新颖栽培丹参材料的rDNA内外转录间隔区(ITS和ETS)分子标记鉴定

本研究对前期发现的2个新颖多年生大紫花单株(V-HNYZ-bV-1和W-SXXA-bV-1)和1个二年生白花丹参(Salvia miltiorrhiza)栽培居群(W-SCHY-W-1)材料,进行了基于其rDNA内、外转录间隔区(ITS和ETS)的分子标记鉴定。结果表明:W-SXXA-bV-1和V-HNYZ-bV-1的ITS的GC含量均较高,W-SCHY-W-1的ITS和ETS的GC含量最低;新颖材料W-SXXA-bV-1和V-HNYZ-bV-1的ITS序列变异率较高,均高于W-SCHY-W-1,而对于ETS序列,W-SXXA-bV-1和V-HNYZ-bV-1接近(7.1%~6.5%),但低于W-SCHY-W-1(8.2%);W-SXXA-bV-1与V-HNYZ-bV-1亲缘关系较近,W-SXXA-bV-1、V-HNYZ-bV-1和W-SCHY-W-1均与Q-DZH-V-4亲缘关系较远,V-HNYZ-V-1与Q-DZH-V-4亲缘关系很近。上述结果与栽培形态观察结果都高度一致表明:W-SXXA-V-1和V-HNYZ-V-1是康定或甘西鼠尾草,新颖单株材料W-SXXA-bV-1可能为W-SXXA-V-1的突变体,V-HNYZ-V-1和Q-DZH-V-4同为荔枝草,V-HNYZ-bV-1可能为混杂在V-HNYZ-V-1中的康定或西藏鼠尾草,与W-SXXA-bV-1非常相似。W-SCHY-W-1为粘毛鼠尾草。

中学语文课堂对话教学的探索与思考

对话教学是师生、生生之间通过口头语言及书面语言、肢体语言等进行的交往与互动,以培养学生的语文综合能力。中学语文课堂对话教学要创设民主、平等的课堂氛围,要丰富对话形式,要抓住文本的要点。

丹参种子活力快速测定方法的建立及其与萌发率的相关性

本研究采用溴麝香草酚蓝(BTB)法快速测定丹参种子活力,通过类原位萌发与常规萌发试验,研究BTB快速测定种子活力与萌发率之间的相关性。结果表明,丹参种子类原位萌发率(y1)与BTB法测得的种子活力(x)的回归方程为y1=0.983 5 x1+1.859 5,R_(1)^(2)=0.996,常规萌发率(y2)与BTB法测得的种子活力(x)的回归方程为y2=0.347 1 x2+51.95,R_(2)^(2)=0.972,表明BTB法可用于快速测定丹参种子活力并预估其萌发率。

栽培丹参居群内转录间隔区(ITS)遗传多样性分析

【目的】为了解栽培丹参rDNA内转录间隔区(ITS)的遗传多样性、系统发育关系和寻找其单核苷酸多态性(SNP)指纹用以准确快速鉴别丹参栽培居群。【方法】采用PCR技术扩增了国内33个地区的42个栽培丹参居群的ITS序列并进行了比较分析。【结果】丹参rDNA的ITS1、5.8SrDNA和ITS2区的长度分别为203~229、164和226~229 bp;其ITS1区长度变化较大,而ITS2区核苷酸变异较大。其SNP变异位点存在于ITS1和ITS2区,变异位点数分别为19和37个,变异率分别为8.30%和16.16%。【结论】基于ITS的SNP指纹只能鉴别3个栽培丹参居群;ITS系统发育树显示,丹参栽培居群之间的亲缘关系与地理来源关系不大。

栽培丹参居群rbcL基因遗传多样性及系统学分析

为了解栽培丹参居群叶绿体rbcL基因的遗传多样性及其系统发育关系,本研究以征集到的国内40个栽培丹参居群为材料,采用PCR扩增其rbcL基因,首次利用生物信息学手段分析比较基因及其推定氨基酸序列的差异.结果表明:克隆得到的丹参rbcL基因部分序列(开放阅读框)经与参考序列对位排齐后长度为1272 bp;共有43个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)变异位点,其中转换位点33个、颠换位点10个,变异率为3.4%;基于rbcL基因的SNP指纹可区别6个栽培丹参类群;rbcL基因的推定氨基酸序列差异分析首次发现了10个氨基酸变异位点,其中有5个实质性氨基酸变异可能导致rbcL的空间结构及其与rbcS复合后的活性变化;基于丹参rbcL基因的推定氨基酸序列指纹可区别5个栽培丹参类群.本研究基于rbcL基因揭示出的不同地区丹参种质资源的遗传多样性和系谱关系,为栽培丹参种质的遗传鉴定和光合能力差异的分子机制研究奠定了基础.

人参属不同栽培居群内转录间隔区(ITS)遗传多样性分析

为建立快速分子鉴别人参属栽培居群的方法,确定其亲缘关系,本研究对人参属34个栽培居群的核糖体DNA(ribosome DNA,rDNA)内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)片段进行了PCR扩增、测序、多重比对及遗传多样性分析,并构建了人参属居群的系统发育树.结果表明,人参和西洋参5.8S区分别为162 bp和160 bp,且ITS1、5.8S区和ITS2均存在人参和西洋参的分子鉴别指纹.人参与西洋参单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点主要集中分布在4个位点上,人参为(ITS1)A^(143)---(5.8S)A/G^(262)---(ITS2)C^(441)---(ITS2)T^(452),而西洋参为(ITS1)C^(143)---(5.8S)G^(262)---(ITS2)T^(441)---(ITS2)C^(452).基于人参和西洋参的ITS2序列可将西洋参完全聚为一小支,且将高丽参、林下参和园参区分成两个分离小支;所有29个人参居群的ITS2序列聚类,可将大部分的园参聚在一起,说明在种内人参与园参的亲缘关系较远.本研究为快速鉴定人参属的人参和西洋参提供了新方法,为人参属植物亲缘关系的进一步研究奠定了基础.

丹参种质多样性及鉴定研究进展

药用植物丹参常异花授粉,生态适应强,种质资源丰富,药用价值高。生产上随意引种和管理不规范造成中药材丹参种源混乱、质量不稳定,其遗传多样性及种质资源鉴定研究不足。本文从形态学特征、活性物质、分子标记技术等方面对丹参种质资源鉴定的研究进展进行了综述,分析了存在的主要问题,提出了相关建议,以期为进一步开展丹参种质资源的分子鉴定、合理开发利用与新品种选育等提供参考。