霍乱毒素B亚单位的研究进展

目的 介绍霍乱毒素B亚单位最新研究进展。方法 从霍乱毒素B亚单位的基因表达、作为载体蛋白与免疫佐剂的应用、与免疫原的不同使用方法和不同的免疫途径对其免疫佐剂作用的影响等方面进行介绍。结果 霍乱毒素B亚单位是有较好应用前景的载体蛋白 ,具有较强的佐剂活性 ,可以增强细菌、病毒以及其他抗原的免疫原性。

家蚕蛹表达的乙型肝炎表面抗原中蛋白口服免疫原性的研究

目的 探讨家蚕蛹表达的重组乙型肝炎表面抗原中蛋白 [rHBsAg(PreS2 +S) ]口服免疫原性。方法 选择 4周龄的SD大鼠 ,将重组病毒感染后的家蚕蛹 ,制成口服剂型灌胃大鼠 ,ELISA方法检测抗 HBs抗体及抗 PreS2抗体。结果 在灌胃重组蛋白组中有 4 0 %鼠体血清内检测到了特异性抗 HBs抗体及抗 PreS2抗体 ,抗体应答反应持续 2～ 3周 ;口服免疫后抗体转阳的SD鼠加强免疫后能产生较强的二次免疫应答。进一步研究表明 ,口服家蚕蛹表达的rHBsAg(PreS2 +S)具有加强免疫的效果。对酵母重组疫苗单剂腹腔注射过的SD鼠 ,用家蚕蛹表达的rHBsAg(PreS2 +S)灌胃加强免疫后 ,能诱导鼠体迅速产生较强的抗 HBs抗体。结论 家蚕

实验室信息管理系统的技术与应用进展

实验室信息管理系统(LIMS)自问世以来,在世界范围内取得了令人惊叹的技术进展和应用成就。该文从现代化实验室实施LIMS的意义,LIMS主要的技术发展阶段,目前国内LIMS的应用情况,分析测试性实验室在实施LIMS后预期达到的目标,以及当前LIMS项目实施中存在的问题和应用前景等方面进行综述。

药品监督管理中质量数据分析系统的应用研究

目的:探索药品安全风险"智慧监管"的有效途径,促进药品监管模式转变升级。方法:根据药品检验结果数据和不良反应信息等指标探索建立药品质量量化评价体系,在前期建立的药品质量数据库基础上,根据建立的药品质量量化评价体系构建药品质量数据分析系统,从质量信息报表功能和质量风险信息提示函功能等方面深度开发数据分析系统在药品监管方面的应用。结果与结论:药品质量量化评价体系能够对进入药品质量数据库的每批药品初步实现量化评价;药品质量数据分析系统的主要功能包括数据存储服务、数据模型服务、数据发布服务和数据应用;数据分析系统在药品监管中的应用主要包括生成药品质量信息报表和药品质量风险信息提示函等,能够及时筛出高危品种信息和发现问题趋势,指导监管部门实施精准靶向干预和制定科学抽检方案,为药品监管部门践行药品智慧监管理念提供技术支持。

食品检验职能整合后实验室管理面临的机遇和挑战

以重庆市的食品检验职能划转为例,分析在食品检验职能整合后实验室管理面临的机遇和挑战。主要机遇有检验检测能力大幅提升、检验队伍和仪器设备大幅增加、食品检验业务量大幅攀升和管理体系相互融合、优势互补,主要挑战有辅助人员安置、检测场地制约、检验文化差异和绩效待遇差距等。

超声处理对β-内酰胺类抗生素高分子杂质含量的影响

目的：考察超声前处理方法对β-内酰胺抗生素高分子杂质含量的影响。方法：采用葡聚糖凝胶（Sephadex）G-10高效液相色谱系统对不同厂家的注射用头孢曲松钠和阿莫西林胶囊进行分析。结果：采用超声前处理的方法可导致注射用头孢曲松钠和阿莫西林胶囊的高分子杂质含量出现不同程度的降低（5．5％-14．8％）。结论：检测β-内酰胺类抗生素的高分子杂质含量时应尽量避免强烈的超声处理。

食品药品检验共用质量管理体系建立的探索

目的探讨食品药品检验所如何建立适宜、高效的共用质量管理体系。方法考察和分析重庆市食品药品检验所共用质量管理体系的建立和完善情况,从而建立共用管理体系的可行思路。结果建立食品药品共用管理体系主要从5个方面着手,一是增加、修订不同管理和技术要素的文件,建立统一的管理体系;二是制订专门的食品检验业务流程和报告书系统;三是开展有针对性的质量控制工作;四是积极开展日常监督工作,保证业务工作符合质量管理体系要求;五是取长补短,开展内部技术交流,丰富和提升实验室管理内涵。结论共用质量管理体系的建立为食品药品检验工作提供了更加系统、全面的帮助,值得进一步研究。

检疫性柑橘冬生疫霉和丁香疫霉的三重PCR同步检测

全世界危害柑橘的疫霉有14种,其中冬生疫霉Phytophthora hibernalis和丁香疫霉Phytophthora syringae为我国规定禁止进境的两种检疫性柑橘真菌病害,目前尚未见有此两种病原菌的同步分子检测报道.该研究根据14种柑橘疫霉的18SrRNA,ITS,heat shock protein 90(HSP 90)等基因分别设计了疫霉属的通用引物和此两种检疫性疫霉的特异引物,通过进行反应体系优化,建立了同时检测柑橘上两种检疫性疫霉的特异三重PCR检测方法,并进行了灵敏度试验.用15个柑橘疫霉菌株与甜橙的混合DNA做模板进行模拟带菌试验,结果表明该三重PCR分子检测能实现两种检疫性疫霉菌的同步特异检测,这两种检疫性柑橘疫霉提供了特异、可靠、便捷、适于口岸应用的检测方法,可有效促进柑橘类水果的快速通关.

药用胶塞中抗氧剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚含量测定及迁移量研究

目的建立测定药用胶塞中抗氧剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)含量,以及其在头孢类注射剂溶液中迁移量的气相色谱法。方法色谱柱为DB-Waxetr毛细管柱(30 m×0.32 mm,1.00μm),载气为N_(2),进样量为1μL,流速为2.0 mL/min,分流比为20∶1,柱温采用程序升温,气化室温度为220℃,火焰离子化检测器,检测器温度为250℃。结果BHT质量浓度在0.5045~50.4500μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=1.0000,n=7);检测限为0.2018μg/mL,定量限为0.5045μg/mL;平均加样回收率为97.85%,RSD为1.18%(n=6)。药用胶塞中BHT最高含量为64.19μg/g,药品中抗氧剂BHT最高迁移量为14.60μg/g。结论该方法操作简单,灵敏度高,结果准确,重复性和稳定性均较好,可用于药用胶塞中BHT的含量测定及迁移量研究。

壮阳类中成药及保健食品中非法添加11种化学药品的定性检测

目的：建立定性检测壮阳类中成药及保健食品中非法添加11种化学药品的方法。方法采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱、MSE模式进行检测。色谱柱为Waters Acquity BEH C18柱（50 mm ×2.1 mm，1.7μm），含0.1%甲酸的乙腈-含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵溶液梯度洗脱，流速为0.4 mL/min；离子源为ESI源，正离子检测，扫描范围为100~600 m/ z。结果11种化学药品得到了较好分离，在6 min内完成快速检测。结论该方法快速、简便、灵敏、准确，可用于药品打假工作中的快速检测。

《药品质量控制实验室质量管理规范》中试剂与仪器管理的运用

目的为药品质量控制实验室推行《药品质量控制实验室质量管理规范》提供参考。方法从试剂管理和仪器管理两方面探讨《药品质量控制实验室质量管理规范(征求意见稿)》在实验室管理工作中的要求。结果与结论该规范有助于药品质量控制实验室操作规范的国际间一致性,以及实验室间的合作和结果互认,推动药品质量控制实验室质量管理水平的提升。

药用胶塞质量对头孢菌素类注射剂澄清度的影响

目的探讨药用胶塞质量对头孢菌素类注射剂澄清度的影响。方法调研重庆市7家头孢菌素类注射剂在产企业,了解胶塞的使用贮存情况和配方信息,收集14个品种、39批样品,检测药品溶液澄清度及胶塞中环硅氧烷、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和不饱和脂肪酸。结果39批头孢菌素类注射剂在加速试验条件下,8批样品的浊度值显著升高,胶塞和药品中环硅氧烷、BHT、棕榈酸、硬脂酸的检出率分别为7.7%和7.7%、11.5%和15.4%、96.2%和69.2%、100.0%和26.9%。结论胶塞质量对头孢菌素类注射剂的溶液澄清度有一定影响,研究结果可为企业选择适宜的胶塞提供参考。

阿莫西林胶囊聚合物杂质测定中的异常情况研究

目的研究阿莫西林胶囊聚合物测定中出现的异常情况。方法按照2005年版《中国药典》规定的分子排阻色谱法原理,采用高效液相色谱(HPLC)法和KTATMLC抗生素高分子专用分析系统两种方法进行分析。结果采用HPLC法时聚合物杂质含量超出药典规定范围,采用KTATMLC抗生素高分子专用分析系统法进行复核时出现双杂质峰现象,即聚合物杂质峰出现异常分离情况,以第1个杂质峰作为聚合物杂质进行计算,发现聚合物杂质含量小于0.2%,在药典规定范围内。结论有条件的实验室应使用KTATMLC抗生素高分子专用分析系统与较大柱床体积的色谱柱来检查阿莫西林胶囊聚合物,检查时若出现聚合物杂质峰异常分离,应以第1个杂质峰作为聚合物杂质进行计算。

新型冠状病毒重组抗原制备、纯化及鉴定

目的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的刺突蛋白(S)和核衣壳蛋白(N)重组抗原。方法利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列,用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模,运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表位进行分析,选取抗原表位较多的序列进行合成;重组抗原分离纯化后制备兔抗新冠病毒蛋白多抗,用Western blot检测抗原SARS-CoV-2的S蛋白以及N蛋白免疫学活性;用ELISA法检测自制抗原与市售抗体的结合能力。结果重组质粒pET-22b-SA、pET-22b-SB、pET-22b-SC、pET-22b-NA、pET-22b-NB测序鉴定结果显示正确;Western blot结果显示,重组抗原与山羊抗兔IgG-HRP有特异性结合反应,表明具有良好的免疫学反应;ELISA法结果显示,重组抗原结合能力明显强于市售抗N蛋白抗原。结论制备的抗原与不同靶IgG和IgM结合能力强,特异性高,具有开发成检测血清SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体的试剂盒的潜力。

青霉素V钾片微生物限度检查方法适用性研究

目的:建立青霉素V钾片的微生物限度检查方法。方法:按《中国药典》2020年版(四部)非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法、控制菌检查法进行适用性试验。结果:本品需氧菌总数计数可采用薄膜过滤法冲洗800 mL,将膜贴于胰酪大豆胨琼脂平板(每200 mL含1 000万单位青霉素酶)依法检查;霉菌和酵母菌总数计数可采用常规法依法检查;质控菌大肠埃希菌可采用薄膜过滤法冲洗500 mL依法检查。结论:青霉素V钾片对试验菌均有不同程度的抑菌作用,采用薄膜过滤法、中和法联用可消除其抑菌作用,客观地反映药物中微生物的污染状况,以达到检测目的。

冻干制剂包装负压衰减法密封完整性研究

目的针对抽负压冻干制剂包装系统建立一套准确、可靠且简单易操作的包装系统密封性检查方法。方法根据包装系统内部负压特点及密封完整性要求,按照《化学药品注射剂包装系统密封性研究技术指南(试行)》及美国药典(USP)1207《容器密封完整性测试》,建立了一种新的通过监测包装内部压力变化来评价密封完整性的确定性的研究方法。结果该方法进行了方法学验证,采用了1.1、1.6、4.7及9.9μm标准漏孔模拟阳性样品进行验证,运用数学模型验证了准确性。结论该方法是基于抽负压冻干制剂包装特点而开发的新方法,针对性较强,方法准确、可靠,具有优于常规方法的高灵敏度,可应用于药品生产企业日常生产过程中的包装密封性监测,为行业提供了一个高效、可及性较好的密封性检查方法,以确保药品质量安全有效。

李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测

为建立我国禁止进境的2种检疫性真菌丁香疫霉Phytophthora syringae和栗黑水疫霉P.cambivora的同步分子检测方法,根据疫霉属的18S rRNA、HSP90和Ypt1基因分别设计通用引物、丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异性引物,建立三重PCR检测方法,并进行灵敏度测试和模拟带菌试验。结果表明,可同时检测李属植物上丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异三重PCR检测体系为:最佳引物浓度组合18SUF/18SUR、PCSF/PCSR和PSSF/PSSR依次为0.2、0.8、1.0μL,最佳退火温度为63℃,最佳退火时间为20 s。该体系扩增丁香疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和683 bp的HSP90基因特异条带,扩增栗黑水疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和314 bp的Ypt1基因特异条带,对照菌只出现18S rRNA条带;三重PCR反应体系检测灵敏度低于单重PCR;模拟带菌试验可同时扩增出3个片段。表明该三重PCR检测方法能实现丁香疫霉和栗黑水疫霉的同步特异性检测,可有效改进李属类水果及其种苗上检疫性疫霉的快速检测。

拟茎点霉属真菌检测技术研究进展

拟茎点霉属真菌是植物上重要的病原菌和内生菌,该属真菌已描述900多种,可引起多种病害,呈世界性分布。本文综述了拟茎点霉属检测技术的研究现状,并指出各种检测技术的优缺点及发展趋势。在此基础上,对DNA条形码技术的应用前景进行展望,为拟茎点霉进一步研究提供参考。

柑橘属植物疫霉病菌检测与鉴定的研究进展

在全世界危害柑橘属植物的疫霉有十几种,其中冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)和丁香疫霉(P.syringae)为我国规定禁止进境的两种检疫性真菌病害。本文从传统的症状观察、病原菌形态特征和分子检测等方面综述了柑橘属疫霉菌检测与鉴定的研究进展,可为柑橘属植物疫霉菌的口岸检疫提供借鉴。