苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80µmol·L^(-1))LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1))SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50µmol·L^(-1)LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L^(-1)SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与0µmol·L^(-1)LA组比较,10、20、50和80µmol·L^(-1)LA组TM3细胞存活率明显降低(P<0.01);与0 mg·L^(-1)SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01);WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

丹红注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学影响的实验研究

目的:观察丹红注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响。方法:采用皮下注射肾上腺素加冰水浴法造成大鼠血瘀模型,观察丹红注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血小板聚集率的影响。结果:丹红注射液能降低急性血瘀证大鼠的全血粘度,降低大鼠的全血还原粘度、红细胞聚集指数、电泳指数,即能显著降低红细胞的聚集程度,明显改善血液粘度。结论:丹红注射液具有改善血液流变学、抗血小板聚集的作用。

牛磺酸对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

观察牛磺酸(taurine,Tau)在血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiacfibroblast,CFb)增殖过程中对一氧化氮(nitric oxide,NO)及蛋白激酶C alpha(p-PKCα)的影响,以探讨牛磺酸抑制CFb增殖的信号转导途径。胰酶消化法分离培养新生大鼠CFb,用Ang II诱导促进其增殖,采用MTT法检测细胞增殖;ELISA法测定I型胶原、III型胶原的含量;流式细胞仪检测细胞周期;硝酸还原酶法检测细胞上清液NO含量;Western blotting法检测p-PKCα含量。牛磺酸(40、80和160 mmol.L-1)可抑制Ang II诱导的CFb增殖及I型胶原、III型胶原合成增加(P<0.05,P<0.01),并使细胞G0/G1期百分率增加,S期细胞百分率降低(P<0.05,P<0.01)。牛磺酸明显抑制p-PKCα的蛋白表达,提高CFb NO含量,与Ang II组比较差别具有明显统计学意义(P<0.05,P<0.01)。牛磺酸通过降低p-PKCα的表达而提高CFb NO的含量,使CFb的增殖和胶原合成受到抑制。

医学院校教师教学发展述求方法与经验探索

加大对教师教学发展述求的关注力度,既是推动医学院校发展、医学教育改革的迫切需求,也是满足人们对优质医疗服务的需要、提升生命健康品质的关键因素,必须引起高度重视。1医学院校教师教学发展概念框架近些年来,国内外现代医学教育领域涌现出了很多富有价值的概念框架,为医学院校的教师教学发展提供了理论指导。

小鼠肝损害后3种保护作用的观察

采用熊胆注射液、茵陈汤及甘利欣等3种药物对四氯化碳（CCl_4）所致小鼠肝损害的保护作用进行了研究。结果表明,这3种药物均有对小鼠CCl_4所致肝损害引起血清及肝脏ALT升高有明显抑制作用（保护作用,P<0.01）,而各组间保护作用无明显差异（P>0.05）。

磁处理前后氯丙嗪安定作用的研究

应用电刺激法对磁化盐酸氯丙嗪溶液与普通盐酸氯丙嗪溶液的安定作用进行了研究。结果表明:磁化后盐酸氯丙嗪溶液的安定作用明显加强。提示:磁场对盐酸氯丙嗪的安定作用有加强作用。

颈动脉超声与冠状动脉造影对颈动脉粥样硬化的评估作用

目的:研究冠心病与颈动脉粥样硬化的相关性及颈动脉超声对动脉粥样硬化的评估作用。方法:对62例疑似冠心病的患者,行颈动脉超声,观察动脉壁厚度,有无斑块及斑块形态、大小,有无狭窄及阻塞和冠状动脉造影检查,观察前降支、左回旋支和右冠状动脉。结果:心绞痛组的颈动脉粥样硬化等级积分,Crouse积分和斑块数(个)分别为6.78±4.27,5.21±3.94,2.21±1.64,心肌梗死组的颈动脉粥样硬化等级积分,Crouse积分和斑块数分别为8.16±4.11,5.72±4.03,2.83±1.84,均明显高于非冠心病组,差异有显著性意义(t=2.95,1.85,2.52,P<0.01～0.001),冠状动脉单支和多支病变组与非冠心病组的颈动脉粥样硬化指标差异亦有显著性意义(t=2.65～3.16;P<0.001～0.0001);在冠状动脉造影呈阴性的50例中,41例颈动脉超声有动脉硬化斑块,9例无动脉硬化斑块,敏感性为82%,特异性为75%,总的诊断符合率为81%。结论:测定颈动脉粥样硬化斑块的总积分对冠心病的疗效评价具有重要的参考价值。

越桔原花青素对大鼠心肌纤维化作用的影响

目的探讨越桔原花青素(procyanidin from Vaccini-um,PC)对大鼠心肌纤维化作用的影响及其机制。方法体内实验以异丙肾上腺素(isoprenaline,Iso)5 mg.kg-1.d-1背部皮下注射,构建大鼠心肌纤维化模型,同时以灌胃方式给予PC 100、200、400 mg.kg-1.d-1,分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、丙二醛(ma-londialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)活性;电镜观察心肌超微结构变化。体外实验采用细胞培养技术以血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)建立新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖模型,给予25、50和100 mmol.L-1的PC干预。采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖;ELISA法测定Ⅰ、Ⅲ胶原及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的含量。结果PC可剂量依赖性地降低心肌组织中Hyp、MDA含量、增强SOD活性,同Iso组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),电镜结果显示:PC可缓解Iso所导致的心肌损伤。体外实验部分PC(25、50和100 mg.L-1)可抑制AngⅡ诱导的CFb增殖、胶原合成增加及TGF-β1蛋白含量增多,与AngⅡ组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论PC可通过抗氧化作用,抑制CFb的增殖及胶原的合成,进而抑制大鼠心肌纤维化,对心肌具有一定的保护作用。

芩丹扶正胶囊对微波辐射致大鼠心肌和肝损伤超微结构的影响

目的探讨芩丹扶正胶囊对微波辐射致大鼠心肌和肝脏损伤超微结构的影响。方法 18只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组、微波辐射组和微波辐射加药物治疗组,每组6只。正常对照组不予任何处理;微波辐射组采用微波辐射装置辐射6min,照射平均功率密度为100mW/cm2;微波辐射加药物治疗组照射条件同微波辐射组,微波辐射后6h开始用芩丹扶正胶囊灌胃,每次2mL(相当于4.75g生药),每天1次,连续7天。7天后处死各组大鼠,冰浴下立即取心脏心尖部和肝右叶新鲜组织,制作常规透射电镜标本并观察。结果与正常对照组比较,微波辐射组的心肌和肝细胞的细胞核与细胞器均有不同程度损伤;与微波辐射组比较,芩丹扶正胶囊治疗组的心肌和肝细胞体积正常,细胞核和细胞器保持良好,接近正常对照组细胞的形态。结论芩丹扶正胶囊对微波辐射致大鼠心肌和肝超微结构损伤有保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化、改善心肌和肝细胞的代谢有关。

关于亚健康的几点认识

近年来 ,对在身体上、心理上没有疾病 ,但主观上却有许多不适症状的“亚健康”现象越来越引起人们的关注。由于亚健康是一个新的医学概念 ,为此 ,本文着重讨论了什么是亚健康 ,亚健康在生理和心理的表现、形成原因、危害及其如何预防 ,以引起人们的高度重视 ,在日常生活中注意加强保健与自我调适 ,建立起健康的生活方式 ,使自己早日从亚健康状态中走出来 ,成为一个真正的健康人。

茶多酚抗衰老的研究进展

具有抗衰老作用的中药主要有芦荟、山楂叶总黄酮、当归、麦冬、附子、旱莲草、蒺藜皂苷、葛根素等。茶多酚（TP）是从鲜茶叶中分离提取的多酚类复合体,其主要成分为黄烷醇（主要是儿茶素）、花色素（包括茶黄素、茶黑素等）、黄酮及黄酮醇、酚酸及缩酚酸4类化合物。TP是公认的天然抗氧化剂,具有降血脂、降血压、降血糖、抗肿瘤、防止脑梗死、抗血栓、抗突变、抗辐射、抗衰老等多种作用［1］

杜仲木质素对自发性高血压大鼠脑卒中的治疗作用

目的观察杜仲木质素对自发性高血压大鼠脑卒中的治疗作用。方法通过自发性高血压大鼠摄入高浓度盐水建立脑卒中模型。然后将实验动物随即分成6个组:空白组、模型组、杜仲木质素低(1 mg/kg)、中(2 mg/kg)、高(3 mg/kg)剂量组、阳性药尼莫地平组,每天肌注相应剂量的药物,观察脑卒中行为学评分、收缩压和心率、存活时间和死亡率、体重变化等指标。结果杜仲木质素对自发性高血压大鼠脑卒中症状有改善作用;可降低实验动物血压、延长自发性高血压大鼠存活时间,降低死亡率,同时使其体重有所改善。结论杜仲木质素对自发性高血压大鼠脑卒中有一定控制和治疗作用。

鹿茸多肽对微波辐射后小鼠学习记忆的影响研究

研究鹿茸多肽(pilose antler peptide)对微波辐射后小鼠学习记忆的影响,并探讨其作用机制。采用2 450MHz、平均功率密度为10.0 m W/cm2微波照射小鼠90 min/d,连续28 d,建立小鼠微波辐射致学习记忆障碍模型。同时,微波照射后皮下注射鹿茸多肽25、50、100 mg/kg,连续给药28 d,29 d始采用Y迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,34 d Y迷宫实验结束后断头处死小鼠,酶免法检测脑组织中天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、S100B的水平,酶免法检测脑组织中Na^+-K^+-ATP酶、单胺氧化酶-B(MAO-B)的活性,黄嘌呤氧化酶法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶免法检测脑组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,并取脑组织做HE(苏木精-伊红染色法)染色,光镜下观察脑海马齿状回区组织结构的形态学变化。结果表明,与对照组相比,照射组小鼠在Y迷宫实验中错误逃逸次数增加,脑组织中Asp、Glu含量明显降低、GABA含量明显增高,脑组织中MAO-B活性增高而Na^+-K^+-ATP酶、SOD活性降低,脑组织中S100B、TNF-α含量增高;与照射组比较,鹿茸多肽50、100 mg/kg减少Y迷宫错误逃逸次数;鹿茸多肽25、50、100 mg/kg增加脑组织中Asp及Glu含量,降低MAO-B活性;鹿茸多肽50、100 mg/kg降低脑组织中GABA、S100B、TNF-α含量,增强脑组织中SOD、Na^+-K^+-ATP酶活性(p<0.05或p<0.01)。病理可见照射组海马齿状回(DG)结构部分细胞体积变大,胞浆疏松、淡染,部分细胞核固缩状态;鹿茸多肽100 mg/kg组较照射组有所改善。实验证明鹿茸多肽(50、100mg/kg,连用28 d)对微波辐射所致小鼠的学习记忆障碍有一定的改善作用,机制可能与鹿茸多肽通过抗炎作用而减弱氧化应激、改善神经递质水平有关。

苦参总黄酮对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸损伤的影响

目的:研究苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸损伤的影响及其机制。方法:昆明小鼠分为4组:正常对照组、模型组、苦参总黄酮组及HCG组,采用醋酸铅(40 mg/kg)连续灌胃7d建立雄性小鼠睾丸损伤模型,造模第2天始,苦参总黄酮组灌胃苦参总黄酮600 mg/kg,HCG组腹腔注射HCG 500IU/kg,连续30 d。观察雄性小鼠的精子活力、精子畸形率;睾丸组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)等指标;并观察睾丸组织的病理改变。结果:与正常对照组比较,模型组精子活力显著降低,精子畸形率增高,睾丸组织中SOD和NOS的活性降低、NO含量减少(P<0.05或P<0.01),模型组睾丸组织病理表现生精上皮显著变薄,生精细胞层次和数量均减少,生精小管腔可见少量精子形成。与模型组比较,苦参总黄酮组的精子活力相应增高,精子畸形率降低,睾丸组织中SOD、NOS的活性增高、NO含量增加(P<0.05或P<0.01),因醋酸铅所致的睾丸组织损伤明显改善。结论:苦参总黄酮对醋酸铅所致雄性小鼠睾丸损伤有一定保护作用,作用机制可能与抗氧化及影响NOS-NO系统有关。

生殖医学专业课程体系的构建

生殖医学是近年迅速发展起来的一门新兴的综合性学科。与生殖医学研究相比,我国生殖医学教育明显滞后,各院校的课程体系各异,制约了我国生殖医学教育的发展。文章从培养目标的确立、课程体系的构建和专业课程的设立,论述了生殖医学专业课程体系的构建,对生殖医学教育的发展具有重大的现实意义。

五味子多糖对人结肠癌HT29细胞增殖的抑制作用及其机制

目的探讨五味子多糖含药血清对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响及作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度的五味子多糖含药血清对细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态和细胞核的改变;流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果五味子多糖含药血清对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性。五味子多糖含药血清作用72 h后,荧光显微镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测凋亡。结论五味子多糖含药血清对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关。

Toll样受体4接头分子对乳酸诱导巨噬细胞M2极化的促进作用及其机制

目的:探讨Toll样受体4 (TLR4)接头分子髓样分化因子88 (MyD88)和诱导β干扰素的Toll/白细胞介素1 (IL)受体(TIR)结构域衔接蛋白(TRIF)基因敲除后对乳酸诱导巨噬细胞极化的促进作用,初步阐明乳酸免疫调控的可能机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞Raw264.7,采用慢病毒法构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,定向敲除MyD88和TRIF基因(MyD88-KO组和TRIF-KO组),设未感染的Raw264.7细胞为对照组,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blotting法检测基因敲除效果。实验分为未处理Raw264.7细胞组、Raw264.7+乳酸组、MyD88-KO组、MyD88-KO+乳酸组、TRIF-KO组和TRIF-KO+乳酸组。15 mmol·L^(-1)乳酸诱导24 h后进行各指标检测。RT-qPCR法检测各组细胞中M2极化表型分子巨噬细胞甘露糖受体CD206和精氨酸酶1(Arg1) mRNA表达水平,光学显微镜下观察各组细胞形态表现,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞上清中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、γ干扰素(INF-γ)和白细胞介素10 (IL0)水平,Western blotting法检测各组细胞中核因子κB (NF-κB)信号通路相关蛋白表达水平。采用Autodock软件将乳酸分别与TLR4、MyD88和TRIF分子对接并观察其结合情况。结果:采用CRISPR/Cas9技术进行基因定向敲除后,与对照组比较,MyD88-KO组和TRIF-KO组细胞中MyD88和TRIF mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。乳酸作用24 h后,与未处理Raw264.7细胞组比较,Raw264.7+乳酸组细胞中M2极化标志物CD206和Arg1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与MyD88-KO组比较,MyD88-KO+乳酸组细胞中CD206和Arg1 mRNA表达水平均升高(P<0.05);与TRIF-KO组比较,TRIF-KO+乳酸组细胞中CD206和Arg1 mRNA表达水平均降低(P<0.05)。细胞形态表现,Raw264.7+乳酸组细胞表现出M2极化形态,即体积增大、明显突起伪足和偏锥形细胞比例增加;MyD88-KO+乳酸组细胞同样表现出M2极化形态变化;TRIF-KO+乳酸组细胞形态变化不明显。ELISA法检测,与未处理Raw264.7细胞组比较,Raw264.7+乳酸组细胞中TNF-α水平明显降低(P<0.05),INF-γ和IL0水平差异无统计学意义(P>0.05);与MyD88-KO组比较,MyD88-KO+乳酸组细胞中TNF-α水平明显降低(P<0.05),INF-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),IL0水平明显升高(P<0.05);与TRIF-KO组比较,TRIF-KO+乳酸组细胞中TNF-α水平明显升高(P<0.05),INF-γ和IL0水平差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting法检测,与未处理Raw264.7组比较,Raw264.7+乳酸组、MyD88-KO组、MyD88-KO+乳酸组、TRIF-KO组和TRIF-KO+乳酸组细胞中TLR4蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05),Raw264.7+乳酸组细胞中核因子κB抑制蛋白α (IκB-α)和p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与MyD88-KO组比较,MyD88-KO+乳酸组细胞中IκB-α和p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与TRIF-KO组比较,TRIF-KO+乳酸组细胞中IκB-α和p65蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。分子对接,乳酸分别与TLR4、MyD88和TRIF形成氢键数为2、4和4,结合能分别为-2.72、-3.24和-3.66。结结论论:乳酸作用巨噬细胞后,可通过调控TRIF抑制IκB-α活性进而抑制NF-κB,促进M2极化。

血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病关系的研究

目的 :研究血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性与冠心病的关系。方法 :应用聚合酶链式反应 (PCR)检测ACE基因第 16内含子I/D多态性 ,并计算基因型和等位基因频率。结果 :在 5 1例冠心病组中ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 35 %和 6 1% ,83例正常对照组中的ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 16 %和 45 % ,两者相比具有显著性差异。结论 :ACE基因DD基因型可能是冠心病发生发展过程中重要的危险因素之一。