胶质母细胞瘤恶性进展中不同细胞亚群的动态轨迹和细胞通讯网络

目的:探索胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)恶性进展过程中细胞亚群的动态轨迹以及免疫细胞亚群之间的通讯网络,结合GBM患者的转录组数据和临床信息,挖掘GBM恶性进展过程中的关键风险标志物,以期为该疾病的治疗和预后提供科学依据。方法:基于单细胞测序数据分析方法,构建GBM恶性进展中的细胞亚群图谱,利用Monocle2技术构建GBM恶性进展中肿瘤细胞亚群的动态进展轨迹,基于基因富集分析,挖掘肿瘤细胞亚群随GBM恶性进展中显著变化的基因所富集的生物学过程,利用CellChat软件识别不同免疫细胞亚群间的复杂通讯网络,通过生存分析识别GBM恶性进展中影响患者预后的关键风险分子标记物。结果:单细胞测序数据分析识别出6种不同的细胞类型,包括淋巴细胞、周细胞、少突神经胶质细胞、巨噬细胞、胶质瘤细胞、小胶质细胞,单细胞数据集中了27151个细胞,其中包含3881个来源于低级别胶质瘤患者的细胞,10166个来源于新诊断GBM患者的细胞,13104个来源于复发性胶质瘤患者的细胞。胶质瘤细胞亚群逆时序分析提示,胶质瘤细胞亚群在恶性进展中存在着明显的细胞异质性;免疫细胞亚群的细胞相互作用分析揭示,GBM恶性进展中不同免疫细胞亚群之间的通讯网络共识别出22条具有生物学意义的配体-受体对,涉及12条通路;生存分析识别出8个与GBM患者预后密切相关的基因,其中SERPINE1、COL6A1、SPP1、LTF、C1S、AEBP1、SAA1L是GBM患者的高风险基因,ABCC8是GBM患者的低风险基因。结论:深入揭示了GBM恶性进展中胶质瘤细胞亚群的动态变化以及免疫细胞亚群之间的通讯模式,对于理解GBM的复杂生物学过程具有重要意义,为GBM的精准医疗和治疗决策提供了科学依据,也为GBM患者更准确的预后评估提供了新的线索。

朋友之间能相互开玩笑吗?

开玩笑能给人带来快乐,但也要掂量开什么玩笑。一次,我和好朋友徐海杰打篮球时,我跟他开玩笑说,这一局如果我输了,就给他十元钱。没想到我真的输了,当时他也没说什么,不料三天后,他真的问我要十元钱,我当时一楞,随后才想起前两天的事,我解释那是开玩笑,没想到他不高兴地说了一句:“不讲信用。”接连几天都不理我!

光核桃AmRanBP1重组蛋白表达特性及其抗逆性初步研究

光核桃为蔷薇科桃属落叶乔木,具有耐寒、耐旱等优良特性。为探究RanBP1蛋白在光核桃[Amygdalus mira(Koehne)]中的表达条件及其在逆境胁迫防御反应中的调控作用,利用数据库中碧桃(Prunus persica)的基因序列采用同源克隆得到AmRanBP1。生物信息学分析结果表明,该基因开放阅读框ORF全长696 bp,编码231个氨基酸,无跨膜区域,为亲水性稳定蛋白,无信号肽结构。蛋白序列分析和系统进化分析表明,AmRanBP1与其他植物的RanBP1蛋白具有较高的同源性,例如苹果(Malus domestica)、大豆(Glycine max)。构建了pET-21a-AmRanBP1融合表达载体,优化了蛋白表达条件,即在40℃、IPTG浓度为2.00 mmol·L^(-1),诱导4.0 h时可获得较高浓度的重组蛋白,对表达产物进行纯化用以制备单克隆抗体。最后,通过模拟各种非生物胁迫条件考察AmRanBP1转化菌株在大肠杆菌中的表达模式,发现各种胁迫条件下转AmRanBP1的菌株抗逆性均优于空载体,并且在高温、NaCl与CuSO_(4)胁迫下优势显著,进一步表明RanBP1可能在光核桃的防御反应中发挥作用。

高压氧治疗对局灶性脑梗死大鼠的神经保护作用

目的观察单次9 h高压氧(hyp erbaric oxygen,HBO)治疗对局灶性脑梗死大鼠凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMPo)的影响,探讨HBO治疗的神经保护作用。方法108只SD大鼠制作永久性大脑中动脉闭塞模型,随机分为对照组和HBO组,每组各54只。造模成功3 h后,HBO组实行HBO干预,压力0.2 MPa持续9 h,对照组呼吸常压空气。采用Garcia评分评估大鼠神经功能,比较两组造模后13 h、24 h和72 h神经功能改善情况,并在各时间点检测大鼠缺血半暗带脑组织凋亡细胞数、线粒体和细胞核AIF表达及MMPo水平。结果①神经功能评分:HBO组13 h(P<0.001)、24 h(P=0.04)神经功能评分改善比对照组更明显。②凋亡细胞数:HBO组13 h、24 h凋亡细胞数较对照组更少(均P<0.001)。③AIF在线粒体和细胞核的表达:13 h、24 h、72 h各时间点HBO组AIF在线粒体的表达均较对照组多(均P<0.001);各时间点HBO组AIF在细胞核的表达均较对照组少(均P<0.001)。④MMPo:各时间点HBO组MMPo均高于对照组(均P<0.001)。结论HBO治疗可改善大鼠神经功能,稳定MMPo,抑制AIF由线粒体向细胞核转移可能是其神经保护作用的机制之一。

高压氧对人胶质瘤172细胞生存的影响

目的:观察高压氧(HBO)对人胶质瘤172细胞生存的影响。方法:常规培养的人胶质瘤172细胞随机分为对照组和HBO组,对照组每日实验舱中常压0.1MPa空气放置90min,其余时间正常培养,HBO组每日HBO暴露1次,将细胞置实验舱中,氧气加压,15min升压至0.2MPa,稳压1h,减压15min,其余时间培养同对照组,HBO暴露10次。第11d取材,观察2组细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞凋亡比例、细胞生长周期,电镜观察细胞超微结构。结果:HBO组细胞计数明显少于对照组(P=0.01),HBO组早期和晚期凋亡细胞比例均明显高于对照组(均P<0.01)。2组G1期和S期细胞比例比较差异均无统计学意义,HBO组G2期细胞比例较对照组明显减少(P<0.01)。电镜观察到HBO组肿瘤细胞较对照组突起短小、减少。结论:HBO减慢了人胶质瘤172细胞生长,促进细胞凋亡,使更多的细胞阻滞在S期,使与肿瘤的转移、复发有关的突起变短、减少,显示了HBO对肿瘤细胞的抑制作用。

缺血性卒中高压氧治疗的研究现状及展望

从1963年国内外学者就开始了高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗卒中,特别是缺血性卒中的研究工作。缺血性卒中是指脑组织局部供血动脉因血栓形成或栓子脱落等发生阻塞,供血中断,造成脑组织细胞缺血缺氧,导致能量代谢障碍、钙超载、磷酸酶及蛋白酶激活、花生四烯酸积聚、细胞骨架崩塌,最终脑组织缺血缺氧坏死。

光核桃AmUspA蛋白的表达特性及功能研究

为探究UspA蛋白在光核桃(Amygdalusmira Koehne)中的表达条件及其在逆境胁迫防御反应中的调控作用,利用数据库中碧桃(Prunus persica)的基因序列设计一对特异性上下游引物,通过PCR扩增技术从光核桃叶片中克隆出普遍胁迫蛋白基因AmUs⁃pA。生物信息学分析结果表明:该基因ORF全长528bp,编码175个氨基酸,无跨膜区域,为亲水性稳定蛋白。蛋白序列分析和系统进化分析表明,AmUspA具有Usp家族典型的UspA结构域,并且与其他植物的Usp蛋白具有较高的同源性。随后构建了pET 21a-AmUspA融合表达载体,优化了蛋白表达条件,即在37℃、IPTG浓度为0.1mmol·L^(-1),诱导8h时可获得较高浓度的重组蛋白,经纯化脱盐后共得到浓度为0.91mg·mL^(-1)的融合蛋白25mg并制备抗体。最后,通过模拟各种非生物胁迫条件考察AmUspA转化菌株在大肠杆菌中的表达模式,发现各种胁迫条件下转AmUspA的菌株抗逆性均优于空载体,并且在400mmol·L^(-1)NaCl、40mmol·L^(-1)NaHCO_(3)、10μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)、100mmol·L^(-1)甘露醇胁迫下优势显著,进一步表明UspA可能在光核桃的防御反应中发挥作用。该研究为探索AmUspA蛋白的生物学作用奠定了基础,同时也为优化桃属种质资源提供了新的思路。

陌夜蛾性信息素类似物的合成及其生物活性

【背景】陌夜蛾(Trachea atriplicis)作为一种重要食叶害虫,近年来,由于其数量以及危害程度的不断增加,已对我国华北、华东等地区的农林业造成重大危害,尤其是对荞麦等作物的产量构成严重威胁。【目的】以陌夜蛾性信息素主要组分顺-11-十六碳烯乙酸酯(Z11-16:Ac)为母体结构,合成6种具有不同生物活性的性信息素类似物,为陌夜蛾的综合治理开辟一种新型环境友好的防治策略。【方法】选用性信息素组分的前体顺-11-十六碳烯-1-醇(Z11-16:OH)为原料,在缚酸剂和催化剂的作用下,与酸酐或酰氯发生反应,通过硅胶柱层析进行分离纯化后,合成性信息素类似物共6种。包括极性基团为氨基甲酸酯的性信息素类似物M3、M4,极性基团末端引入不饱和键的性信息素类似物M5、M6,以及卤素原子修饰的性信息素类似物M7、M8。通过触角电生理试验(EAG)测定不同剂量性信息素类似物直接刺激下的EAG响应值,并于北京市延庆区进行田间试验对性信息素类似物的生物活性进行验证。【结果】EAG试验表明,类似物M1、M2、M6、M7和M8具有显著的剂量-效应关系。其中陌夜蛾雄蛾触角对类似物M7的响应最为强烈,在100μg剂量下响应值达2.36 mV,是同剂量条件下Z11-16:Ac响应值的77.9%。而M3—M5在10—1000μg剂量下,与性信息素组分Z11-16:Ac的相对响应值之间存在显著差异(P<0.05),M5的EAG响应整体活性表现较差,最高相对响应值仅为性信息素组分的21.2%。田间试验表明,类似物M1和M5在添加剂量为1μg时,平均诱捕量分别为38.00和35.67头/诱捕器/15 d,与性信息素对照相比存在显著差异;类似物M7在添加剂量为100μg时,平均诱捕量为29.67头/诱捕器/15 d,显著高于性信息素对照;类似物M4具有潜在的抑制活性,随着其添加剂量的增加,平均诱捕量逐渐减少,当添加剂量为1000μg时,平均诱捕量仅有3.33头/诱捕器/15 d。【结论】经过EAG试验和田间试验验证,类似物M1、M5和M7具有显著的增效活性,可以用作性信息素的增效剂,类似物M4具有显著的抑制活性,可以用作性信息素的抑制剂。研究结果可为使用性信息素类似物绿色防控陌夜蛾提供理论依据。

宽胫夜蛾性信息素类似物的合成及其生物活性

【背景】近年来,随着新引种作物藜麦种植面积的显著增长,取食藜属植物的宽胫夜蛾(Protoschinia scutosa)逐渐增多并成为危害藜麦的主要害虫,对我国农作物生产构成潜在威胁。【目的】通过对宽胫夜蛾性信息素组分母体结构顺-11-十六碳烯乙酸酯(Z11-16:Ac)极性基团修饰,设计合成两种不同类型的类似物,并对其生物活性进行测定,为利用性信息素及类似物绿色防控宽胫夜蛾提供理论依据。【方法】以性信息素前体顺-11-十六碳烯醇(Z11-16:OH)为原料,三乙胺作缚酸剂(与酸酐反应时需加入催化剂4-二甲氨基吡啶),分别与2-溴丙酰氯、2-氯乙酰氯、二氟乙酸酐、三氟乙酸酐、甲基丙烯酰氯、2-丁烯酰氯发生酯化反应,经过柱层析分离纯化,合成卤素原子修饰的性信息素类似物K1—K4和碳链末端双键修饰的类似物K5—K6。采用梯度稀释配制不同浓度(0.001、0.01、0.1、1、10、100μg·μL^(-1))的类似物K1—K6溶液,利用不同浓度类似物直接刺激宽胫夜蛾雄蛾触角,测定类似物K1—K6的触角电生理(EAG)响应值;在性信息素诱芯中添加不同剂量的类似物配制性信息素类似物诱芯,于2021年夏季在北京延庆地区进行田间诱捕试验,根据统计诱芯的雄蛾诱捕量对类似物活性进行分析。【结果】类似物刺激浓度从0.001μg·μL^(-1)增至100μg·μL^(-1),雄蛾触角对类似物K1—K5的EAG响应值呈现出逐渐增大的趋势。其中宽胫夜蛾雄蛾触角对化合物顺-11-十六碳烯-2-溴丙酸酯(K1)的响应最强烈,在100μg·μL^(-1)下EAG响应值为1.34 mV。而类似物K5、K6的EAG活性相对较低,其EAG响应值在100μg·μL^(-1)下分别为0.67、0.57mV。田间诱捕试验表明合成的6种类似物均表现出较好的生物活性。其中类似物K5添加剂量为100μg时,15 d平均诱捕量最高,为35.00头,显著高于性信息素对照。类似物K1添加剂量为10μg时,15 d平均诱捕量为32.33头,显著高于性信息素对照。【结论】经过EAG测定和田间试验验证,类似物K1和K5表现出显著的增效活性,可作为宽胫夜蛾性信息素的增效剂;添加不同剂量的类似物K2、K3、K4、K6表现出了与性信息素相当的活性。研究结果可为宽胫夜蛾的绿色防控提供科学依据。

南京市农村居民点时空格局演变及驱动因素分析

合理分析农村居民点分布情况及驱动因素对城乡治理及乡村振兴具有重要意义.结合核密度分析、标准差椭圆和Pearson相关分析等方法对南京市2000~2020年农村居民点密度时空分布及驱动因素进行探究.结果表明:2000~2020年农村居民点主要向东南方向偏移,偏移强度2000~2010年大于2010~2020年;在500 m、1000 m和1500 m网格尺度下,归一化建筑物指数(NDBI)在2000年对农村居民点的影响最大,归一化植被指数(NDVI)在2010和2020年对农村居民点的影响最大.建议科学配置土地利用空间,合理布局农村居民点,以实现人类与自然和谐共生.

国产新型高压氧专用电控气动呼吸机运行稳定性的研究

目的探讨国产新型高压氧(HBO)专用电控气动呼吸机在高气压环境中以压力控制模式(PCV)运行时的稳定性。方法将呼吸机气动部分与模拟肺连接安装于舱内,呼吸机电控部分与模拟肺数据采集电脑置于舱外,在PCV模式下根据预设吸气压力(PI)分5个预设水平(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 kPa),按舱内压力分为0.10 MPa组、0.15 MPa组、0.20 MPa组,采集气道峰压(P_(peak))、潮气量(V_(T))和分钟通气量(MV);每组20个循环,比较各预设PI在3组中的参数的变化。结果随环境压力升高,各组预设PI中P_(peak)、V_(T)、MV均出现下降,差异均有统计学意义(均P<0.05),下降幅度<6%。结论国产高压氧专用电控气动呼吸机在HBO舱内(0.10~0.20 MPa)以PCV运行时随着舱内压力升高呼吸参数出现差异,但该变化在临床使用相对稳定范围内。

混合式教学模式在神经内科研究生高压氧科教学培训中的应用

目的探讨对神经内科研究生应用高压氧科混合式教学模式的效果。方法纳入2023年4—12月在高压氧科实习的神经内科研究生为研究对象。授课前发放调查问卷摸底研究生基础情况和需求后,应用混合式教学模式向研究生讲授高压氧理论知识和实际操作(共40学时),授课后根据出科考试和问卷调查评估教学效果。结果研究共纳入15名神经内科研究生,前期调查问卷显示,13名(86.67%)神经内科研究生希望将高压氧作为选修课程。采用混合式模式教学后,15名神经内科研究生均通过出科考试,出科考试成绩为(93.53±3.14)分。神经内科研究生对高压氧定义和作用机制的知晓率从授课前的40.00%(6例)提升至100%(15例)(P=0.0003);对高压氧治疗适应证和禁忌证的知晓率从授课前的33.33%(5例)提升至93.33%(14例)(P=0.0008);教学后,研究生对高压氧治疗方案的知晓率为80.00%(12例)。神经内科研究生对教学的满意度为100%(15例)。结论混合式教学模式可提升高压氧教学水平,使神经内科研究生有效掌握高压氧学科知识,教学效果显著。

高气压环境下注射泵安全性及准确性研究

目的观察高气压环境对注射泵使用安全性及准确性的影响。方法采用输液精度实时监测系统,分别设定注射泵流速为20 ml/h及5 ml/h,实时监测高压、常压环境下相应瞬时及平均流速变化。每个方案观察时间为120 min,采集每间隔10 min共13个时间点的流速数据,两个方案均重复检测10次。结果在高压及常压环境下使用注射泵均未出现安全事故。当设定注射泵流速为20 ml/h时,在高压环境或常压环境下瞬时流速及平均流速各时间点间差异均无统计学意义(P>0.05),相同时间点瞬时流速、平均流速在高压、常压环境下亦无显著差异(P>0.05)。当设定注射泵流速为5 ml/h时,相同时间点瞬时流速在高压、常压环境下均无显著差异(P>0.05);在高压环境下0 min瞬时流速显著快于120 min瞬时流速(P<0.05),其它时间点瞬时流速差异均无统计学意义(P>0.05);常压环境下各时间点瞬时流速差异无统计学意义(P>0.05);自20 min至100 min共9个时间点,发现高压环境下平均流速显著快于常压环境下平均流速(P<0.05),其余4个时间点高压、常压环境下平均流速差异均无统计学意义(P>0.05);高压或常压环境下各时间点平均流速差异均无统计学意义(P>0.05)。注射泵在高压及常压环境下120 min时间点平均流速(设定流速为20 ml/h及5 ml/h)误差率均在±2%范围内。结论高气压环境下使用注射泵相对安全;当注射泵设定流速较高(如20 ml/h)时,高气压环境对注射泵流速无明显影响;当注射泵设定流速较低(如5 ml/h)时,尽管高气压环境对瞬时流速及平均流速有部分影响,但注射泵最终平均流速仍在要求精度范围内。