StyS激酶自磷酸化对Pseudomonas putida B3中靛蓝生物合成的调节作用

在恶臭假单胞菌Pseudomonas putida B3中,靛蓝生物合成关键酶基因styAB上游存在一个二元调控系统StyS-StyR。StyS蛋白属于激酶家族,是磷酸化信号转导的重要媒介,但激酶StyS的自磷酸化传导机制对靛蓝生物合成的调节作用尚未探明,因此,研究以Pseudomonas putida B3中激酶蛋白StyS作为研究对象,发现了两个磷酸化结合位点,构建了磷酸化位点突变株。通过分析野生菌株P.putida B3、styS基因缺失菌株P.putida B3-ΔstyS、styS基因回补菌株P.putida B3-ΔstyS-8和磷酸化位点突变株P.putida B3-ΔstyS-1之间的靛蓝产量及酶活发现,P.putida B3产量为10.14 mg/L,P.putida B3-ΔstyS-8产量为3.63 mg/L,磷酸化位点突变菌株无激酶活性且失去了产生靛蓝的能力。结果表明,StyS自磷酸化作用在靛蓝发酵体系中起重要作用。研究结果将为靛蓝生物合成途径的进一步研究提供参考。

水飞蓟果托总黄酮的纯化工艺及其对油脂的抗氧化研究

通过大孔树脂吸附率与解吸率的测定,筛选适合对水飞蓟果托总黄酮进行纯化的最佳树脂类型;通过研究不同因素对树脂吸附和解析效果的影响,确定水飞蓟果托总黄酮的纯化工艺,并研究其对油脂的抗氧化作用。研究结果表明,AB-8型大孔树脂最适合水飞蓟果托中总黄酮的纯化,吸附平衡时间为4h,解析平衡时间为3h;在水飞蓟果托总黄酮质量浓度3.98mg/ml,pH5.5,吸附温度50℃,解吸温度60℃,用体积分数70%的乙醇进行解析时,果托总黄酮的纯化效果较好。在上述条件下制得的果托总黄酮产品为黄色粉末,回收率为82.04%,纯度为68.07%。油脂抗氧化试验结果表明,添加2mg水飞蓟果托总黄酮比添加2mg维生素C抗氧化效果明显。