0.05),阴性对照组在整个监测周期内总体趋势基本保持不变;中、西药物治疗组奶牛子宫角和子宫颈纵径在停药后升高,但差异不显著(P>0.05),阴性对照组在整个监测周期内变化相对比较平稳。从三组有效率和B超监测结果上来看,中药催情散对黄体的溶解和子宫机能的恢复起到有效作用,西药氯前列醇钠对黄体有特异性溶解作用。

蒙兽药巴布-7有效成分复方对大肠杆菌性腹泻犊牛生长及血液中相关免疫因子的影响

试验研究蒙兽药巴布-7有效成分复方(BSEIC)对感染致病性大肠杆菌O_(1)(E.coli O_(1))腹泻犊牛生长及血液中相关免疫因子的影响。将48头体况相近的初生荷斯坦犊牛,随机分为6组:对照组(NC)、阴性对照组(EC)、阳性对照组(CIP)、蒙兽药巴布-7有效成分复方低剂量组(BSEIC-L)、中剂量组(BSEIC-M)、高剂量组(BSEIC-H),犊牛连续灌药7 d,2次/d。除NC组外,其他5组犊牛在第5 d口服致病性大肠杆菌E.coli O_(1)(2.50×10^(11)CFU/mL,100 mL/头)。结果显示,BSEIC可以有效维持与增加体重、减少腹泻率;BSEIC可以修复致病性大肠杆菌所致小肠肠黏膜损伤。BSEIC可以不同程度提高免疫因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平,减少炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。研究表明,蒙兽药巴布-7有效成分复方能够有效治愈致病性大肠杆菌导致的犊牛腹泻,降低死亡率;中剂量效果最佳。

蒙兽药巴特尔-7的急性和亚慢性毒理学研究

试验研究蒙兽药巴特尔-7(Baatar-7)的急性毒性和亚慢性毒性。选取60只健康SPF级昆明小鼠,随机分为6组,对照组(灌服0.2 mL/10 g·BW生理盐水)和Baatar-7剂量1~5组(分别按5000.0、2500.0、1250.0、625.0和312.5 mg/kg·BW 1次性灌服Baatar-7药液),连续观察7 d,记录小鼠中毒和死亡情况。取20只小鼠,随机分为2组,对照组(灌服0.2 mL/10 g·BW生理盐水)和Baatar-7组(灌服5000 mg/kg·BW Baatar-7药液,0.2 mL/10 g·BW),每组10只小鼠(雌、雄各半),24 h给药2次(8:00、16:00),饲养7 d,观察记录其中毒症状、死亡时间及数量,并观察小鼠有无肉眼可见病变。取40只健康SPF级Wistar大鼠,随机分为4组,对照组(2 mL/100 g·BW灌服生理盐水)和Baatar-7低剂量组(Baatar7-L组)、中剂量组(Baatar7-M组)、高剂量组(Baatar7-H组)(分别给予2.5、5.0、10.0 g/kg·BW的Baatar-7药液),每组10只大鼠(雌、雄各半),1次/d,连续6 w,1次/w称重。采血进行血常规和血液生化学检查,计算脏器指数并进行组织病理学观察。结果显示,急性毒性试验各剂量组小鼠均未出现死亡情况,无法得出该复方LD50。小鼠对Baatar-7的最大耐受量为10000 mg/kg·BW,说明Baatar-7安全无急性毒性。亚慢性毒性试验中,各给药组大鼠体重、血常规、血液生化指标以及脏器指数与对照组无显著差异(P>0.05),剖检和组织学观察未见明显异常变化,说明Baatar-7安全无亚慢性毒性。试验表明,Baatar-7在本试验计量范围内属于安全无毒。

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤部位肌组织形态及VEGF和bFGF表达的影响

ZD制剂为治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机制,通过建立马前肢急性软组织损伤模型,对其进行组织形态学观察,评价ZD制剂对马急性软组织损伤的作用效果,采用免疫组织化学方法检测ZD制剂对VEGF、bFGF在肌肉中表达的影响。用20匹蒙古马随机分为4组,选取左前肢肩部臂部肌肉,制造急性软组织损伤模型。于造模前、后用取样器进行组织取样,制作成石蜡切片,观察其形态学变化,用免疫组织化学方法对阳性细胞分析VEGF、bFGF的表达。结果表明,试验药物组在损伤后的修复能力优于阳性药物组和阴性对照组。表明ZD制剂可通过促进成纤维细胞、毛细血管新生和肌细胞的生成来进行组织的修复再生,试验药物组在损伤后VEGF、bFGF的表达优于阴性对照组和阳性药物组,ZD制剂可能通过提高VEGF、bFGF的表达进行损伤的修复。

ZD制剂对马急性软组织损伤模型的作用

ZD制剂是治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机理,建立马急性软组织损伤模型,应用血清学检测、超声学方法及红外热成像技术,综合评估ZD制剂对马急性软组织损伤的治疗效果。结果表明,早期试验药物组局部温度低于阴性对照组,后期试验药物组的局部温度显著高于阴性对照组,表明ZD制剂对急性软组织损伤早期能够降低局部温度,后期能升高局部温度。ZD制剂对肌肉灰度恢复能力显著优于阳性药物组和阴性对照组,表明ZD制剂对肌肉损伤恢复有良好促进作用。ZD制剂对皮下消肿显著优于阴性对照组。

腹泻犊牛源大肠杆菌对小鼠的致病性

[背景]建立细菌性动物腹泻模型是研究细菌性腹泻机制及抗腹泻药机理的常用方法。[目的]从临床腹泻犊牛粪便中分离出5株不同血清型大肠杆菌(Escherichia coli),经口灌服小鼠建立与临床犊牛腹泻症状近似的小鼠腹泻模型。[方法]72只昆明小鼠随机分为6组,每组12只,分为正常对照组(NC)、E.coli O1干预组、E.coli O2干预组、E.coli O8干预组、E.coli O78干预组和E.coli O86干预组,攻毒组大肠杆菌浓度均为3×10^(13)CFU/mL,每10 g体重灌服0.2 mL攻毒菌液,2次/d,连续灌服7d,分别于灌服后3、5和7d记录小鼠体重及腹泻率,并收集各组小鼠血清,检测白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及第7天血清免疫球蛋白G(immunoglobin G,IgG)、IgA和分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,sIgA)的含量;于攻毒后第7天收集各组小鼠十二指肠及盲肠内容物,用于制作HE切片及16S rRNA基因分析;以E.coli O8作为攻毒菌株通过灌胃和注射的方法建立腹泻模型,使用氧氟沙星对腹泻小鼠进行治疗。[结果]攻毒5 d和7 d后,各攻毒组小鼠体重与NC组比较均显著降低(P<0.05),腹泻率增加;HE染色结果显示,各攻毒组小鼠肠绒毛均出现不同程度的损伤,其中以E.coli O2和E.coli O8导致的损伤最为严重,E.coli O1次之;血清IL-1β、IL-6和TNF-α的含量均显著增加(P<0.05),以E.coli O1和E.coli O8的含量增加最为显著;IgG、IgA和sIgA含量显著下降(P<0.05),以E.coli O8下降最为显著;小鼠盲肠内容物的16S rRNA基因分析显示,与NC组比较各攻毒组小鼠菌群多样性水平降低,在门水平上攻毒小鼠厚壁菌门(Firmicutes)丰度下降,拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)丰度上升;腹腔注射E.coli O8小鼠在12 h内全部死亡,并且抗生素不能逆转这种死亡,而通过灌胃造成的腹泻小鼠经抗生素治疗后可恢复正常。[结论]5株牛源大肠杆菌经口灌服小鼠后均会造成不同程度的腹泻,其中E.coli O2、E.coli O8和E.coli O1对小鼠肠绒毛破坏较为严重,E.coli O8攻毒后血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量较高,因此,以0.2 mL/10 g,2次/d,连续灌服7d浓度为3×1013 CFU/mL的E.coli O8可较好地建立小鼠腹泻模型,并可用于评价药物疗效。

外用ZD制剂对急性软组织损伤模型小鼠血清IL-8和IL-10含量的影响

为了评估ZD制剂对急性软组织损伤的疗效,检测ZD制剂对急性软组织损伤模型小鼠体内相关炎性因子的动态变化。将144只昆明种小鼠随机分为空白组,模型组,阳性药物组,ZD高、中、低剂量组,采用重物砸伤法制作急性软组织损伤模型,测定造模后第1 d,3 d,5 d,7 d,9 d,11 d,13 d和15 d血清中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)含量的变化。结果表明:连续用药7d后阳性药物组和ZD高剂量组血清中IL-8的含量与空白组比较差异不显著(P>0.05),与模型组比较差异显著(P<0.05);连续用药11d后ZD制剂中、低剂量组与空白组比较差异不显著(P>0.05),与模型组比较差异显著(P<0.05)。连续用药9d后阳性药物组和ZD高剂量组血清中IL-10与空白组比较差异不显著(P>0.05),与模型组比较差异显著(P<0.05),连续用药13d后,ZD制剂中、低剂量组血清中IL-10与空白组比较差异不显著(P>0.05),与模型中比较差异显著(P<0.05)。以上结果表明ZD制剂高剂量组与阳性药物组疗效相当,且优于ZD中、低剂量,能显著降低血清中IL-8和IL-10的含量,抵抗炎症反应,是一种抗炎作用明显的外用中药软膏。

自制中药方剂对围产后期奶牛血浆IL-6、Hp含量的影响

为了评估本中药方剂对围产后期奶牛的保健情况,研究产后奶牛体内部分炎症相关因子含量的变化,本试验将30头正常分娩奶牛分为试验组和对照组,测定了产后奶牛在第3,7,14,21天时血浆中细胞因子白介素-6(IL-6)、结合珠蛋白(Hp)含量的变化情况。结果表明:对照组奶牛血浆IL-6含量在各时间点均无显著性差异(P>0.05),试验组奶牛血浆IL-6含量在第21天时显著高于第3天(P<0.05);试验组奶牛第21天血浆Hp含量显著高于对照组(P<0.05)。说明此中药对IL-6和急性期反应的Hp两种炎症相关因子有调节作用,对正常分娩奶牛有一定的产后保健效果。

自制中药方剂对围产后期奶牛血浆IL-1β、IL-10含量的影响

为了评估本中药方剂对围产后期奶牛的保健情况,研究产后奶牛体内炎性细胞因子含量的变化,试验将30头正常分娩奶牛分为试验组和对照组,测定了奶牛在产后第3,7,14,21天血浆中白细胞介素(IL)-1β(IL-1β)、IL-10含量的变化情况。结果表明:试验组奶牛在产后第21天血浆中的IL-1β的含量显著高于对照组(P<0.05);试验组奶牛在产后第7天血浆中的IL-10含量显著高于对照组(P<0.05)。说明此中药方剂对奶牛血浆中部分细胞因子有明显的调节作用,对正常分娩奶牛有一定的产后保健效果。

ZD制剂对急性软组织损伤小鼠损伤处caspase-3表达的影响

为了探索ZD制剂对急性软组织损伤修复中caspase-3的表达影响,试验将360只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、阴性对照组、ZD高剂量组、ZD中剂量组、ZD低剂量组,每组60只,除空白对照组外其余各组采用重物砸伤法建立急性软组织损伤模型,进行组织形态学、caspase-3活性、免疫组织化学检测,观察用药后第2小时及1,3,5,7,9,11,13,15,21天组织损伤修复的情况。结果表明:建模后除空白对照组外其余各组小鼠均出现不同程度的肌纤维断裂、肿胀、出血症状,呈现典型的急性软组织损伤的病理变化,提示建模成功;各组损伤处组织匀浆中caspase-3活性在损伤后第5天达到最大值,ZD高剂量组与阴性对照组比较,第3天差异极显著(P<0.01);caspase-3大量表达于受损组织中,且ZD高剂量组在第3天、第5天和第7天均出现强阳性表达。说明ZD制剂的活血化瘀作用可能与其抑制caspase-3在损伤组织中的表达有关。

阿茹拉-7味散早期干预形成的瘤胃微生物环境对感染致病性大肠杆菌犊牛免疫力的影响

为探讨阿茹拉-7味散早期干预形成的瘤胃共生菌与大肠杆菌性腹泻犊牛免疫力相互作用的影响,选择30头荷斯坦犊牛随机分为正常对照组(NC)、未治疗组(UC)、抗菌药物组(CIP,0.50mg/kg)、蒙药阿茹拉-7味散低(BSP.L,1.25g/kg)、中(BSP.M,2.50g/kg)、高(BSP.H,5.0g/kg)剂量组,每组5头,给药7d后,采集血样。利用16SrRNA测序技术检测瘤胃微生物组成和ELISA检测血清中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素4(IL-4)、白介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果表明:(1)与NC组相比,UC组中ACE指数显著降低(P<0.05);与UC组相比,BSP.M组中Chao1指数、Shannon指数和ACE指数显著升高(P<0.05)。(2)与NC组相比,UC组中梭杆菌门(Fusobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和大肠杆菌(Escherichia coli)的水平显著升高(P<0.05);与UC组相比,BSP.L、BSP.M和BSP.H组中梭杆菌门、变形菌门和大肠杆菌的水平显著降低(P<0.05),且BSP.L组中柔嫩梭菌属(Faecalibacterium)的水平显著升高(P<0.05)。(3)BSP.M组犊牛体重和平均日增重显著增加(P<0.05),还可以降低腹泻率。(4)与UC组相比,BSP.M组血清中IL-4、IL-2和IFN-γ的含量显著升高,显著降低IL-6和TNF-α的含量(P<0.05)。综上所述,中剂量阿茹拉-7味散早期干预形成的瘤胃微生物环境对感染致病性大肠杆菌犊牛瘤胃菌群数量增加,丰富度和多样性上升,增加有益菌群所占比例,降低条件致病菌所占比例,增强抗炎、免疫能力,降低腹泻发生的风险。

急性期蛋白在马兽医临床诊断中的应用

在马兽医临床实践中,应用较多的马匹急性期蛋白（APP）主要有血清淀粉样蛋白A（SAA）、血浆纤维蛋白（FIB）及结合珠蛋白（Hp）三种,笔者就APP在马兽医临床中的应用及将来的发展趋势做一综述,以期为我国马兽医临床工作提供新的思路。

电镜技术在马兽医科学研究中的应用

电子显微镜是一种对组织超微结构进行观察的形态学研究工具,因分辨率高等优点而在国内外马兽医科学研究中得到应用。本文介绍了电镜技术的工作原理和发展史,论述了电镜技术在马匹组织病理学、病毒学以及寄生虫学等方面的应用情况,最后对电镜技术在马兽医科学及相关研究的应用前景进行了展望,以期电镜技术可以在马科学各方面得到更广泛的应用。

一例犬纤维肉瘤的诊治

对一例患犬的肛门右侧的增生组织进行组织病理学诊断,手术切除增生组织后进行常规的石蜡切片制作,随后进行H.E染色。一般临床检查肿物表面光滑、表面溃破出血,肿块呈结节状,鱼肉样变。组织病理学可见细胞大小不一,多为梭形,可见核分裂象,有炎性细胞浸润,初步确定该增生组织为纤维肉瘤。最后通过本次病例对纤维肉瘤的临床症状、诊断方法、治疗手段及预后判断进行讨论。

马属动物软组织活检技术的临床研究进展

组织取样技术在医学上使用较多，无论是用于临床诊断还是科学研究。临床上用于癌症诊断、液体活检、癌症前期检查、炎症检查。实际操作中活检技术和超声配合使用，提高活组织取样技术的安全性和成功率。随着活检技术的不断改进，现探讨了活组织取样技术在马属动物的应用，介绍对肌肉、皮肤、肝脏、肾脏、蹄小叶、肺脏、脾脏、膀胱、子宫组织的取样部位、取样工具、注意事项及其并发症，以期为临床实际操作和科研试验提供指导。

ZD制剂对马肌肉软组织损伤的超微结构观察

为了解ZD制剂对马损伤的肌肉软组织超微结构的影响,试验选择4匹健康蒙古马,将3匹造模后随机分为试验药物组、阳性药物组、阴性对照组,每组1匹,另1匹设为空白对照组。试验药物组马使用ZD制剂治疗,阳性药物组马使用按摩乳,阴性对照组马匹使用空白膏,药物用法用量同试验药物组,空白对照组不做任何处理。在用药后第7,14,21天用一次性取样器在各组马匹损伤处随机分3点采样进行电镜观察。结果表明:试验第7天,与正常马骨骼肌比,阴性对照组、试验药物组和阳性药物组马肌纤维断裂、排列紊乱,但与试验药物组比,阳性药物组肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱更加明显。试验第14天,试验药物组和阳性药物组马肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱情况得到修复,各组马线粒体数量均明显减少,但试验药物组改善明显。试验第21天,试验药物组马肌纤维形态、线粒体形态和数量基本恢复正常,与正常马骨骼肌电镜照片相似;阳性药物组马肌纤维断裂和明暗带不清晰的情况仍存在;阴性对照组马肌纤维断裂、肿胀和排列紊乱情况仍未明显改善,线粒体仍存在数量减少、肿胀、嵴消失等异常。正常马骨骼肌肌原纤维中暗带长约2.0μm,明带长约1.0μm,马骨骼肌细胞线粒体多为卵圆形颗粒状或长杆状,肌细胞核呈扁椭圆形。说明ZD制剂可促进马骨骼肌肌原纤维、线粒体、肌细胞核形态改善与组织修复,效果优于阳性药物组。