生物电阻抗分析法与同位素稀释法测量全身总水分的对比研究

目的探讨生物电阻抗分析法(bioelectrical impedance analysis,BIA)为基本原理设计的DBA-550人体成分分析仪测量全身总水分(total body water,TBW)的有效性及准确性。方法选取2018年6-7月北京地区在校大学生30例,分别采用同位素稀释法和BIA法测量TBW,并计算去脂体质量(fat free mass,FFM),比较两种方法测量结果的准确性。结果30例受试者中,男15例、女15例,年龄18~25岁,平均(23.8±1.7)岁。BIA测定的TBW及FFM高于同位数18O法的测定结果[(34.49±6.47)kg比(32.33±6.14)kg,(47.12±8.85)kg比(44.17±8.39)kg],差异均有统计学意义(P<0.05),两种方法测定TBW及FFM的Pearson相关系数均为0.873(P<0.05);Bland-Altman一致性分析结果显示,BIA和同位素^(18)O法的TBW和FFM的差值变化范围分别为(2.2±6.2)kg和(-2.9±8.5)kg,具有较好的一致性。结论以BIA为基本原理的DBA-550人体成分分析仪测定TBW与“金标准”同位素稀释法具有等效性,适用于快速评价人体的TBW和FFM等指标。

扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化及TGF-β1 ／Smads信号通路的影响

目的研究扶正化瘀胶囊对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法结扎大鼠冠脉左前降支,建立急性心肌梗死(AMI)模型,模型建立24 h后,随机分为模型组、扶正化瘀组和卡托普利组,另设假手术组,只穿线不结扎。分别给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d),卡托普利片2.25 mg/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组给予等量去离子水,每日1次,连续8周。采用小动物超声影像系统检测大鼠心功能及结构变化;免疫组化法检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的表达;Western blotting法检测smad3、samd4、smad7蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测TGF-β_1、smad3、smad4、smad7 mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短分数(LVFS)明显降低,室间隔舒张末期厚度(IVSTd)、室间隔收缩末期厚度(IVSTs)降低(P<0.05),左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室收缩末期内径(LVDs)升高(P<0.05);扶正化瘀和卡托普利组可升高AMI模型大鼠IVSTs、LVEF、LVFS(P<0.05),降低模型大鼠LVDd、LVDs(P<0.05)。模型组TGF-β_1表达水平较假手术组明显升高(P<0.01),扶正化瘀胶囊和卡托普利可降低模型大鼠TGF-β_1表达水平(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠TGF-β_1、Smad3、smad4 mRNA水平明显升高(P<0.05 or P<0.01),smad7 mRNA水平明显降低(P<0.05或P<0.01);扶正化瘀胶囊和卡托普利可降低TGF-β_1、Smad3和smad4 mRNA表达水平(P<0.05),提高smad7 mRNA表达水平(P<0.05)。结论扶正化瘀胶囊可降低心肌梗死后大鼠心肌纤维化程度,改善心脏功能,其作用机制可能与调控TGF-β_1/Smads信号通路有关。

代谢综合征患者焦虑抑郁与中医体质关系的分析

目的探讨代谢综合征患者合并焦虑抑郁状态与中医体质的相关分析。方法回顾分析2019年8月—2020年1月期间浙江中医药大学门诊部收治的代谢综合患者150例,所有患者均利用东华原中医体质分析仪进行中医体质辨识,利用焦虑自评量表(Self-Rating Anxiety Scale,SAS)和抑郁自评量表(Self-Rating Depression Scale,SDS)对患者的心理状态进行测评,分析代谢综合征背景下,焦虑、抑郁状态与中医体质的相关性。结果在代谢综合征患者中,焦虑状态排在前3位的体质分别是阳虚质、气虚质和痰湿质;抑郁状态排在前3位的体质分别是阴虚质、气虚质和痰湿质。经Logistic回归分析显示,在代谢综合征患者中,焦虑状态与阳虚质、气虚质和痰湿质独立相关;抑郁状态与阴虚质、气虚质、痰湿质和湿热质独立相关。结论在代谢综合征背景下,患者合并焦虑、抑郁状态与中医体质有明显相关性,通过各种方式改善偏颇体质可显著提高代谢综合征的治疗效果。

不同制作工艺的复方颗粒剂对乳腺癌小鼠瘤体生长及PI_(3)K和Akt表达水平的影响

目的探索不同制作工艺的复方颗粒剂对乳腺癌小鼠瘤体生长及磷脂酰肌醇-3激酶(PI_(3)K)和蛋白激酶B(Akt)表达水平的影响。方法以BALC乳腺癌小鼠为模型,采用1×10^(7)细胞/ml乳腺癌细胞4T1原位移植多选择小鼠乳腺脂肪垫内方式造模,将造模成功组分成煎药剂组(A组)、配方颗粒剂组(B组)、生理盐水组(C组)及模型组(D组),每组各15只,同时另选15只作为空白对照组(E组),仅进行正常条件性饲养。给药21 d后检测各组BALC乳腺癌小鼠的瘤质量、脾脏指数、胸腺指数及卵巢雌激素、孕激素、PI_(3)K和Akt,探讨不同工艺复方颗粒治疗乳腺癌的疗效和作用机制。结果A组和B组小鼠瘤体质量明显低于C组和D组小鼠(P<0.05),A组与B组瘤体质量和抑瘤率比较差异无统计学意义(P>0.05),C组与D组瘤体质量比较差异无统计学意义(P>0.05),E组小鼠均未见瘤块;与E组相比,A组、B组、C组和D组小鼠脾脏指数明显提高(P<0.05);A组、B组小鼠脾脏指数较C组、D组明显降低(P<0.05);与E组相比,A组、B组、C组和D组小鼠胸腺指数均降低(P<0.05),A组、B组较C组、D组小鼠胸腺指数升高(P<0.05);B组、C组和D组小鼠血清雌二醇和孕酮水平明显高于E组(P<0.05),A组与E组小鼠血清雌二醇和孕酮水平差异无统计学意义(P>0.05),A组、B组小鼠血清雌二醇和孕酮水平明显低于C组和D组(P<0.05),且A组小鼠血清雌二醇和孕酮水平低于B组(P<0.05);A组、B组、C组和D组小鼠PI_(3)K和Akt蛋白水平明显高于E组小鼠(P<0.05),A组和B组小鼠PI_(3)K和Akt蛋白水平明显低于C组和D组小鼠(P<0.05),并且A组小鼠PI_(3)K和Akt蛋白水平明显低于B组(P<0.05)。结论黄精覆盆子复方颗粒的加工工艺仅在抑制血清雌二醇、孕酮水平和抑制PI_(3)K和Akt表达等方面差异有统计学意义,但对瘤质量及瘤质量抑制率差异无统计学意义,煎制工艺和制粒工艺对黄精覆盆子复方颗粒的疗效影响不显著。

益气活血方对大鼠心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA表达的影响

目的观察益气活血方对大鼠心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA表达的影响。方法结扎SD大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死后心力衰竭模型(假手术组只穿线,不结扎),随机分为模型组、益气活血低剂量组(益低组)、益气活血高剂量组(益高组)、氟伏沙明组。益低组、益高组分别予以含生药量15 g/kg、30 g/kg的益气活血方,氟伏沙明组予以氟伏沙明(1mg/kg),模型组和假手术组大鼠予以蒸馏水,每日1次灌胃。8周后,进行超声心动图检测;心脏取材并计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌梗死边缘区Sigma-1R、SERCA2a、IP3R mRNA的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠左室舒张末内径(LVDd)、左室收缩末内径(LVDs)、左室舒张末期容积(LV Vo Ld)、左室收缩末期容积(LV Vo Ls)及心脏质量指数显著增加(P<0.01),左室后壁舒张末厚度(LVPWTd)、左室后壁收缩末厚度(LVPWTs)、射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)显著降低(P<0.01),其心肌组织Sigma-1R、SERCA2a mRNA的表达降低(P<0.05),IP3R mRNA表达增加(P<0.01)。与模型组相比,各药物组大鼠心肌重构和心功能有不同程度改善(P<0.01);益低组、益高组和氟伏沙明组大鼠的心脏质量指数均显著降低(P<0.01);同时,各药物组Sigma-1R和益高组SERCA2a mRNA表达显著增加(P<0.01),氟伏沙明组SERCA2a mRNA表达增加(P<0.05),益低组SERCA2a mRNA表达无统计学意义,益低组、益高组IP3R mRNA表达降低(P<0.05),氟伏沙明组IP3R mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论益气活血方药可显著改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏重构和心脏功能,其机制与调节心肌梗死后心肌组织Sigma-1R及相关因子SERCA2a、IP3R mRNA的表达有关。

扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠微小RNA-29家族表达的影响

目的通过观察扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠微小RNA-29家族(mi-croRNA-29,miR-29)的表达影响,探讨其抗心肌纤维化的可能作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎术制备大鼠急性心肌梗死模型,随机分为模型组、扶正化瘀组和卡托普利组,假手术组只穿线不结扎,每组6只,连续8周灌胃给予相应药物或去离子水。采用HE染色、心脏指数评分、Masson染色的方法评价心脏整体形态结构、重构程度及纤维化程度,并运用实时荧光定量PCR法检测miR-29家族表达水平。结果(1)与假手术组相比,模型组大鼠心脏指数比值、胶原容积分数升高(P<0.01);与模型组相比,扶正化瘀组、卡托普利组大鼠心脏指数比值、胶原容积分数均降低(P<0.01)。(2)与假手术组相比,模型组大鼠心肌梗死边缘区组织中miR-29a-3p、miR-29b-3p、miR-29c-3p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达显著下调(P<0.05)。与模型组比较,扶正化瘀组miR-29b-3p、miR-29a-5p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达上调(P<0.05);卡托普利组miR-29a-5p、miR-29b-5p、miR-29c-5p表达水平显著升高(P<0.01),miR-29a-3p、miR-29b-3p、miR-29c-3p表达水平进一步下调(P<0.01)。结论扶正化瘀胶囊可改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其作用机制可能与上调部分miR-29家族成员的表达有关。

活血益气方促缺氧人脐静脉内皮细胞迁移及其相关调控基因mRNA表达的拆方研究

目的 观察活血益气方及其拆方药物血清对缺氧损伤后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移的影响,探讨其促血管新生可能的作用机制及配伍规律。方法 采用三气培养箱建立HUVEC缺氧损伤模型,另设正常对照组常规培养。活血益气方、活血方及益气方组分别给予相应药物血清培养,缺氧组及正常对照组给予正常对照血清培养。干预24h后,采用TranswellInsert检测细胞迁移,实时荧光定量PCR法检测细胞粘着斑激酶(FAK)、应激活化蛋白激酶-2(p38)、MAP激酶活化蛋白激酶(MAPKAPK)、热休克蛋白27(HSP27)mRNA表达水平。结果 与正常对照组比较,缺氧组细胞迁移数显著减少(P<0.01);FAK、p38、MAPKAPK、HSP27mRNA表达水平显著下调(P<0.01)。与缺氧组比较,活血益气方、活血方及益气方可增加缺氧细胞迁移数(P<0.05或P<0.01),其中活血益气方组细胞迁移数显著高于活血方组,差异有统计学意义(P<0.05);活血益气方可上调细胞FAK、p38、MAPAPK、HSP27mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01),活血方可上调细胞FAK、p38mRNA表达水平(P<0.05),而益气方则可上调细胞FAK、p38、MAPKAPKmRNA表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论 活血益气方及其拆方可不同程度地促进缺氧后HUVEC迁移,其作用机制可能与上调FAK及p38/MAPKAPK/HSP27信号通路活性有关;活血益气方的促迁移效应最显著,活血方和益气方发挥协同作用。

活血益气方及其拆方对缺氧人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨活血益气方及其拆方促进血管新生的可能作用机制。方法建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧损伤模型,分为模型组、活血益气方组、活血方组及益气方组。另设正常对照组常规培养。活血益气方组、活血方组及益气方组给予含10%相应药物血清培养,模型组及正常对照组给予生理盐水血清培养,干预24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法检测HUVEC凋亡,WST-1法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力,微板法测定丙二醛(MDA)含量及细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)含量,实时荧光定量PCR法检测细胞蛋白激酶C(PKC)、Ras、Raf-1 mRNA水平。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC增殖明显减少,SOD活力及PKC、Ras、Raf-1 mRNA均显著下降,细胞凋亡及MDA、LDH含量明显增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,活血益气方组、活血方组及益气方组HUVEC增殖均显著增加,LDH含量均显著降低,活血益气方组SOD活力显著提高,活血益气方组、活血方组细胞凋亡显著减少,活血益气方组、益气方组MDA含量显著降低,PKC、Ras、Raf-1 mRNA水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论活血益气方及其拆方可不同程度地促进缺氧后HUVEC增殖并抑制其凋亡,可能与增强细胞抗氧化能力和调节PKC/Ras/Raf-1信号通路有关;活血益气方对细胞的保护作用优于活血方和益气方,二者发挥协同作用。

扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠细胞外基质代谢的影响

目的探讨扶正化瘀胶囊治疗心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法 24只大鼠随机分为模型组、扶正化瘀组、卡托普利组、假手术组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎术制备大鼠心肌梗死模型。造模后扶正化瘀组给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组均给予等体积的去离子水灌胃,各组均每日1次,连续8周。采用天狼星红染色检测心肌胶原分数(CVF),免疫组化、实时荧光定量PCR法分别检测Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)蛋白及mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组、卡托普利组CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与卡托普利组比较,扶正化瘀组CVF、TIMP-1蛋白表达升高,TIMP-1 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论扶正化瘀胶囊能改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其机制可能与调控MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白和mRNA表达及MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1有关。