柱前衍生化HPLC法分析沙参多糖中单糖组成

目的建立北沙参多糖中单糖的组成和含量的检测方法。方法以三氟乙酸水解沙参多糖，水解产物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮（PMP）生成衍生化产物，采用RP—HPLC法，色谱柱：C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相：体积分数为19％的乙腈溶液-醋酸铵缓冲液（醋酸铵-冰醋酸，pH5．5，体积比为100：1），等度洗脱，流速：1．0mL·min-1检测器：紫外检测器，检测波长：250nm，柱温：35℃。结果沙参多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、沪半乳糖、L-（＋）-阿拉伯糖等8种单糖（有2种未鉴定出的单糖）组成。D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-（＋）-阿拉伯糖的线性分别为4—80μmol·L-1（r=0．9990）、12～240μmol·L-1（r=O．9990）、5．6～1．12×10^3μmol·L-1（，=0．9994）、1．54×10^-3-0．80×10^3μmol·L-1（r=0．9990）、80．0—1．6×10^3μmol·L-1（r=0．9990）、64．00～1．28×10^3μmol·L-1（r=0．9992）；平均加样回收率分别为94．0％、88．5％、93．9％、95．9％、89．2％、90．8％。含量分别为0．22％、0．61％、8．55％、72．88％、4．79％、2．71％。结论该方法可以准确的测定出北沙参多糖中含有的各种单糖和含量。