Bt菌株中Cry1Ia和Cry2Ab结构域交换突变体的表达形式

前期构建了一系列Cry1Ia和Cry2Ab蛋白的结构域交换突变体,并在Bt菌株中获得了可观的表达。对6种突变体的表达形式及分泌与否进行了分析和检测。结果显示,6种突变体在Bt中以包涵体的形式存在于菌液沉淀中;这些包涵体与正常Cry蛋白形成的晶体不同,不能溶于Na2CO3缓冲液。蛋白印迹法检测结果显示,带有Cry1Ia分泌信号肽的突变体IAA,IIA和IAI蛋白未分泌到胞外,这可能是由于蛋白表达量过快,迅速聚集而形成包涵体,从而无法分泌到胞外。

高纤溶活性黄芪豆豉发酵条件的优化

[目的]确定黄芪与大豆共发酵制备一种具有高纤溶活性黄芪豆豉的最优发酵工艺。[方法]以黄芪水提液浸泡大豆作为发酵基质,以淡豆豉来源的4株枯草芽孢杆菌作为发酵菌株,以纤溶酶活性为考察指标,通过对发酵菌株的筛选、黄芪提取液的浓度和比例以及发酵时间的考察,筛选最优发酵工艺。[结果]黄芪豆豉的最优发酵工艺:黄芪水提液浓度为75 mg/mL,黄芪水提液与大豆的比例为1∶1(mL∶g),最优发酵菌株为DCT-1,于37℃发酵36 h。[结论]黄芪与大豆共发酵制备黄芪豆豉,既提高了豆豉的纤溶酶活性,又兼具黄芪的补气功效,提供了一种具有益气活血作用的食疗产品。

以蛋白酶和β-葡萄糖苷酶活性评价淡豆豉发酵工艺

通过以蛋白酶和β-葡萄糖苷酶活性的考察指标,对淡豆豉发酵工艺优化,为提高品质和深入研究及产业化提供依据。采用福林酚法测定蛋白酶,以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物的比色法,测定β-葡萄糖苷酶的活性,评价分别以黄豆或黑豆为基质,用伞枝梨头霉、米曲霉和枯草芽孢杆菌发酵的淡豆豉品质。结果表明,以枯草芽孢杆菌为发酵菌种,以黑豆为基质制备的淡豆豉,最佳发酵条件为,先经37℃发酵7 d,经42℃发酵6 d,蛋白酶活性较高,为1590.24 IU/g,与黄豆基质的差异不显著。黑豆为基质,以伞枝梨头霉和米曲霉作为联合发酵菌,最佳发酵条件为,先经28℃发酵7 d,经42℃发酵3 d,β-葡萄糖苷酶活性达到47.15 IU/g,优于黄豆基质。发酵菌种、基质和条件不同,对淡豆豉的品质影响较大。多菌种联合发酵对品质提高具有实际意义。