MCAO大鼠皮质小胶质细胞极化的研究及脑泰方Ⅱ号的干预

目的探讨局灶性脑缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠皮质小胶质细胞(microglia,MG)极化的变化规律,揭示脑泰方Ⅱ号调节MG极化的方式与特点。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、MCAO模型组、米诺环素组、脑泰方Ⅱ号组,于造模后d 1、3、5、7激光共聚焦观察MG形态;Real time-PCR法检测M1/M2型表面标记分子表达。结果 MCAO模型组MG胞体胀大,突触变粗、短,分支减少;脑泰方Ⅱ号可明显促进突触分支与MG增殖。模型组M1/M2型标志分子随时间被不同程度活化;脑泰方Ⅱ号自d 3后(米诺环素自d 1后)可逐步明显抑制M1型标记分子,促进M2型标记分子表达(P <0.05或P <0.01);脑泰方Ⅱ号对M1/M2型标记分子的调节作用均在d 5后明显优于米诺环素(P <0.05或P <0.01)。结论 MCAO大鼠皮质MG极化具有时序性;脑泰方Ⅱ号可抑制MG M1型极化,促进其M2型极化,其调节作用较米诺环素具有一定的滞后性,但显示出良好的持续性。

脑泰方Ⅱ号含药血清对LPS诱导的小胶质细胞极化的调节作用

目的探明脑泰方Ⅱ号含药血清对LPS诱导的HAPI小胶质细胞形态、M1/M2型极化标记分子及炎性因子的影响。方法建立LPS诱导的HAPI细胞炎症模型,将培养的细胞分为:空白组、LPS模型组、脑泰方Ⅱ号组、米诺环素组。高内涵观察细胞形态与数量的变化,Real-time PCR检测M1型标志分子MHCⅡ、iNOS、MCP-1、CD11b,M2型标志分子Arg1、Mrc1、Ym1,促炎性因子IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α,抗炎性因子IL-4、IL-10、TGF-βmRNA水平。结果与正常组比较,LPS模型组细胞胞体变大,并呈多极化或阿米巴型,突触变粗变短;其M1型标记分子与促炎性因子的mRNA水平显著升高(P<0.01);而M2型标记分子Mrc1与抗炎性因子IL-4、TGF-β的mRNA水平显著降低(P<0.01)。经脑泰方Ⅱ号干预后,细胞胞体胀大部分恢复,突触变长,且细胞数量增多;M1型标记分子MHCⅡ、iNOS、CD11b与促炎性因子的mRNA水平显著降低(P<0.01),M2型标记分子与抗炎性因子的mRNA水平显著升高(P<0.01)。与米诺环素组比,脑泰方Ⅱ号对M1型标志分子mRNA水平的降低作用无明显优势(P>0.05),对促炎性因子IL-6、IL-12、TNF-α的mRNA水平的降低作用虽优于米诺环素组(P<0.01),但对IL-1β的调节作用与米诺环素组相比无显著差异(P>0.05);其对M2型标志分子的Mrc1、Ym1及抗炎性因子IL-4、TGF-βmRNA水平的提升作用均明显优于米诺环素组(P<0.01或P<0.05)。结论脑泰方Ⅱ号可通过对细胞形态、M1/M2型标记分子与炎性因子的调节作用抑制LPS诱导的HAPI细胞M1型极化,并促进M2型极化。脑泰方Ⅱ号对M2型标志分子及抗炎性因子的调节作用较米诺环素具有一定优势。