产前诊断dup(9)1例

孕妇27岁,2020年9月因"超声提示胎儿鼻骨缺失、双侧侧脑室增宽"来郑州大学第一附属医院进行咨询。在超声引导下于孕23+5周接受羊水穿刺。羊水细胞染色体核型为46,XN,dup(9)(p13.1p24.3)(图1)。拷贝数变异(copy number variations,CNVs)检测提示胎儿为seq[hg19]9p24.3p13.1(200 000-38 780 000)×3,提示存在约38.58 Mb的重复(图2)。本研究通过了郑州大学第一附属医院伦理委员会的审查(KS-2018-KY-36),患者签署了临床研究知情同意书。

河南地区113例苯丙酮尿症患者PAH基因的变异特点

目的了解河南地区苯丙酮尿症患者苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因的变异规律及特点。方法应用聚合酶链反应对113例苯丙酮尿症家系的先证者PAH基因全部13个外显子进行测序检测,同时应用多重连接探针扩增技术检测PAH基因是否存在大片段缺失重复。结果113例先证者共226个等位基因共检出195个变异位点及3个大片段缺失重复,检出率分别为86.28%和1.33%。检出率较高的变异位点分别为P.Arg243Gln(18.14%)、P.Arg111X(6.19%)、P.Arg53His(5.31%)、EX6-96A>G(5.31%)、p.Tyr356X(4.87%)及p.Val399Val(4.42%)。变异频率较高的外显子分别为第7、11、3及6外显子。错义变异为最常见的类型。其中c.1016C>A(p.Ser339Tyr)、C.1000T>C(p.Cys334Arg)、c.1110G>T(p.Glu370Asp)和IVS6+1G>T为未报道过的新变异。结论河南省PAH基因的变异种类较多,存在广泛的等位基因异质性。

一个先天性肌营养不良症家系的POMT1基因突变鉴定与产前诊断

目的确定1个先天性肌营养不良症（congenital muscular dystrophy, CMD）家系的POMT1致病基因突变，并对该家系中孕11周的胎儿进行产前诊断。方法收集1例CMD患者及其表型正常父母的外周血标本，抽取母亲孕11周胎儿的绒毛标本。采用PCR扩增POMT1基因的第19和第20外显子，对PCR产物进行双向测序检测基因突变，明确致病突变来源后，进一步对胎儿进行产前诊断。结果先证者POMT1基因第19外显子检测到C．1939G〉A（P．Ala647Thr）杂合错义突变，来自其母亲；第20外显子检测到C．2141delG（P．Trp714Ter）杂合框移突变，导致蛋白质翻译的提前终止，该突变来自其父亲。产前诊断结果显示胎儿携带POMT1基因第19外显子c．1939G〉A杂合错义突变，推测其为与母亲相同POMn基因致病突变携带者的可能性大。结论POMT1基因第19外显子C．1939G〉A错义突变和第20外显子C．2141delG移码突变的复合杂合突变可能是该CMD家系的致病原因，符合常染色体隐性遗传的规律，通过基因产前诊断可以有效阻止致病突变的传递。

两个亨廷顿病家系的基因诊断和产前诊断

目的对2个亨廷顿病(Huntington’s disease,HD)家系进行IT15基因的变异分析,为患者的临床诊断及家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。方法采集两个家系成员的外周静脉血样和胎儿绒毛或羊水样本,提取基因组DNA,采用PCR和毛细管电泳法检测先证者和家系成员IT15基因(CAG)n的重复数目,并为家系中的3名孕妇提供产前诊断。结果2个家系先证者(CAG)n重复数目大于40,确定为亨廷顿病患者。家系1中另2名家系成员和家系2的另1名家系成员的IT15基因(CAG)n重复数目大于40,携带完全外显的等位基因,但均未发病,为症状前患者。产前基因诊断结果显示,家系1中的2名胎儿IT15基因(CAG)n重复数目分别为(16,19)/(18,19),均携带正常的等位基因;家系2胎儿(CAG)n重复数目为(15,41),胎儿携带异常的等位基因。结论对于HD家系成员行IT15基因检测和产前诊断,为患者的临床诊断及家系的遗传咨询提供了依据。

一个原发性肌张力障碍家系TOR1A基因的突变鉴定与产前诊断

目的应用PCR毛细管电泳法检测1个原发性肌张力障碍（primary torsion dystonia，PTD）家系TOR1A（TorsinA）基因的突变，为其家系的产前诊断依据提供。方法收集该家系先证者的外周血及羊水样本，应用PCR扩增样本TORlA基因第5外显子及侧翼DNA序列，之后通过琼脂糖电泳、荧光标记、毛细管电泳分离进行片段分析。用Sanger测序法验证TOR1A基因的突变。结果荧光标记片段毛细管电泳分离法和DNA直接测序均提示先证者及胎儿携带TOR1A基因-907—909delGAG（P．Glu303del）缺失突变，推测胎儿罹患与先证者相同的张力障碍的可能性较大。结论TOR1A基因C．907—909delGAG突变是该家系的致病原因。针对TOR1A基因的微小缺失型突变，可采用PCR结合毛细管电泳法进行DNA片段的分析。

同源2号染色体等臂核型一例

患者女,30岁,因婚后继发不孕来我院遗传中心咨询。患者平素月经正常,宫腔镜检形态正常,双侧输卵管通畅;心电图、超声等其他常规检查均未见异常。经伦理委员会审查(KS-2018-KY-36),在征得其知情同意后,对夫妇双方进行细胞遗传学检查:常规进行外周血淋巴细胞培养,制备染色体,G显带,计数40个中期分裂相,分析5个核型。患者核型为46,XX,i(2)(p10),i(2)(q10)(图1),其丈夫核型未见异常。对患者父母进行染色体分析,其父母核型均未见异常。

产前诊断del(7)一例

孕妇29岁,G_(1)P_(0)。因唐氏血清学筛查结果为21三体高风险(1/104)来我中心咨询。孕妇否认有不良孕产史及家族史,其夫妻双方表型正常。经签署知情同意书后,于孕19^(+5)周时行羊膜腔穿刺(伦理审查编号KS-2018-KY-36)。常规方法进行羊水细胞培养、染色体制备及G显带核型分析,计数80个中期分裂相,分析10个核型,胎儿核型为46,XN,del(7)(q34)(图1)。

der(4)t(4;5)染色体非平衡易位一例

患者男,29岁,因智力障碍为代主诉来我院检查。经其母亲知情同意,对患者及其母亲进行检查,常规进行外周血淋巴细胞培养,制备染色体,G显带,计数80个中期分裂相,分析10个核型,其母亲核型为46,XX,t(4;5)(q35;p15)(图1),患者为46,XY,der(4)t(4;5)(q35;p15)(图2)。

母源性46,XN,ins(3;7)(p25;q32q36)一例

孕妇女,33岁,G4P0+3。现孕18+周要求进行产前诊断。曾因反复流产3次来我中心咨询。夫妇双方行细胞遗传学检查:常规外周血淋巴细胞培养,制备染色体,G显带,计数40个中期分裂相,分析5个核型。孕妇核型为46,XX,ins(3;7)(p25;q32q36)(图1);其丈夫核型未见异常。

胎儿游离DNA在染色体非整倍体疾病无创产前筛查中的应用

目的讨论母体外周血液中胎儿游离DNA在染色体非整倍疾病无创产前筛查中的意义。方法选取2015年6月1日至12月31日在我中心接受无创产前诊断的孕妇共1452例。根据血清学筛查,超声诊断结果,以及分娩年龄,将孕妇分为5组,其中唐筛高风险组277例,唐筛临界风险组278例,高龄妊娠组401例,超声异常组121例,自愿孕期筛查组375例。对所有孕妇抽取外周血,并利用高通量测序的方法进行胎儿游离DNA检测。无创DNA检测结果为阳性的孕妇,建议进行羊水染色体核型分析以确定胎儿染色体是否存在异常;无创DNA检测结果为阴性的孕妇进行电话随访。结果 5组孕妇共计1452例均完成了胎儿游离DNA检测,共检测出染色体异常胎儿23例,检出率为1.58%。其中21-三体阳性10例,18-三体阳性6例,13-三体阳性1例,性染色体异常6例。共有13例无创DNA检出结果异常的孕妇进行了羊水染色体核型分析,其中10例无创21-三体阳性的孕妇中,9例染色体核型分析结果为47,XN,+21,1例为46,XN;1例无创18-三体阳性的孕妇染色体核型分析结果为47,XN,+18;2例性染色体提示异常的,染色体核型分析结果均为正常。电话随访未发现染色体异常患儿。利用母血中胎儿游离DNA筛查染色体非整倍体胎儿的灵敏度为100%(10/10),特异度为99.79%(1429/1432)。结论利用母血中胎儿游离DNA对胎儿染色体非整倍体进行无创产前筛查具有较高的灵敏度及特异性,具有广泛意义和推广价值。但是仍存在一定的假阳性,且对性染色体异常的检测准确性仍然较低,应进一步结合其他产前诊断方法做出准确的判断。

一例先天性肌营养不良患儿的临床特征及FKTN基因变异分析

目的对一个肌酸激酶升高的患儿进行致病变异分析,为临床诊断提供依据。方法应用二代测序技术(肌营养不良相关基因检测包)对先证者进行基因检测,发现FKTN基因可疑位点后,用Sanger测序技术对先证者父母进行验证,明确先证者的病因。结果先证者FKTN基因有分别源自父亲的错义突变c.536G>C(p.R179T)和源自母亲的非移码缺失突变c.1299_1301delGTG(p.W434del),为复合杂合突变。结论FKTN基因c.536G>C(p.R179T)/c.1299_1301delGTG(p.W434del)变异是该家系可能的致病原因,新变异的检出扩充了先天性肌营养不良的基因突变谱。