Twist在结直肠癌中的表达及在上皮间质转化中的作用

目的观察结直肠癌中Twist基因的表达以及与结直肠癌恶性生物学行为的相关性。方法采用免疫组化S-P法及逆转录-聚合酶链反应检测10例正常结直肠粘膜、25例结直肠癌癌灶中心及癌灶边缘组织、9例淋巴结转移灶中Twist、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin表达水平。结果 Twist的表达与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤原发部位、分化程度无统计学差异(P>0.05),与有无淋巴结转移、Dukes分期、TNM分期有统计学差异(P<0.05)。4种蛋白在以上4种组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Twist、Vimentin、N-cadherin在结直肠癌灶边缘组织和淋巴结转移灶中的表达高于正常结直肠粘膜和癌灶中心中的表达(P<0.05)。E-cadherin在正常结直肠粘膜和癌灶中心中的表达显著高于结直肠癌灶边缘组织和淋巴结转移灶中的表达(P<0.05)。Twist、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin在4种组织中阳性表达率与其相应mRNA的表达水平呈显著正相关(P<0.05)。在结直肠癌及淋巴结转移灶中,E-cadherin表达水平与Twist呈负相关(r=-0.263,P<0.05;r=-0.605,P<0.05),Vimentin的表达水平与Twist呈正相关(r=0.214,P<0.05;r=0.470,P<0.05),N-cadherin的表达水平与Twist呈正相关(r=0.381,P<0.05;r=0.581,P<0.05),而E-cadherin表达水平与Vimentin呈负相关(r=-0.562,P<0.05;r=-0.591,P<0.01),E-cadherin表达水平与N-cadherin呈负相关(r=-0.267,P<0.05;r=-0.617,P<0.01)。结论 Twist可能通过调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymail transition,EMT)从而参与了结直肠癌的浸润、转移等过程,所以结直肠癌中Twist的表达及EMT发生可能成为独立于TNM分期以外判断结直肠肿瘤预后及浸润转移的生物学指标。

结肠癌细胞系SW620中ALDH1^(br)细胞特性的研究

目的检测结肠癌细胞系SW620中是否存在肿瘤干细胞样细胞。方法按照ATCC标准培养SW620细胞,用AL-DEFLUOR试剂盒联合荧光激活细胞分类术(FACS)分选ALDH1br细胞,无血清培养2周后再次进行FACS检测,观察ALDH1br细胞自我更新及增殖情况;检测ALDH1br细胞血清诱导1周后分化标志物CK20含量、ALDH1活性及耐药蛋白ABCG2含量的变化;Transwell小室实验检测ALDH1br细胞的迁移能力。结果经FACS检测,SW620中ALDH1br细胞比例为3.59%;无血清培养2周后,ALDH1br细胞增加至43.0%±2.2%,且不对称性分裂为ALDH1br细胞和ALDH1-细胞;经血清诱导1周后,ALDH1br细胞分化标志物CK20含量明显增高(0.64±0.040、.01±0.02,P<0.05),且ALDH1br细胞比例下降(1.73%);分选后ALDH1br细胞的耐药蛋白ABCG2含量也明显增加(0.27±0.03、0.90±0.05,P<0.05);ALDH1br细胞比普通的SW620细胞具有更强的迁移能力(细胞穿孔数分别为58.5±3.6、9.4±2.1,P<0.05)。结论运用ALDEFLUOR试剂联合FACS从结肠癌细胞系SW620中分选出的ALDH1br细胞具有肿瘤干细胞样特征。

下消化道大出血的诊断及治疗进展

下消化道大出血作为消化系统的一种常见疾病,可导致较高的病死率。在下消化道大出血的诊断中,出血部位的诊断仍属难点,其诊断方法的应用更多地取决于医师的技能和经验。科学技术的进步拓宽了下消化道出血诊断和治疗措施的选择范围。因此,医师对不同检查及治疗方式的熟练掌握显得尤为重要,以便能够正确地对下消化道大出血实施诊疗。

胰十二指肠切除术后胰瘘发生原因及防治分析

目的探讨胰十二指肠切除术(PD)后胰瘘发生原因及其防治方法。方法回顾性分析67例PD患者的临床资料,对其术后发生胰瘘的12例患者进行临床分析。结果 67例PD患者发生术后胰瘘12例,发生率为17.9%。12例胰瘘患者中10例经保守治疗后痊愈,有效率为83.3%,2例患者经二次手术治疗,其中1例患者死亡(8.3%)。结论PD后胰瘘的发生率和病死率仍较高。术前正确的评估、适宜的胰肠吻合方式,术中精细合理的操作和术后积极处理相关并发症是减少术后胰瘘的关键因素。

人结直肠癌细胞株来源的HCT116肿瘤细胞球的转移相关特性

目的:无血清悬浮培养生成HCT116肿瘤细胞球,检测球中CD133表面标志分子的细胞定位,以及CD133+细胞所占的比例,并探索肿瘤细胞球发生上皮-间质转化与其转移能力之间的可能联系。方法:HCT116细胞在添加了细胞生长因子的无血清培养液(serum-freemedium,SFM)中悬浮培养生成细胞球,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测CD133表面标志分子的细胞定位及细胞球中CD133+细胞的含量。Transwell小室实验、免疫荧光及反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法分别检测细胞球的体外转移能力以及上皮-间质转化关键分子的表达情况。结果:HCT116细胞球中CD133表面标志分子定位于各个球层面的细胞膜,并且CD133+细胞比例显著增多。细胞球高表达间质化分子N-cadherin及Vimentin,而上皮化分子E-cadherin表达水平下降,并具有更强的转移能力。结论:HCT116细胞球中富含CD133+细胞,CD133表面标志分子定位于细胞膜,细胞球可能通过上皮-间质转化而获得更强的转移能力。