正交设计优化草地早熟禾SRAP-PCR反应体系及引物筛选

采用L9(34)正交试验设计方法,对草地早熟禾(Poa pratensis)基因组DNA SRAP-PCR反应体系中的TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物及dNTP四因素的用量进行优化,并比较不同模板DNA用量对扩增的影响,建立草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系,同时,利用该体系对SRAP引物进行筛选。结果表明,草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系为Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+1.75mmol.L-1、引物0.25μmol.L-1、dNTP 220μmol.L-1、40ng模板DNA、2μL 10×PCR buffer,总体积20μL。运用该体系从100对SRAP引物中筛选出43对引物能够产生清晰稳定的扩增条带且多态性丰富。优化体系的建立及引物的筛选可为今后利用SRAP标记技术对草地早熟禾进行遗传多样性分析、图谱构建、种质资源鉴定奠定技术基础。

草地早熟禾对腐霉枯萎病的抗性评价

研究了温室条件下45份草地早熟禾材料对腐霉枯萎病的抗病性差异。结果表明,不同接种条件下草地早熟禾的发病率存在显著差异:传统的土壤接种法造成草地早熟禾的发病率最高,可达39.2%;改进的土壤接种法测定的发病率明显低于传统的土壤接种法。相同试验条件下品种间抗病性差异显著,不同的试验条件下同一品种表现出的抗病性不一致,具有相对稳定的特征。温室效果评价获得的高抗品种有:‘公园’、‘午夜’、‘肯塔基’、‘开鲁坦’、‘纳苏’和‘特拉内尔’等,高感品种有:‘莫桑斯克’、‘菲尔京’、‘雪狼’等。