13种抗生素对快生长分枝杆菌的体外抑菌效果评价

目的评价快生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM)临床分离株对13种抗生素的敏感性特征。方法收集首都医科大学附属北京胸科医院2015年1月至2019年12月从临床样本中分离出的98株RGM,包括25株偶发分枝杆菌、70株脓肿分枝杆菌和3株龟分枝杆菌。使用Sensititre RAPMYCO药敏板测定13种抗生素(阿米卡星、妥布霉素、阿莫西林-克拉维酸、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星、莫西沙星、克拉霉素、利奈唑胺、米诺环素、多西霉素、替加环素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑)对98株RGM临床分离株的体外抑菌活性。结果在所测定的13种抗生素中,阿米卡星对所检测的3种RGM临床分离株的体外抑菌活性最佳,对偶发分枝杆菌和脓肿分枝杆菌临床分离株的敏感率分别100.0%(25/25)和90.0%(63/70)。与多西环素、米诺环素相比,替加环素对RGM临床分离株的体外抑菌效果更好,对偶发分枝杆菌和脓肿分枝杆菌临床分离株的敏感率分别为100.0%(25/25)和72.9%(51/70)。莫西沙星和环丙沙星对偶发分枝杆菌临床分离株表现出较强的抑菌活性,敏感率分别为100.0%(25/25)和92.0%(23/25),而对脓肿分枝杆菌临床分离株几乎没有体外抑菌活性,耐药率均为95.7%(67/70)。此外,几乎所有检测的RGM临床分离株均对头孢西丁、多西环素、利奈唑胺、亚胺培南和甲氧嘧啶-磺胺甲噁唑耐药。结论阿米卡星、替加环素和克拉霉素对脓肿分枝杆菌和偶发分枝杆菌临床分离株具有较好的体外抑菌活性,但在不同菌株间依然存在差异,需要对每个菌种或临床分离菌株进行单独的药物敏感性试验。

堪萨斯分枝杆菌鉴定及耐药机制研究进展

堪萨斯分枝杆菌是临床经常分离到的非结核分枝杆菌菌种之一,常引起肺部和肺外感染以及全身播散性疾病。由利福平、异烟肼和乙胺丁醇组成的化疗方案是目前治疗堪萨斯分枝杆菌病的一线方案,治疗效果显著。近年来,随着堪萨斯分枝杆菌感染的不断增多,相应的实验诊断技术不断得到完善,并且建立了进一步的分型技术。同时,堪萨斯分枝杆菌病治疗药物的耐药机制也逐渐被报道。本文对堪萨斯分枝杆菌的鉴定技术、主要治疗方案及多种药物的耐药机制予以综述。

堪萨斯分枝杆菌临床分离株对异烟肼敏感性差异机制研究

目的:测定堪萨斯分枝杆菌临床分离株对异烟肼的敏感性,并探讨引发其差异的原因。方法:结核分枝杆菌标准株H37Rv(ATCC27294)、堪萨斯分枝杆菌标准株(ATCC12478),以及35株分离自非结核分枝杆菌感染患者的堪萨斯分枝杆菌临床分离株均来源于首都医科大学附属北京胸科医院。微孔板法测定35株堪萨斯分枝杆菌临床分离株加入外排泵抑制剂(氰化羰基-3-氯苯腙、二环己基碳二亚胺、维拉帕米和利血平)前后的异烟肼体外最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)变化,并评估其关联性;测定已知与异烟肼耐药相关的基因序列,了解基因序列多态性与MIC值的相关性。过表达结核分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌过氧化氢-过氧化物酶(KatG),利用生物层干涉技术检测蛋白与异烟肼亲和力,利用酶联免疫法检测蛋白过氧化物-过氧化氢酶活性。结果:35株堪萨斯分枝杆菌临床分离株中,异烟肼对5.7%(2/35)、71.4%(25/35)、2.9%(1/35)和20.0%(7/35)的菌株的MIC值分别为0.5、1、4和>32μg/ml;分别加入适量氰化羰基-3-氯苯腙、二环己基碳二亚胺、维拉帕米和利血平后,分别有5株(14.3%)、2株(5.7%)、9株(25.7%)和0株菌株的异烟肼MIC降低了50%以上。测序结果显示,堪萨斯分枝杆菌临床分离株的katG、inhA、kasA、ahpC、oxyR基因序列均与其标准菌株一致。堪萨斯分枝杆菌KatG蛋白与异烟肼亲和力常数(KD=1.45×10^(-4)mol/L)略低于结核分枝杆菌(KD=7.44×10^(-4)mol/L),但结核分枝杆菌KatG蛋白的过氧化物酶活性(318.69 U/mg)高于堪萨斯分枝杆菌(87.62 U/mg)。结论:不同堪萨斯分枝杆菌临床分离株对异烟肼体外药物敏感性差异明显,但已知的异烟肼耐药相关机制均不是该差异的主要原因。结核分枝杆菌比堪萨斯分枝杆菌对异烟肼更敏感可能与其KatG蛋白过氧化物酶活性更高有关。