毛蕊花糖苷对冠心病大鼠炎症及脂代谢的影响

目的 探讨毛蕊花糖苷(verbascoside, Verb)对冠心病(CHD)大鼠炎症及脂代谢的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、毛蕊花糖苷低、中、高剂量组,每组12只。对照组大鼠正常饲料喂养,其他组大鼠高脂饮食联合腹腔注射垂体后叶素诱导冠心病模型。建模后,对照组和模型组大鼠均每天灌胃2 mL生理盐水,低、中、高剂量组大鼠分别每日灌胃2 mL剂量为20,40,80 mg/kg的毛蕊花糖苷,共灌胃4周。末次给药后24 h,分别检测各组大鼠的心功能指标[射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)]、血清心肌损伤标志物[肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)]、血清脂代谢指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和游离脂肪酸(FFA)]和血清炎症指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)]。通过苏木素伊红(HE)染色观察心肌形态。通过qRT-PCR检测心肌组织中AMP激活的蛋白激酶α(AMPKα)、过氧化物酶体增殖物激活受体α和γ(PPAR-α和PPAR-γ)和PPAR-γ激活分子1α(PGC-1α)的mRNA水平。通过Western blot检测心肌组织中核因子-κB(NF-κB) p65和AMPKα的磷酸化水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠的EF和FS降低(P<0.05),血清中CK-MB、LDH、TC、TG、LDL-C、FFA、TNF-α、ICAM-1和MCP-1水平升高(P<0.05),血清HDL-C水平降低(P<0.05),心肌组织中NF-κB p65的磷酸化水平升高(P<0.05),心肌组织中AMPKα、PPAR-α、PPAR-γ和PGC-1α mRNA水平和AMPKα的磷酸化水平降低(P<0.05)。与模型组比较,低、中和高剂量组大鼠的EF和FS升高(P<0.05),血清中CK-MB、LDH、TC、TG、LDL-C、FFA、TNF-α、ICAM-1和MCP-1水平降低(P<0.05),血清HDL-C水平升高(P<0.05),心肌组织中NF-κB p65的磷酸化水平降低(P<0.05),心肌组织中AMPKα、PPAR-α、PPAR-γ和PGC-1α mRNA水平和AMPKα的磷酸化水平升高(P<0.05)。与低剂量组比较,中和高剂量组大鼠的EF和FS升高(P<0.05),血清中CK-MB、LDH、TC、TG、LDL-C、FFA、TNF-α、ICAM-1和MCP-1水平降低(P<0.05),血清HDL-C水平升高(P<0.05),心肌组织中NF-κB p65的磷酸化水平降低(P<0.05),心肌组织中AMPKα、PPAR-α、PPAR-γ和PGC-1α mRNA水平和AMPKα的磷酸化水平升高(P<0.05)。结论 毛蕊花糖苷有效改善了冠心病大鼠的心功能,减轻了心肌损伤,其机制可能与抑制NF-κB介导的炎症反应和激活AMPK介导的脂代谢基因转录和表达有关。

男性吸烟者血清endocan水平与冠心病发病的关系

目的评价男性吸烟者血清endocan水平与冠心病发病的关系。方法 2012-08~2014-08纳入176名男性吸烟者,分为冠心病组（CAD,n=84）及非冠心病组（non-CAD,n=92）,测两组的基线临床资料及血清endocan水平,通过logistic回归分析评价各指标与冠心病发病的独立相关性。结果 CAD组患者血清血清endocan水平较non-CAD组显著升高[1.49（0.76-1.86）ng/L vs 0.77（0.32-1.10）ng/L,P〈0.01]。多元Logistic回归分析显示血清endocan水平与男性吸烟者合并冠心病呈独立正相关（优势比1.86,95%CI 1.17-2.75,P〈0.01）。结论血清endocan水平是预测男性吸烟者罹患冠心病的独立危险因子。

血浆sLOX-1水平与冠状动脉慢血流的相关性

目的探讨血浆可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)水平与冠状动脉慢血流的相关性。方法该研究共纳入82名冠脉慢血流患者(慢血流组,n=82)及184名冠脉血流正常者(对照组,n=184),采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定两组的血浆sLOX-1水平并比较,采用参照心肌梗死溶栓治疗后(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)血流帧数(TFC)评价冠脉血流速度。通过多元Logistic回归分析评价血浆sLOX-1水平与合并冠心病的独立相关性,采用Spearman相关分析评价血浆sLOX-1水平与平均TMI-TFC的相关性。结果慢血流组患者血清sLOX-1水平显著高于对照组[0.94(0.48-1.30)vs 0.47(0.39-0.86)ng/ml,P<0.001]。多元Logistic回归分析显示血浆s LOX-1水平是预测冠脉慢血流独立危险因子(优势比2.044,95%可信区间1.274-3.279;P=0.003)。Spearman相关分析结果显示,血浆sLOX-1水平与TIMI-TFC呈显著正相关(rs=0.315,P=0.004)。结论血浆sLOX-1水平与冠脉慢血流的发生及严重程度存在独立正相关,sLOX-1有望成为预测冠脉慢血流风险并对其进行危险分层的重要生物标记物。

血清sLOX-1水平与代谢综合征及冠心病的相关性

目的评价血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(s LOX-1)的水平是否与患者存在代谢综合征及冠心病相关。方法该横断面研究共纳入278例患者,分为四组:无代谢综合征和冠心病组(Met S-/CAD-,n=76),有代谢综合征无冠心病组(Met S+/CAD-,n=42),有冠心病无代谢综合征组(Met S-/CAD+,n=89),有代谢综合征和冠心病组(Met S+/CAD+,n=71)。用酶联免疫吸附法(ELISA)测量每组研究对象的s LOX-1水平。结果患者血清s LOX-1水平Met S+/CAD-组及Met S-/CAD+与Met S-/CAD-组相比,均明显升高(P<0.01),而Met S+/CAD+组血清s LOX-1水平较Met S+/CAD-组及Met S-/CAD+也明显升高(P<0.01)。多元Logistic回归结果显示血清s LOX-1水平与代谢综合征和冠心病均呈独立相关(P<0.01)。结论血清s LOX-1水平与患者患代谢综合征及冠心病独立相关,血清s LOX-1可能是对代谢综合征和冠心病进行早期诊断和风险评估的重要因子。

α-亚麻酸对哮喘大鼠模型气道炎症和FGF23表达的影响

目的探讨α-亚麻酸对哮喘大鼠模型气道炎症和成纤维细胞生长因子23(FGF23)表达的影响。方法选取50只SPF级雄性SD大鼠建立卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘SD大鼠模型,将大鼠随机分为对照组、OVA组(哮喘模型大鼠)、OVA+40 mg/kg ALA组(采用40 mg/kg的α-亚麻酸治疗哮喘模型大鼠)、OVA+80 mg/kg ALA组(采用80 mg/kg的α-亚麻酸治疗哮喘模型大鼠)和OVA+Dex组(采用0.25 mg/kg的地塞米松治疗哮喘模型大鼠),每组10只。各组大鼠均连续治疗处理7 d。通过HE染色评价肺组织形态。通过ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-17和IL-10的水平。采用自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。通过免疫组化、Western blot或qRT-PCR检测肺组织FGF23、FGFR4、Klotho、E-cadherin和α-SMA的表达。结果与OVA组相比,OVA+40 mg/kg ALA组、OVA+80 mg/kg ALA组和OVA+Dex组大鼠肺组织病变均明显减轻。与OVA组相比,OVA+40 mg/kg ALA组、OVA+80 mg/kg ALA组和OVA+Dex组大鼠BALF中IFN-γ和IL-10的水平升高,而IL-4和IL-17降低(均P<0.05)。与OVA组相比,OVA+40 mg/kg ALA组、OVA+80 mg/kg ALA组和OVA+Dex组大鼠血清中TC、TG和LDL水平降低,而HDL升高(均P<0.05)。与OVA组相比,OVA+40 mg/kg ALA组、OVA+80 mg/kg ALA组和OVA+Dex组大鼠肺组织E-cadherin的蛋白表达水平升高,而α-SMA降低(均P<0.05)。与OVA组相比,OVA+40 mg/kg ALA组、OVA+80 mg/kg ALA组和OVA+Dex组大鼠肺组织FGF23和FGFR4的mRNA和蛋白表达水平降低,而Klotho水平升高(均P<0.05)。结论α-亚麻酸可抑制哮喘大鼠的气道炎症和上皮-间充质转化、改善脂代谢,其机制可能是通过纠正Th1/Th2和Treg/Th17的失衡及调节FGF23-Klotho-FGFR4信号来实现的。

急诊PCI时应用替罗非班的临床观察

目的观察急诊冠脉内支架植入术时应用替罗非班,对前向血流TIMI分级情况及血小板活化功能的影响。方法选取急性ST段抬高性心肌梗死58例患者,按在急诊室是否应用替罗非班分为:常规用药组(未用替罗非班,n=23)及替罗非班组(应用替罗非班,n=35)。观察前向血流TIMI分级情况及服药前和服药后3d对血小板活化标志物的影响。结果替罗非班组微血管灌注改善,PCI术后无复流和慢血流现象减少,明显提高TIMI血流分级,而且对血小板活化标志物CD63,CD62p的抑制作用明显优于常规药物治疗组(P<0.05)。结论急诊PCI患者加用盐酸替罗非班可以改善TIMI血流分级,对血小板活化功能抑制优于常规药物治疗。

血清endocan水平与冠脉慢血流的相关性

目的探讨血清endocan水平与冠状动脉慢血流的相关性。方法该横断面研究共纳入82例冠脉慢血流患者(慢血流组,n=82)及184例健康对照者(对照组,n=184),血清endocan水平采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定,冠脉血流速度采用参照心肌梗死溶栓治疗后(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)血流帧数(TFC)测定。比较两组间血清endocan水平的差异,采用多元Logistic回归分析评价冠脉慢血流的独立危险因子,采用Spearman相关分析及多元线性回归分析评价各因素与TIMI-TFC的独立相关性。结果慢血流组患者血清endocan水平较对照组明显升高(1.05[0.60-1.38]vs 0.74[0.52-1.01]ng/ml,P=0.001),多元Logistic回归分析显示血清endocan水平是预测冠脉慢血流的独立危险因子(优势比2.312,95%可信区间1.329-4.019;P=0.003)。Spearman相关分析结果显示,血清endocan水平与冠脉平均TIMI血流帧数(TIMI frame count,TFC)呈正相关(r=0.311,P=0.004)。多元线性回归显示,在排除混杂因素干扰后,血清endocan水平与冠脉平均TFC仍具有独立相关性(t=2.872,P=0.005)。结论血清endocan水平是冠脉慢血流独立预测危险因子,与冠脉慢血流的严重程度存在正相关,这提示endocan可能成为预测冠脉慢血流发生风险的生物标记物。

CTRP6与冠状动脉慢血流的相关性及其可能机制

目的研究冠状动脉慢血流(CSF)现象与C1q肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)的相关性,并初步探讨CTRP6影响CSF的潜在分子机制。方法 CSF组患者42例,正常血流组(对照组)45例。根据校正的TIMI血流计帧法(c TFC)计算各支冠状动脉的TIMI帧数,采用生化法测定血清中CTRP6的含量。然后随机抽取6位CSF患者取外周血,分离培养其内皮祖细胞(EPCs),分别转染CTRP6的过表达载体pc DNA-CTRP6,3 d后用Dd U法检测EPCs细胞增殖对EPCs进行计数,并检测转染前后转染组和对照组的培养基中CSF相关因子基质金属蛋白酶(MMP)-2和内皮素(ET)-1的分泌量变化。结果 CSF组的CTRP6水平显著低于对照组〔(1.2±0.5)vs.(2.7±1.0)〕mg/L,P<0.01,Logistic回归分析表明血清CTRP6含量与CSF患者的c TFC呈负相关(β=-1.76),CTRP6是CSF的保护因素(OR=0.395);EPCs中过表达CTRP6引起EPCs数目显著上升(P<0.05),CSF负相关因子MMP-2水平被显著上调(P<0.01),正相关因子ET-1水平被显著下调(P<0.05)。结论 CSF组血清CTRP6水平低,血清CTRP6含量与CSF患者的c TFC呈负相关;CTRP6能够促进MMP-2和降低ET-1的分泌。

血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1水平与男性吸烟者合并冠心病的相关性研究

目的探讨血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（sLOX-1）水平与男性吸烟者合并冠心病相关性。方法该研究共纳人216例男性吸烟者，根据患者是否合并冠心病将所有患者分为冠心病组（n=95）及非冠心病组（n=121），比较两组的血清sLOX-1水平，通过Logistic回归分析评价血清sLOX-1水平与合并冠心病的相关性。结果冠心病组患者血清sLOX-1水平（678～2104ng／L，平均1652ng／L）显著高于非冠心病组患者（382～1334ng／L，平均829ng／L）（P〈0．01）。多元Logistic回归分析显示血清sLOX-1水平与男性吸烟者合并冠心病存在正相关性（优势比为2．136，95％可信区间为1．227～3．401，P〈0．01）。结论高血清sLOX-1水平是男性吸烟者罹患冠心病的独立危险因子，检测血清sLOX-1水平可能成为预测男性吸烟者合并冠心病风险的一种重要的手段。

老年高血压患者MMP-9、脂联素及踝臂指数与肥胖的关系

目的研究老年原发性高血压患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、脂联素（ADP）水平及踝臂指数（ABI）的变化与肥胖的关系。方法将入选的高血压患者分为高血压肥胖组和单纯高血压组，正常血压者分为单纯肥胖组和正常对照组。四组均采用ELISA法测定MMP-9及ADP，并测量ABI。比较四组MMP-9、ADP和ABI水平。结果①单纯高血压组、单纯肥胖组、高血压肥胖组的BMI、LDL—C均较对照组升高（P〈0．05）；单纯高血压组、高血压肥胖组的FPG、SBP、DBP均较对照组增高（P〈0．05）；单纯高血压组、高血压肥胖组的SBP、DBP、FPG较单纯肥胖组增高（P〈0．05）；单纯肥胖组、高血压肥胖组的BMI、TG、TC、LDL—C较单纯高血压组增高（P〈0．05）。②对照组、单纯高血压组、单纯肥胖组和高血压肥胖组MMP-9、ADP及ABI依次增高或降低，且单纯高血压组、单纯肥胖组、高血压肥胖组和对照组比较，单纯肥胖组、高血压肥胖组和单纯高血压组比较，高血压肥胖组和单纯肥胖组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。③多元线性回归分析显示，MMP-9与SBP、LDL呈正相关，ADP与SBP、DBP、BMI呈负相关，ABI与SBP、DBP、TG呈负相关。结论MMP-9、ADP、ABI在高血压、肥胖及动脉粥样硬化进程中有重要意义，对临床疾病评估有-定指导意义。

血浆omentin-1水平与高血压合并冠心病的相关性分析

目的本研究旨在评价血浆网膜素-1(omentin-1)的水平与高血压病患者合并冠心病的相关性。方法共纳入196名高血压病患者,根据患者是否合并冠心病将所有患者分为冠心病组(CAD+,n=106)及非冠心病组(CAD-,n=90),比较两组患者的血浆omentin-1水平,通过logistic回归分析评价血浆omentin-1水平与冠心病发生的相关性。结果 CAD-组患者的血浆omentin-1水平明显高于CAD+组[(20.14±4.68)ng/ml vs(11.21±3.35)ng/ml;P<0.01],多元logistic回归分析结果显示血浆omentin-1水平与高血压合并冠心病存在独立负相关性(优势比0.707,95%可信区间0.456-0.891;P<0.01)。结论低血浆omentin-1水平是高血压合并冠心病的独立危险因子,血浆omentin-1水平有望成为预测高血压患者罹患冠心病风险的重要的标记物。

稳定型心绞痛患者阿司匹林抵抗的相关因素及复方丹参滴丸的干预效果

目的分析稳定型心绞痛(SAP)患者发生阿司匹林抵抗的相关因素,观察复方丹参滴丸联合阿司匹林对血小板聚集率的影响。方法采用病例对照研究方法收集376例连续服用阿司匹林(100 mg/d)4周以上的SAP患者,根据血栓弹力图检测结果将患者分为阿司匹林抵抗组(72例)和阿司匹林敏感组(304例),比较组间各指标的差异。随后将阿司匹林抵抗组随机分为对照组(36例)和试药组(36例),对照组继续口服阿司匹林100 mg/d,试药组加服复方丹参滴丸10粒,3次/d。1个月后复查血小板聚集率,对结果进行统计分析。结果阿司匹林抵抗组空腹血糖、C反应蛋白、低密度脂蛋白胆固醇显著高于阿司匹林敏感组。对照组复查血小板聚集率较前无显著差异[(70±6)%vs.(71±4)%],试药组复查血小板聚集率较前显著下降[(69±6)%vs.(44±5)%,P<0.05]。结论糖尿病、低密度脂蛋白胆固醇、C反应蛋白是SAP患者阿司匹林抵抗的相关因素。复方丹参滴丸在降低阿司匹林抵抗患者的血小板聚集率方面具有一定疗效。

稳定型心绞痛患者血清sRAGE水平与冠脉病变复杂程度的相关性

目的本研究旨在探讨稳定型心绞痛(SAP)患者血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)水平与冠脉病变复杂程度的关系。方法本研究共纳入156例SAP患者。按照冠脉造影下冠脉病变复杂程度将所有患者分为简单病变组(n=71)及复杂病变组(n=85),采用酶联免疫吸附(ELISA)法测患者血清的sRAGE水平。结果复杂病变组血清sRAGE水平[(586.6±134.9)pg/ml]较简单病变组[(807.5±162.8)pg/ml]明显降低(P<0.01)。多元Logistic回归分析显示血清低sRAGE水平是SAP患者存在复杂病变的独立危险因子(优势比0.492,95%CI 0.211-0.921,P<0.05)。结论低血清sRAGE水平与SAP患者冠脉病变复杂程度独立相关,该研究表明血清sRAGE水平可能成为预测SAP患者冠脉斑块稳定程度的重要的血清学标记物。

非高密度脂蛋白胆固醇与急性冠脉综合征患者早期再发主要心血管事件的关系及其临床意义

目的分析非高密度脂蛋白胆固醇(Non-HDL-C)与急性冠脉综合征(ACS)患者早期再发主要心血管事件(MACE)的关系,探讨Non-HDL-C对ACS患者早期再发MACE的预测价值。方法采用病例对照研究方法,收集408例ACS患者入院时临床资料,通过院内观察和院外随访记录发病30 d内再发MACE的情况,根据是否再发MACE将患者分为事件组和非事件组,比较分析两组间各指标的差异。结果 1事件组的基线Non-HDL-C水平明显高于非事件组〔(3.6±0.7)mmol/L vs.(3.2±0.6)mmol/L,P<0.01〕。2多因素logistic回归分析显示NonHDL-C、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、红细胞分布宽度(RDW)、年龄是再发MACE的危险因素,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则是显著的保护因素。3受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示Non-HDL-C的曲线下面积为0.672(95%CI:0.610-0.735),当截断点选定3.31 mmol/L时,其预测效率最高,灵敏度为68.3%,特异度为64.3%。结论 Non-HDL-C是ACS患者早期再发MACE的危险因素,对ACS患者早期再发MACE有一定预测价值。

下调CXCR4基因对甲状腺癌细胞SW579增殖和侵袭能力的影响

目的探讨下调CXCR4基因对甲状腺癌细胞SW579体外增殖和侵袭能力的影响及可能的机制。方法用脂质体2000将CXCR4-siRNA瞬时转染SW579细胞(RNAi组),同时设立阴参组(只用脂质体而不用siRNA)和空白组(细胞不做任何处理)。通过MTT增殖实验和侵袭实验研究CXCR4对细胞增殖和侵袭能力的影响;采用Westernblot方法检测RNA干扰后ERK和AKT的磷酸化水平。结果 CXCR4表达水平下调后SW579细胞体外增殖能力减弱,增殖抑制率为32.2%。RNAi组侵袭的细胞数为13.8±1.48个,与空白组和阴参组比较显著减少(P<0.01)。Western-blot结果显示RNA干扰后总AKT和磷酸化AKT水平均下降,以磷酸化AKT下降最为显著,而ERK表达水平无明显变化。结论通过RNA干扰下调CXCR4的表达能够显著抑制SW579细胞的增殖和侵袭能力;CXCR4对SW579细胞增殖和侵袭的影响可能是通过调节PI3K/AKT信号通路实现的。

基因沉默SIRT7抑制缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖及迁移

目的研究沉默信息调节因子2相关酶类7(silent information regulator 2 related enzyme 7,SIRT7)对低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖和迁移的调控作用,并探讨可能的分子作用机制。方法体外培养HPASMCs建立低氧模型。通过慢病毒介导的短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默SIRT7在HPASMCs中的表达。实验分为4组:常氧对照组、低氧组、低氧+LV-sh-Ctrl组和低氧+LV-sh-SIRT7组。低氧+LV-sh-Ctrl组HPASMCs感染对照重组腺病毒LV-sh-Ctrl,然后进行低氧处理。低氧+LV-sh-SIRT7组HPASMCs感染表达SIRT7 shRNA的重组腺病毒LV-sh-SIRT7,然后进行低氧处理。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测SIRT7的mRNA表达水平。采用Western blotting检测SIRT7、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-βreceptorⅠ,TβRⅠ)、Smad2和Smad3的蛋白表达量。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine,EdU)实验检测细胞增殖。采用流式细胞术检测细胞凋亡。采用Transwell实验检测细胞迁移。结果与常氧对照组比较,低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组SIRT7表达水平显著升高(P<0.01),细胞增殖和迁移水平显著提高(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组比较,低氧+LV-sh-SIRT7组SIRT7表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖和迁移水平显著下降(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。与常氧对照组比较,低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达量显著增加(P<0.01);与低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组比较,低氧+LV-sh-SIRT7组TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达量显著减少(P<0.01)。结论基因沉默SIRT7通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制缺氧诱导的HPASMCs增殖和迁移。

miR-22-3p靶向抑制SIRT1信号通路加重慢性阻塞性肺疾病

目的探讨miR-22-3p是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。方法将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组,每组12只。对照组大鼠正常饲养,其他组大鼠建立香烟烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导的COPD大鼠模型。CS暴露当天开始,模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠分别尾静脉注射生理盐水、antagomir-NC、antagomir-miR-22-3p和SIRT1抑制剂EX527,每2周注射1次,CS暴露90 d内共注射6次。CS暴露90 d后,使用肺功能分析系统测定肺功能指标:最大自主分钟通气量(MVV)、0.3 s用力呼气量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)和最大呼气峰流速(PEF)。按照ELISA试剂盒测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平。按照试剂盒说明对肺组织进行苏木素伊红(HE)染色。按照试剂盒说明检测肺组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]。通过RT-PCR检测肺组织中miR-22-3p和SIRT1的mRNA水平。通过Western blot检测肺组织中SIRT1、核因子-κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65和叉头盒O3a(FoxO3a)蛋白表达。结果与模型组和antagomir-NC组比较,antagomir-miR-22-3p组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF升高,BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平降低,肺组织病变减轻,肺组织中SOD和CAT水平升高,MDA水平降低,miR-22-3p水平降低,SIRT1 mRNA水平升高,SIRT1和FoxO3a蛋白水平升高,p-NF-κB p65蛋白水平降低(均P<0.05)。与antagomir-miR-22-3p组比较,antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF降低,BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平升高,肺组织病变加重,肺组织中SOD和CAT水平降低,MDA水平升高,SIRT1 mRNA水平降低,SIRT1和FoxO3a蛋白水平降低,p-NF-κB p65蛋白水平升高(均P<0.05)。结论沉默miR-22-3p通过上调SIRT1的表达有效提高了COPD大鼠的肺功能并减轻了肺损伤。

脱氢表雄酮通过抑制NLRP3炎症体减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探究脱氢表雄酮(DHEA)防治心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用和机制。方法将SD大鼠分为假手术组(n=20)、模型组(n=17)、低DHEA组(n=16)、中DHEA组(n=18)和高DHEA组(n=18)。假手术组和模型组大鼠灌胃1%二甲基亚砜,共灌胃7 d。低DHEA组、中DHEA组和高DHEA组大鼠分别灌胃10,20,40 mg/(kg·d)的DHEA,共灌胃7 d,然后通过结扎冠状动脉左前降支建立MIRI大鼠模型。再灌注成功48 h后检测大鼠左心室射血分数(LVEF)和心率(HR)。然后对大鼠心肌组织进行TTC染色、苏木精和伊红(HE)染色和TUNEL染色,并检测大鼠血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。通过Western blot检测心肌组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、cleaved Caspase-1、Caspase-1和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠的LVEF降低,梗死面积升高,心肌组织出现明显损伤,TUNEL阳性率升高,血清CK-MB、LDH和cTnI水平升高,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高,血清MDA水平升高,血清SOD水平降低,心肌组织中NLRP3、cleaved Caspase-1、Caspase-1和ASC的蛋白相对表达量以及cleaved Caspase-1/Caspase-1比值升高(均P<0.05)。与模型组比较,低DHEA组、中DHEA组和高DHEA组大鼠的LVEF升高,梗死面积降低,心肌病变减轻,TUNEL阳性率降低,血清CK-MB、LDH和cTnI水平降低,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,血清MDA水平降低,血清SOD水平升高,心肌组织中NLRP3、cleaved Caspase-1、Caspase-1和ASC的蛋白相对表达量以及cleaved Caspase-1/Caspase-1比值均降低(均P<0.05)。与低DHEA组比较,高DHEA组大鼠的LVEF升高,梗死面积降低,心肌病变减轻,TUNEL阳性率降低,血清CK-MB、LDH和cTnI水平降低,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,血清MDA水平降低,血清SOD水平升高,心肌组织中NLRP3、cleaved Caspase-1、Caspase-1和ASC的蛋白相对表达量以及cleaved Caspase-1/Caspase-1比值均降低(均P<0.05)。结论DHEA预处理可有效减轻MIRI大鼠的心肌损伤和细胞焦亡,DHEA抑制NLRP3炎症体的激活可能是其防治MIRI的机制之一。

老年冠心病患者尿酸及颈动脉内膜中层厚度与其预后的关系

目的分析老年冠心病(CHD)患者尿酸、颈动脉内膜中层厚度(IMT)变化与其预后的关系。方法选取2017年9月~2019年9月本院收治的103例CHD患者(研究组),其中稳定性心绞痛(SAP)患者30例、不稳定心绞痛(UAP)患者36例,急性心肌梗死(AMI)37例,分别作为SAP组、UAP组和AMI组;同时纳入105例因疑似冠心病入院检查而结果正常者作为对照组。对比所有受试者中血尿酸、IMT、斑块指数的差异。所有CHD者均进行经皮冠状动脉介入治疗(PCI),多元Logistic回归分析影响CHD患者经PCI治疗后发生心血管事件的危险因素。Pearson分析血尿酸与IMT的相关性。结果研究组血尿酸水平、IMT、斑块指数均高于对照组(均P<0.05)。血尿酸水平、IMT、斑块指数由高到低依次为AMI组、UAP组、SAP组,两两比较均具有统计学意义(P<0.05)。103例CHD患者经PCI治疗后共出现42例心血管事件。BMI、病变支数、血脂、血肌酐、尿酸水平、IMT、斑块指数异常与CHD患者经PCI治疗后发生心血管事件显著相关(P<0.05);血脂、IMT、斑块指数异常为影响CHD患者经PCI治疗后发生心血管事件的多因素(P<0.05);IMT与血尿酸水平呈正相关(P<0.05)。结论老年CHD患者血尿酸水平与IMT正相关,两者均为影响患者PCI治疗后发生心血管事件的独立危险因素,可作为临床评估CHD患者预后的有效指标。

CUL1基因对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活和NLRP3炎症体通路的影响

目的:探究Cullin1(CUL1)基因对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞存活和核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症体通路的影响。方法:(1)将SH-SY5Y细胞分为NC组、NC-sh组、CUL1-sh组、NC-OE组和CUL1-OE组。使用Lipofectamine 2000试剂对细胞转染相应的慢病毒。(2)将SH-SY5Y细胞分为Control组、MPP+组和MPP++CUL1-OE组。MPP+组和MPP++CUL1-OE组细胞使用1 mmol/L的MPP+处理48 h,Control组细胞正常培养。通过MTT法检测细胞增殖,通过Annexin V-FITC/PI双染色法和TUNEL染色法检测细胞凋亡,通过qRT-PCR检测CUL1的mRNA水平,通过Western blot检测CUL1、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、cleaved caspase-1、白细胞介素(IL)-1β和IL-18蛋白水平。通过ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平。结果:(1)与NC组和NC-sh组比较,CUL1-sh组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量降低,相对细胞活力降低,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率升高,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平升高(P<0.05)。与NC组和NC-OE组比较,CUL1-OE组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量升高,相对细胞活力升高,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率降低,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平降低(P<0.05)。(2)与Control组比较,MPP+组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量降低,相对细胞活力降低,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率升高,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平升高(P<0.05)。与MPP+组比较,MPP++CUL1-OE组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量升高,相对细胞活力升高,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率降低,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平降低(P<0.05)。结论:CUL1可能通过抑制NLRP3炎症体激活促进MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活。