新疆橡胶草胚性悬浮细胞体系的建立

为了建立良好的橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)悬浮细胞培养体系,以橡胶草无菌苗为材料,探究橡胶草悬浮细胞生长变化过程,结果表明:在50 mL MS液体培养基中最适接种量为0.6 g,最佳继代时间是12 d,可以获得稳定的胚性悬浮细胞体系,再生率最高达到87.5%,为橡胶草的遗传再生体系奠定基础。

橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)小橡胶粒子蛋白基因的克隆与表达分析

以橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)为试材,在茉莉酸处理的根转录组数据分析的基础上,采用PCR的方法克隆获得小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)基因。通过生物信息学分析研究了该基因的特征,并检测了该基因的时空和原核表达情况。结果表明:SRPP3蛋白分子质量24.431 kDa,理论等电点(pI)4.64,属于酸性蛋白,二级结构以β-折叠为主,具有REF保守结构域,属于REF/SRPP家族成员之一。系统进化树分析显示TkSRPP3基因与短角蒲公英同源性最近;时空表达分析表明,TkSRPP3基因在六月龄的根中表达最高,推测该基因可能与天然橡胶的合成有关。TkSRPP3原核表达最佳诱导条件为浓度1 mmol·L^-1 IPTG诱导表达6 h。该研究为深入了解REF/SRPP家族中SRPP3在天然橡胶中的作用提供了参考依据。