贵州地区575例男性不育症患者染色体核型分析及Y染色体AZF微缺失情况观察

目的观察贵州地区男性不育症患者染色体核型异常、Y染色体精子生成基因(AZF)微缺失情况。方法贵州地区男性不育症患者575例,采用染色体G显带操作技术进行染色体核型分析,PCR与琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR检测Y染色体AZF的相关序列标签位点。结果 575例不育症患者中,染色体核型异常率为10.6%(61/575),最常见类型为47,XXY、占80.33%(49/61)。Y染色体AZF微缺失发生率为7.13%(41/575),最常见类型为仅AZFc缺失、占43.34%(19/41)。结论贵州地区男性不育症患者染色体核型异常及Y染色体AZF微缺失发生率较高,染色体核型及Y染色体AZF微缺失联合检测有助于男性不育症原因的发现,也有助于本病的诊断及治疗。

贵州9个少数民族线粒体DNA Region V及Y染色体DYS287位点多态性研究

调查贵州9个世居少数民族线粒体DNA Region V以及Y染色体DYS287位点多态性情况,为贵州相关少数民族的遗传背景研究提供可参考的分子遗传学数据。采用PCR-聚丙烯酰胺凝胶(PCR-SDS PAGE)技术、PCR-琼脂糖凝胶电泳技术检测线粒体RegionV 9 bp序列的缺失、Y染色体DYS287位点多态性。结果显示在本次研究的9个少数民族中线粒体DNA的Region V发现2种多态性,即标准型和缺失性,仡佬族、畲族、壮族、仫佬族、毛南族、蒙古族、回族、羌族、满族线粒体DNA Region V 9 bp缺失频率分别为:26.6%、25%、20%、18.3%、13.3%、10%、8.3%、6.7%、5%;Y染色体DYS287多态显示:仡佬族、仫佬族YAP+携带率分别为20%、1.67%,其余民族全部显示为YAP-。研究获得贵州9个民族人群线粒体DNA Region V及Y染色体DYS287位点多态数据,为各民族群体遗传分析及起源等提供相关遗传背景资料。

贵州地区105例血脂异常人群ApoE和SLCO1B1基因多态性及血脂特征分析

目的探讨105例贵州地区血脂异常人群载脂蛋白E(ApoE)和溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1(SLCO1B1)基因多态性特点及血脂特征。方法选取贵州地区就诊的血脂异常患者105例,采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(Apo-A1)及载脂蛋白B(Apo-B),分析血脂异常人群性别差异和血脂异常类型差异,采用连接酶测序技术检测全血ApoE[c.388T>C(Cys130Arg)和c.526C>T(Arg176Cys)]和SLCO1B1基因位点[c.521T>C(Val174Ala)和c.388A>G(Asn130Asp)]的多态性;收集“The 1000 Genomes Project”中千人基因组南方人群数据与105例贵州地区血脂异常人群比较,分析基因多态性位点分布频率。结果贵州地区血脂异常人群中,女性血清TC、HDL-C、Apo-A1水平高于男性(P<0.05);贵州地区血脂异常人群中,男性和女性ApoE 526C>T位点基因型频率及等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05);贵州地区血脂异常人群中,男性和女性ApoE各基因表型组E2、E3、E4比较,差异有统计学意义(P<0.05);贵州地区血脂异常人群中,男性和女性SLCO1B1 388A>G位点基因型频率及等位基因频率比较,差异有统计学意义(P<0.05);贵州地区血脂异常人群中,男性和女性SLCO1B1各基因表型组Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类比较,差异无统计学意义(P>0.05);贵州地区血脂异常人群和普通人群ApoE 526C>T位点基因型频率比较,差异有统计学意义(P<0.05);贵州地区血脂异常人群ApoE基因E2型者TG、TC、HDL-C及Apo-A1水平均高于E4型,其中TG指标比较、差异有统计学意义(P<0.05)。结论105例贵州地区血脂异常人群中,女性血脂水平高于男性;ApoE基因分布以E3型最高、E2型最低,男性E4型比例高于女性,E2型人群总体血脂水平高于E4型;SLCO1B1各基因型分布无性别差异。

不同乳腺癌细胞系中TLR5和NLRC4受体的表达和定位

目的:探究TLR5和NLRC4受体在不同乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435中的表达和定位情况,并探讨重组鞭毛素蛋白对乳腺癌细胞TLR5受体的激活情况。方法:利用Real-time PCR法检测MDA-MB-231、MCF-7和MDA-MB-435细胞TLR5和NLRC4 mRNA表达水平,用流式细胞仪检测MDA-MB-231、MCF-7细胞TLR5受体的表达和定位。纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白Fli C(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、Fli CΔ90-97(不能激活TLR5通路)、FliCL3A(不能激活NLRC4通路)、Fli CΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。用1μg/ml重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞,12 h后,ELISA法检测IL-8的分泌。结果:MCF-7细胞TLR5 mRNA表达水平最高,约是MDA-MB-435细胞的1 700倍,MDA-MB-231细胞TLR5表达水平是MDA-MB-435的约200倍。TLR5在MCF-7细胞浆和胞膜上均有表达,而MDA-MB-231细胞只在胞浆中表达。激活TLR5通路的Fli C和Fli C-L3A能够刺激MCF-7细胞分泌IL-8,而不激活TLR5通路的Fli CΔ90-97和Fli CΔ90-97:L3A则不能。结论:不同乳腺癌细胞系都表达TLR5和NLRC4,但是表达部位和表达水平不同。MCF-7细胞TLR5和NLRC4表达高于其他乳腺癌细胞系。乳腺癌细胞系表面的TLR5受体可以被鞭毛素蛋白激活,为进一步探讨TLR5通路的激活在乳腺癌细胞增殖中的作用提供实验基础。

消化道溃疡患者奥美拉唑代谢相关基因CYP2C19的多态性分布

目的:分析奥美拉唑代谢相关基因CYP2C19基因在消化道溃疡患者中的多态性分布。方法:选取消化道溃疡患者23例为研究对象,采用基因芯片的方法检测CYP2C19的基因多态性,并分析CYP2C19基因型总体分布和性别分布。结果:CYP2C19基因型(636GG,681GG)、(636GG,681GA)、(636GA,681GG)、(636GG,681AA)、(636GA,681GA)及(636AA,681GG)携带率分别为39.1%、30.4%、13%、8.7%、8.7%、0;CYP2C19基因快代谢型占39.1%,中代谢型占43.5%,慢代谢型占17.4%;不同性别在CYP2CI9基因分型上差异无统计学意义。结论:检测CYP2C19基因型可为奥美拉唑个体化用药提供指导。

贵州3个地域苗族人群mtDNA 9bp序列缺失频率

目的分析贵州3个地域苗族人群线粒体DNA COⅡ/t RNALys基因间小非编码V区串联重复序列9bp缺失频率。方法采用聚合酶链反应-聚丙烯酰胺凝胶法(PCR-PAGE)及DNA序列分析法进行检测。结果从江岜沙、黔西沙井、威宁龙街等3个地域苗族人群缺失频率分别为19.15%(9/47)、42.5%(17/40)和29.55%(13/43);岜沙苗族人群与沙井苗族人群9bp缺失频率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 3个地域苗族人群mtDNA 9bp缺失基因频率较高,不同地域苗族人群间缺失频率有一定差异。

贵州省侗族人群mtDNA 9 bp序列缺失频率及DYS287位点多态性研究

目的:分析贵州省侗族人群线粒体DNA 9 bp序列缺失频率及Y染色体DYS287位点的多态性。方法:用PCR-聚丙烯酰胺凝胶法(PAGE)分析mtDNA 9 bp缺失多态性,DNA序列分析法验证结果;用PCR-琼脂糖凝胶电泳检测法分析DYS287位点多态性。结果:在96例侗族男性个体中,mtDNA 9 bp缺失多态频率为13.54%(13/96),DYS287全部显示为YAP-。结论:获得贵州省侗族人群mtDNA 9 bp序列缺失频率及Y染色体DYS287位点多态数据,为该民族群体遗传分析及起源提供了相关遗传背景资料。

贵州少数民族CYP2C19基因多态性分布

目的:研究贵州少数民族的细胞色素P450 2C19(CYP2C19)基因多态性分布情况,为临床治疗提供更加可靠的依据。方法:选取2016年1月至2017年12月贵州地区代表性的世居及人数较多的少数民族作为研究对象,从苗族、布依族、侗族、土家族、彝族、回族无亲缘关系的健康人群中各选取100例进行研究,通过血液检测方法,分析入组少数民族人员的CYP2C19基因分型情况。结果:入组的100例土家族人群中快代谢型、中代谢型和慢代谢型的分布频率分别为54.00%、35.00%和11.00%;入组的100例苗族人群的分布频率分别为21.00%、61.00%和18.00%;100例侗人群的分布频率分别为28.00%、37.00%和35.00%;100例彝族人群的分布频率分别为16.00%、48.00%和36.00%;100例布依族人群的分布频率分别为20.00%、54.00%和26.00%;100例回族人群的分布频率分别为25.00%、41.00%和34.00%。结论:贵州地区少数民族中土家族人群CYP2C19基因代谢型中快代谢型占比较高,苗族人群中中代谢型占比显著,相对来说这两个民族对药物的代谢能力较好,其他民族的基因分型也较为显著,在临床用药治疗中应根据地区人群的基因多态性,采取针对性治疗措施。

贵阳地区孕妇人群MTHFR C677T基因多态性分布研究

目的探讨贵阳地区孕妇5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性分布特征,为科学补充叶酸提供依据。方法选取2017年1月～2018年6月贵州省人民医院孕检孕妇2644例,利用PCR-荧光探针法检测MTHFR C677T位点基因型,统计分析贵阳地区汉族与少数民族女性C677T基因多态性分布特征的差异,与已报到的其他地区汉族及少数民族女性比较。结果贵阳地区汉族女性MTHFR C677T位点CC、CT、TT基因型频率分别为37.8%、48.3%、13.9%,C、T等位基因频率分别为61.9%、38.1%,与贵阳地区苗族女性比较,差异有统计学意义(P <0.05),与布依族、侗族、土家族女性比较,差异无统计学意义(P> 0.05);与江苏、琼海、南宁、惠州、西安、宁夏、烟台、廊坊、长春、尚志比较,差异有统计学意义(P <0.05),与成都、昆明比较,差异无统计学意义(P>0.05),与柳州苗族、三江侗族、三亚黎族、延边朝鲜族女性比较,差异有统计学意义(P <0.05),与巴东土家族、大理白族、银川回族比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论贵阳地区孕妇MTHFR C677T基因多态性分布在不同民族之间以及与其他地区之间比较有一定差异,具有地区和民族特点。

49例Turner综合征的核型与临床表现分析

目的分析Turner综合征患者的核型、遗传特征与临床表现。方法采用细胞遗传学分析法、遗传咨询法对确诊的Turner综合征患者临床资料进行分析总结。结果纳入研究的49例Turner综合征的异常核型可分为5大类,分别是简单型、数目异常及嵌合体、结构异常及嵌合体、数目和结构均异常及嵌合体、含Y染色体核型。共检出18种核型,其中简单型比例最高,约占43%。结论 Turner综合征患者不同核型个体的表型可以有较大差异,嵌合体的临床表现取决于异常核型与正常核型细胞系的比例,含Y染色体的病例多有两性畸形。及早诊断Turner综合征对该病具有积极的防治意义,激素治疗可以改善身高及性征发育,含Y染色体注意防止性腺母细胞瘤的发生。

1674例孕妇羊水细胞G显带核型与染色体微阵列结果对比分析

目的:回顾性分析羊水核型和染色体微阵列分析(CMA)结果,评价两者在产前诊断中的应用价值。方法:对1674例孕中期孕妇于本院行G显带染色体核型分析和CMA的结果进行回顾性分析。结果:1674例中G带核型分析异常206例(12.31%),其中73例CMA未检出异常,多为平衡性染色体结构异常;CMA分析异常147例(8.81%),其中26例G带核型分析结果正常,多为小片段的重复或缺失。结论:染色体核型分析和CMA对检出染色体异常各具优缺点,并对检出的基因组异常具有互补性,使用核型分析联合CMA检测方式,可减少和预防新生儿出生缺陷。

染色体微阵列分析技术在自然流产病因学分析中的应用研究

目的探讨染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)技术在自然流产遗传因素分析中的应用,研究染色体异常与胚胎停育之间的关系。方法收集流产组织样本94例,应用CytoScan Optima芯片进行检测,分析造成胚胎停育的遗传学病因。结果成功检测91例样本,共检测出异常样本50例(54.95%),其中数目异常47例(94.00%),结构异常3例(6.00%)。结论染色体异常是导致胚胎停育的主要原因,CMA技术可对胚胎停育的遗传因素作出较为全面的评估,是一种可靠、稳定、高分辨的技术,可应用于临床流产的遗传学诊断,检测结果便于医生分析流产病因,对再生育风险评估提供指导。

贵州地区273对习惯性流产夫妇的染色体异常分析

目的:探讨染色体异常与贵州地区习惯性流产的关系。方法:采集就诊于贵州省某3级甲等医院的237对习惯性流产夫妇外周血,进行淋巴细胞培养,G显带,染色体核型分析。结果:273对(546例)习惯性流产的夫妇中异常染色体的检出率为8.60%(47/546),其中染色体平衡易位7例、罗伯逊易位3例及多态性变异37例,总异常率分别为14.89%(7/47)、6.38%(3/47)及78.73%(37/47);多态性变异中包括16例Y染色体异染色质增长;6例1号、9号、16号染色体次缢痕增长,15例D组和G组短臂随体变异。结论:染色体异常是引起贵州地区习惯性流产的重要病因之一,有必要对有习惯性流产史的夫妇双方进行异常染色体分析。

贵州原发性高血压人群相关药物基因多态性研究

目的 分析贵州原发性高血压人群抗高血压药物基因分布特点。方法 选取2015年12月至2016年12月在该院就诊的原发性高血压患者159例,采用PCR-熔解曲线法进行AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因检测,统计等位基因频率和基因型频率。结果 159例患者中检测到AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3的野生型等位基因频率分别为89.94%、96.23%、65.41%、42.47%、19.81%、64.15%、94.34%;突变型等位基因频率分别为10.07%、3.78%、34.91%、57.55%、80.19%、35.85%、5.66%;仅AGTR1等位基因频率在男性和女性患者间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 获得贵州原发性高血压人群抗高血压药物基因多态性数据,为建立贵州原发性高血压患者基因库奠定了基础。

贵州三个少数民族群体线粒体DNA多态性研究

目的研究贵州仡佬族、仫佬族、毛南族3个少数民族线粒体DNA的群体遗传特点。方法应用微测序法和限制性片段长度多态性方法对贵州3个少数民族线粒体DNA12个位点进行分析。结果在156名男性个体中共检出30个单倍型，单倍型H1、H23在仫佬族、毛南族的分布分别与仡佬族有差异差异，有统计学意义（P〈0．05）；单倍群M7在这三个民族间分布有差异，差异有统计学意义（P〈0．05）；其中仫佬族、毛南族的分布分别与仡佬族之间差异有统计学意义（P〈O．05）。结论贵州仡佬族、仫佬族、毛南族3个少数民族线粒体DNA单倍型分布有较大相似性，但在某些单倍型分布上存在一定差异；单倍群数据分析显示这三个民族单倍群分布与南方民族相似，同时也具有本民族的特征。

贵州苗族、布依族、侗族人群线粒体DNA多态性研究

目的:调查贵州苗族、布依族、侗族人群mtDNA的群体遗传特点。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术和DNA测序法,对3个民族男性个体mtDNA上12个SNP进行多态性分析。结果:285名个体共检出47种单倍型和12种单倍群。主要单倍型H32、H36、H10在3个民族间频率分布差异有统计学意义(P<0.05);3个民族共有单倍型为11种(72.98%)且在民族间频率分布差异有统计学意义(P<0.05),单倍群B(21.05%)和M7(21.05%)频率最高,B在苗族、布依族中分布频率与侗族间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:贵州苗族、布依族、侗族人群mtDNA单倍型分布相似,单倍群频率及主成分分析表现出南方群体特征。侗族母系遗传结构较苗族和布依族更为复杂,民族间存在基因交流的可能。

两种不同Y染色体AZF微缺失检测方法比较

目的比较多重聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳检测法(检测15个位点)和实时荧光定量PCR检测法(检测6个位点)检测Y染色体AZF微缺失。方法对575例不育症患者随机选择两种不同检测法进行检测(电泳法检测300例,荧光PCR法检测275例)。结果电泳法检测出AZF微缺率为8.33%(25/300),荧光PCR法检出AZF微缺率为5.82%(16/275);使用电泳法检出1例患者仅缺失AZFb(sy133、sy145),该位点为荧光PCR法不涉及,同时患者染色体核型为46,XY,del(Y)(q11.23)。结论虽然电泳法检出率高于荧光PCR法,同时检测染色体核型可弥补荧光PCR漏检率。

贵州苗族、布依族、侗族人群线粒体DNA9bp序列缺失频率分析

目的调查贵州苗族、布依族、侗族人群线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅱ和tRNA。”基因间小非编码V区串联重复序列9bp的缺失频率。方法采用聚合酶链反应一聚丙烯酰胺凝胶方法及DNA序列分析法对105名苗族、97名布依族、102名侗族的男性个体线粒体DNA的9bp缺失多态频率进行分析。结果在304名男性中仅发现标准型和短型（即9bp缺失）两种多态，缺失频率为23．0％（70／304）。其中苗族缺失频率为28．6％（30／105）、布依族为26．8％（26／97）、侗族为13．7％（14／102）。三者之间的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论贵州苗族、布依族、侗族人群线粒体DNA9bp缺失基因频率均较高，三者之间差异有统计学意义。

贵州6个少数民族线粒体DNA 9bp序列缺失频率研究

目的:研究贵州省6个世居少数民族线粒体9bp序列缺失情况。方法:采用PCR法及聚丙烯酰胺凝胶技术检测线粒体基因组色素氧化酶Ⅱ和tRNAlys基因间非编码序列中含9bp序列缺失情况。结果:在研究的6个少数民族中只发现标准型和缺失性2种多态性,仡佬族、仫佬族、畲族、毛南族、羌族、蒙古族线粒体DNA 9bp缺失频率依次为:26.9%、17.3%、23.1%、11.5%、7.7%、9.6%。结论:贵州省这6个世居少数民族线粒体9bp序列缺失频率较高,各民族的缺失频率有一定差异。