CXCL16募集Th17细胞分泌IL-17A抗急性B淋巴细胞白血病细胞凋亡的实验研究

目的探讨辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)对急性B淋巴细胞白血病(B cell-acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)进展的影响及可能的作用机制。方法构建B-ALL小鼠模型。采用流式细胞术检测B-ALL小鼠外周血、骨髓、脾脏和淋巴结Th17细胞的比例。进一步通过细胞因子芯片分析B-ALL小鼠外周血细胞因子的表达情况,采用ELISA验证B-ALL小鼠外周血细胞IL-17A的表达。Th17细胞与白血病细胞共培养,通过流式细胞术检测Ki-67阳性细胞和B-ALL细胞凋亡比例,分析B-All细胞对Th17细胞的招募作用;通过Westernblot检测凋亡相关蛋白的表达。通过体内人急性白血病小鼠模型评价Th17细胞通过分泌IL-17A促B-ALL进展。结果Th17细胞在B-ALL小鼠外周血(P<0.0001)、骨髓(P<0.0001)、脾脏(P<0.0001)和淋巴结(P<0.0001)中升高。IL-17A在B-ALL模型小鼠外周血中表达升高(P<0.0001),Th17细胞通过IL-17A促进B-All细胞增殖(P<0.0001),抑制其凋亡(P<0.0001)。B-All细胞通过CXCL16招募Th17细胞(P<0.0001)。体内动物实验结果表明,IL-17A处理显著增加了人急性白血病小鼠外周血、骨髓和脾脏中的白血病细胞比例,并缩短其生存时间。结论Th17细胞在B-ALL中比例升高,B-All细胞通过CXCL16招募Th17细胞,Th17细胞分泌IL-17A促B-All进展。

肿瘤来源外泌体miR-106a对肝母细胞瘤及其免疫微环境的影响

目的本研究旨在探讨肝母细胞瘤(HB)来源外泌体miR-106a对细胞通讯及免疫微环境的重要作用。方法超速离心从HB细胞中分离外泌体,用透射电子显微镜观察表型。体外实验检测肿瘤细胞的增殖与迁移能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-106a和磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)的3′-UTR的靶向关系;动物实验及流式细胞术验证miR-106a对于免疫微环境及肿瘤生长的影响。结果研究发现,HB细胞释放的外泌体中富含miR-106a(P=0.0006),该miRNA增强了HB细胞的增殖(P=0.0064)和迁移能力(P=0.0003)。此外,外泌体miR-106a直接与PTEN的3′-UTR结合,抑制其表达(P=0.0005),激活AKT信号通路,促进血管生长因子(VEGF)的分泌(P=0.0058)。动物实验证实,miR-106a通过VEGF募集髓源性抑制细胞(MDSCs)进入肿瘤微环境(P=0.0008),促进肿瘤生长(P=0.0001)。结论肿瘤来源外泌体促进HB细胞的增殖及迁移,并上调VEGF分泌,募集MDSCs进入肿瘤微环境,促进肿瘤生长。